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郭风劲: 作品数：277 被引量：1,398H指数：17; 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>; 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家科技支撑计划更多>>; 相关领域：医药卫生生物学更多>>

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去分化重编排脂肪干细胞在张应力刺激下成骨分化的研究: 2013年; 目的探讨去分化重编排脂肪干细胞在张应力刺激下的成骨分化并探讨其分子机制。方法分离人脂肪干细胞（hASCs），取第3代hASCs进行去分化重编排并标记为去分化重编排脂肪干细胞（De—hASCs）。张应力刺激条件下，将De．hASCs和hASCs在成骨诱导液中培养1周。并于培养4d和7d后检测碱性磷酸酶（ALP）活性，Runx2的mRNA和蛋白表达水平，骨形态发生蛋白（BMP）-2和基质金属蛋白酶（MMP）-3的mRNA表达水平。结果张应力刺激4d后，De—hASCs组的ALP活性高于hASCs组，但差异无统计学意义（P〉0．05）。张应力刺激7d后，De—hASCs组ALP活性高于hASCs组，且差异有统计学意义（P〈0．05）。张应力刺激4d和7d后，De—hASCs组Runx2的mRNA和蛋白表达水平均明显高于hASCs组，且差异有统计学意义（P〈0．05）。张应力刺激4d和7d后，De—hASCs组BMP-2和MMP-3的mRNA表达水平均明显高于hASCs组，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论张应力刺激条件下，去分化重编排脂肪干细胞具有更强的成骨分化能力，且与其上调BMP-2和MMP-3基因表达相关。; 叶亚平胡伟华杜宇吴颖星杨开祥郭风劲; 关键词：成骨分化脂肪干细胞

YIGSR五肽对骨肉瘤细胞分泌VEGF和MMP-3的抑制作用被引量：2: 2005年; 目的　探讨酪氨酸异亮氨酸甘氨酸丝氨酸精氨酸(YIGSR)抑制肿瘤侵袭与转移可能的机制。方法　在培养的人骨肉瘤细胞MG 63中分别加入不同量的YIGSR,用免疫组化法和逆转录聚合酶链反应分别定性和半定量检测血管内皮生长因子(VEGF)和基质金属蛋白酶 3(MMP 3)表达的变化。结果　加入不同量YIGSR的骨肉瘤细胞表达的VEGF和MMP 3也不同,加入YIGSR的量越多,VEGF和MMP 3的蛋白和mRNA的量就越少,呈剂量依赖性(P<0.05)。结论　YIGSR能有效地抑制骨肉瘤细胞VEGF和MMP 3的分泌,在抑制骨肉瘤的侵袭与转移中可能发挥了一定的作用。; 宋登新陈安民郭风劲雷鸣王江; 关键词：YIGSR MMP-3 骨肉瘤细胞 VEGF 分泌异亮氨酸

外踝上皮瓣修复足部软组织缺损20例及失败病例分析被引量：1: 2011年; 目的探讨外踝上逆行岛状皮瓣修复足部远端软组织缺损的效果,分析失败病例原因和预防措施。方法应用腓动脉终末穿支的降支为血管蒂,行外踝上逆行岛状皮瓣修复前足和足外侧软组织缺损20例。结果 18例皮瓣成活,皮瓣质地优良,随访6-12个月,外观及功能满意。2例出现部分坏死,延误治疗。结论外踝上逆行岛状皮瓣是修复足部软组织缺损的良好皮瓣。该皮瓣切取方便,血供丰富,不损伤肢体主要血管。但病例选择不当,就会延误治疗,造成严重后果。; 江渟郭风劲周业金; 关键词：外科皮瓣足损伤

鼠骨骺干细胞免疫纯化和pTRE-PTHrP（38-94）反应质粒的构建被引量：6: 2008年; 目的免疫纯化新生大鼠骨骺干细胞，克隆甲状旁腺相关蛋白的中间片段PTHrP（38-94）基因并构建四环素反应性元件调控的反应质粒pTRE-PTHrP（38-94）。方法采用免疫磁珠技术分离纯化具有FGFR-3特异性表面标志的骨骺干细胞，分别以FGFR-3抗体和PCNA抗体对骨骺干细胞的细胞爬片进行免疫细胞化学鉴定。提取骨骺干细胞的总RNA，以RT-PCR方法获得带有酶切位点PTHrP（38-94）基因片段，扩增的DNA片段与含潮霉素筛选标记的四环素反应性元件载体pTRE-2Hyg均双酶切后连接，转化、扩增后对重组质粒进行提取和酶切、测序鉴定。结果免疫荧光证实所取材分离并纯化的细胞为骨骺干细胞；经限制性内切酶Bam HⅠ、NotⅠ酶切图谱分析和DNA序列测定证实目的基因已经插入重组质粒。结论运用显微取材和免疫纯化技术可以成功分离纯化骨骺干细胞；成功克隆PTHrP（38-94）基因并构建了反应质粒pTRE-PTHrP（38-94），为进一步明确PTHrP（38-94）片段的生物学功能及其在成软骨和成骨分化过程中的作用奠定了基础。; 张树威陈安民游洪波廖晖宋登新王江谢柏臻刘铁郭风劲; 关键词：干细胞免疫磁化分离

