郝春丽
- 作品数：10 被引量：29H指数：4
- 供职机构：河南农业大学牧医工程学院更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 基因枪免疫技术研究综述被引量：2
- 2007年
- DNA疫苗作为第三代疫苗,在人类防治疾病传染方面起到了重要作用,而基因枪的发明,为DNA疫苗的应用开辟了新的篇章。本文对基因枪的使用方法及其免疫机理和优点进行了综述。
- 刘闯郝春丽
- 关键词：基因枪DNA疫苗免疫
- 传染性支气管炎病毒NP基因在大肠杆菌中的可溶性表达被引量：2
- 2007年
- [目的]生产具有生物活性的、可用于临床检测的NP融合蛋白抗原,建立可用于临床检测IB抗体诊断的试剂盒。[方法]利用RT-PCR技术扩增传染性支气管炎病毒M41株的NP基因,将之克隆并重组于原核表达载体pET-28a,经PCR、酶切鉴定及序列分析构建重组表达载体pET-NP,研究NP基因在大肠杆菌中的可溶性表达。[结果]将重组载体pET-NP转化表达菌BL21,获得阳性重组菌pET-NP-BL。阳性重组子经IPTG诱导后,目的基因NP获得了高效表达。表达产物经过SDS-PAGE与Western blot检测表明,NP分子量约为49 kD,且以可溶性蛋白形式存在;表达产物可与特异性传染性支气管炎病毒抗血清发生免疫反应。表达产物可以用作检测IB抗体的抗原。[结论]该融合蛋白可用于生产检测IB的诊断试剂,生物安全性高,生产方便。但尚需建立适当的检测方法,进一步研究其实际诊断价值。同时也可以研制新型IB重组亚单位疫苗,进一步研究其刺激动物机体产生的细胞与体液免疫,深入研究新功能,筛选新的抗原表位,为生产新型IB基因工程疫苗奠定基础。
- 郝春丽王泽霖王新卫姚慧霞周欣
- 关键词：核蛋白
- 禽流感疫苗研究进展被引量：5
- 2007年
- 柴丽娜杨大光郝春丽陈恩林王泽霖
- 关键词：禽流感疫苗禽流感病毒A型流感病毒传染病禽类抗原
- 禽类干扰素的研究进展被引量：5
- 2007年
- 干扰素在抗病毒、抗肿瘤、免疫调节等方面的应用展现出了很多优势,尤其是基因工程重组技术的应用使干扰素在临床生产中的大规模使用成为可能。本文从干扰素的产生、分子结构、生物学功能等几个方面综述了近年来关于禽类干扰素的研究进展。
- 郝春丽康孟佼田兆龙柴丽娜陈恩林王泽霖
- 关键词：干扰素抗病毒免疫调节基因重组
- 禽用基因疫苗的研究进展被引量：3
- 2007年
- 郝春丽田兆龙陈同王泽霖
- 关键词：基因疫苗禽用规模化养殖亚单位疫苗养禽业基因工程
- IBVNP基因的可溶性表达及间接ELISA方法的建立被引量：1
- 2009年
- 利用RT-PCR技术将传染性支气管炎病毒M41株的N基因克隆至原核表达载体pET-28a,构建了重组表达载体pET-NP。将其转化大肠杆菌BL21,经IPTG诱导后,NP基因获得高效表达。经SDS-PAGE与Western blot-ting检测证实表达的NP蛋白具有免疫学活性,且以可溶性蛋白形式存在。以此抗原建立了检测传染性支气管炎病毒抗体的酶联免疫吸附试验(NP-ELISA)方法。敏感性测定证实,当阳性血清1∶500倍稀释时,D450值为0.356,说明仍能检测到IB抗体,该方法比较敏感。特异性试验显示该法与AIV H9、H5I、BD、ND、EDS76的标准阳性血清不发生交叉反应,具有良好的特异性;NP-ELISA和商品化试剂盒对75份血样的阳性检出率分别为57.33%和61.33%,符合率为85%。NP-ELISA与商品化的HI试剂检测结果没有明显相关性,其效价与攻毒保护也没有相关性。
- 王新卫郝春丽何宏轩王泽霖王川庆
- 关键词：核蛋白可溶性表达
- 鸡传染性支气管炎病毒S1和NP基因的表达及NP-ELISA方法的建立
- IBV血清型众多,不同血清型间交叉保护差,给诊断与防制带来很大的困难;为建立一种更为简便、快速、群特异性、能用于大面积检测抗体的方法,来补充中和试验和HI试验,以评价疫苗的免疫效果,本研究将对NP-ELISA和S1-EL...
- 郝春丽
- 关键词：传染性支气管炎病毒纤突蛋白核蛋白
- 文献传递
- 检测传染性支气管炎抗体NP-ELISA方法的建立被引量：4
- 2007年
- 【研究目的】建立可在临床上检测鸡传染性支气管炎抗体的检测IBV抗体的间接ELISA方法;【方法】以表达的重组IBVNP蛋白为包被抗原,将之包被于聚苯乙烯酶标板上,以封闭液进行封闭,然后加待检血清在37℃作用1h,洗涤后加酶标兔抗鸡IgG抗体,在37℃作用1h,加底物显色,终止反应后测定OD值;【结果】抗原包被浓度为1.45μg/ml,待检血清最佳稀释度为1:40,酶标二抗最佳工作浓度为1:1000,确定阳性判定标准为OD450≥0.314。NP-ELISA与AIVH9、H5、H7、IBD、ND、EDS76的标准阳性血清不发生交叉反应,具有良好的特异性;【结论】NP-ELISA具有特异性强、灵敏度高、重复性好、方便快速的特点,可用于临床IB抗体的检测。
- 郝春丽李文林董清平王泽霖王新卫杨大光
- 关键词：抗体NP蛋白间接ELISA
- 人和哺乳动物禽流感(H_9N_2亚型)、新城疫血清抗体水平的调查报告被引量：2
- 2006年
- 取了70份相关人员的血样(饲养员,兽医等)以及99份很少与禽类接触的非相关人员血样,通过HI试验发现人类对禽流感、新城疫病毒均有一定的易感性,而且相关人员比非相关人员的抗体水平普遍偏高。
- 柴丽娜杨大光郝春丽王泽霖
- 关键词：禽流感新城疫H9N2
- H9N2亚型禽流感病毒NS1基因的进化分析被引量：4
- 2008年
- 利用RT—PCR方法，扩增了1998-2005年间分离的9株H9N2亚型禽流感病毒的NS1基因，对其进行了序列测定和进化分析。序列分析表明，9株AIV NS1基因完整的阅读框均为654bp，编码217个氨基酸，其核苷酸和推导的氨基酸同源性分别为95．4％～99．8％和93．6％～100％；9株病毒的NS1蛋白的C端均有13个氨基酸的缺失；进化分析表明，9株AIV属于A群，且形成一个独立分支，在该分支中，只有Ck／HN／A3／98株属于Ck／HK／Y280／97-like亚类，且与Ck／BJ／8／98的进化关系最近，其余8株属于Ck／SH／F／98-like亚类，说明Ck／SH／F／98-like亚类的H9N2亚型AIV在中国大陆的鸡群中广泛存在。NS1基因的进化及其编码产物的特性分析，为AIV的毒力变异、致病机制、药物靶位点的设计及鉴别诊断的研究奠定了基础。
- 李建丽陈恩林李和平郝春丽毕丁仁王泽霖
- 关键词：禽流感病毒H9N2亚型NS1基因进化分析