Wallis腰椎弹性固定术治疗腰椎退变性腰痛疗效观察被引量：4: 2010年; 目的观察Wallis棘突间动态稳定系统治疗腰椎退变性腰痛的疗效。方法 2007年10月～2008年12月共使用Wallis棘突间动态稳定系统治疗腰椎退变性腰痛患者37例,男27例,女10例,年龄19～75岁,平均48.0岁。手术开窗摘除突出的间盘,置入Wallis系统。对患者术前、术后1月、术后1年进行VAS及ODI评分。术后随访(12.1～25.4)月,平均(17.9±4.0)个月。结果 1例术后半年出现腰痛复发,保守治疗缓解。VAS及ODI术前评分(7.8±1.0)分,(77.9±4.8)%;术后1月评分(1.6±1.0)分,(24.2±4.6)%;术后1年评分(0.8±0.7)分,(13.0±3.8)%。运用SPSS13.0分析,P<0.01,改善均具有统计学意义。结论 Wallis系统作为一种弹性固定系统,能够保留固定节段一定的活动度,维持腰椎稳定,预防临近节段退变,是治疗腰椎退变性腰痛的有效手段。; 解杰郭风劲王建超李锋方煌陈安民; 关键词：腰椎腰痛椎间盘

壳聚糖/纳米羟基磷灰石分层复合支架的生物相容性研究被引量：7: 2008年; 制备壳聚糖/纳米羟基磷灰石(CS/nHA)分层复合支架,对其进行细胞毒性评价。分离培养大鼠软骨细胞接种于支架,相差显微镜和扫描电镜观察细胞的黏附及生长情况。动物皮下埋植试验观察其组织相容性。实验结果证实壳聚糖/纳米羟基磷灰石分层复合支架具有良好的生物相容性,有望成为较好的骨软骨组织工程支架。; 祁军陈安民郭风劲孙淑珍谢柏臻张伟凯张树威; 关键词：壳聚糖纳米羟基磷灰石生物相容性

细胞分选技术应用的研究进展: 2011年; 随着细胞治疗和基因治疗技术的不断发展，细胞的相关研究已经逐渐成为当前医学乃至整个生命科学领域中的研究热点，细胞培养已经成为科研中一个很重要的技术，而要获得较纯的目的细胞，细胞分选、纯化已成为关键的问题。本文就细胞分选技术及其相关原理、应用和最新的技术发展作一综述。; 陈少坚郭风劲; 关键词：基因治疗技术细胞治疗生命科学细胞培养

肺癌抑癌基因1对人前列腺癌T_3B细胞增殖的抑制效应被引量：3: 2009年; 背景与目的:肺癌抑癌基因1(tumor suppressor in lung cancer1,TSLC1)是新近发现的一种肿瘤抑制基因,它在包括前列腺癌在内的多种恶性肿瘤中是失活的。本研究通过将TSLC1转染至人前列腺癌T3B细胞来观察T3B细胞增殖的受抑情况。方法:将克隆有TSLC1全长cDNA的真核重组载体pCI-TSLC1稳定转染至前列腺癌T3B细胞中(实验组)。以转染空质粒pCI-neo的T3B细胞为对照组,野生型T3B细胞为空白组。四甲基偶氮唑蓝法检测细胞增殖,FACSort流式细胞仪检测细胞周期,AnnexinV/PI双染法检测细胞凋亡情况。结果:实验建立了高表达TSLC1蛋白的稳定细胞株。与对照组和空白组相比,实验组细胞生长速度减慢,增殖受到明显抑制,G0/G1期细胞为(80±3)%,高于对照组(66±4)%和空白组(64.2±0.9)%;S期细胞为(11.1±1.3)%,低于对照组(24.0±2.4)%和空白组(26.2±0.6)%,组间差异有显著性(P<0.01),实验组细胞周期发生了明显的G0/G1期阻滞。实验组细胞早期凋亡率,晚期凋亡率和总凋亡率分别为(11.9±0.4)%,(10.2±0.4)%和(22.1±0.6)%,与对照组和空白组细胞相比均明显升高(P<0.01)。结论:TSLC1基因明显抑制T3B细胞增殖,并诱导细胞发生凋亡。; 袁林陈安民郭风劲祝文涛王江廖晖; 关键词：前列腺肿瘤抑癌基因 TSLC1

动态压应力促进软骨前体干细胞Sox9和细胞外基质表达的实验研究被引量：3: 2016年; 目的：研究间断性动态压应力对体外培养的大鼠软骨前体干细胞Sox9及软骨特异性细胞外基质表达的影响。方法细胞免疫磁珠分选并体外培养大鼠软骨前体干细胞（PSC），使用自行设计制备的细胞压力装置对细胞进行间断性（1 d刺激12 h，分别1 d，3 d和7 d）的压应力刺激（90 mmHg，1 mmHg=0.133 kPa），未刺激组为对照组，采用荧光实时定量聚合酶链反应检测各组细胞的Sox9和软骨特异性细胞外基质（Ⅱ型胶原）的基因表达情况，Western印迹检测细胞Sox9和Ⅱ型胶原蛋白表达水平并进行分析。结果在动态压应力刺激下，软骨前体干细胞各时间点Sox9和Ⅱ型胶原的基因表达水平明显增加并高于对照组（P〈0.05）；压力刺激1 d，3 d和7 d后，于对照组相比，其Sox9和Ⅱ型胶原mRNA表达水平分别增加了约1.9倍和2.1倍，3.5倍和3.4倍以及4.6倍和4.3倍。1 d压力组Sox9和Ⅱ型胶原蛋白表达与对照组无明显差异（P〉0.05），3 d和7 d时间点的蛋白表达增加并高于对照组（P〈0.05）；Sox9和Ⅱ型胶原基因和蛋白表达水平都随着压应力刺激时间增加而增加。结论间断性动态压应力可以明显增加大鼠软骨前体干细胞Sox9和Ⅱ型胶原的表达，并可能会促进软骨前体干细胞向软骨细胞的分化。; 李昆朋张雯李忠马金柱祁军杜宇郭风劲; 关键词：细胞外基质干细胞

短周期动态压应力通过Ca^2＋通道调控生长板软骨细胞Sox9及Ⅱ型胶原表达被引量：1: 2016年; 目的研究短周期动态压应力对体外培养的大鼠生长板软骨细胞Sox9、Ⅱ型胶原mRNA及蛋白表达水平的影响，探讨L-型钙离子通道是否参与该力学信号转导过程。方法分离并体外培养两周龄SD大鼠生长板软骨细胞，传代后的生长板软骨细胞分为4组：对照组、单纯压应力组、硝苯地平组及压应力联合硝苯地平组。其中对照组不施加力学及药物干预，单纯压应力组通过四点弯曲力学加载仪予以周期性压应力（2 000 με，1.0 Hz）干预，硝苯地平组添加L-型钙离子拮抗剂硝苯地平（10 μmol/L）但不施加力学干预，压应力联合硝苯地平组添加硝苯地平（10 μmol/L）并施加周期性压应力干预（2000 με，1.0 Hz）。实验处理6 h，运用荧光定量PCR及Western blot方法检测各组细胞的Sox9、Ⅱ型胶原mRNA和蛋白表达情况。各组细胞行Fluo-3/AM染色，激光共聚焦显微镜观察并分析细胞内钙离子的荧光强度。使用SPSS17.0软件对数据进行统计学分析。结果单纯压应力组生长板软骨细胞的Sox9的mRNA与蛋白表达水平较对照组分别增加（82.97±24.95）%和（79.67±26.03）%，差异有统计学意义（P〈0.05）；Ⅱ型胶原的mRNA与蛋白表达水平较对照组分别增加（118.93±34.40）%和（95.93±29.87）%，差异有统计学意义（P〈0.05）。压应力联合硝苯地平组生长板软骨细胞的Sox9、Ⅱ型胶原的mRNA与蛋白表达水平低于单纯压应力组（P〈0.05），但高于硝苯地平组（P〈0.05）。激光共聚焦显微镜能清晰观察到细胞内钙离子染色后产生的荧光，但各组平均荧光强度差异无统计学意义（P〉0.05）。结论适当的短时间周期性压应力能上调生长板软骨细胞Sox9及Ⅱ型胶原mRNA与蛋白的表达水平，钙离子通道可能参与该力学信号转导过程。; 张津铭陈安民吕正涛李兴艳郭风劲祁军; 关键词：软骨细胞钙通道

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