阿彩岭
- 作品数：7 被引量：15H指数：2
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- 发文基金：国家自然科学基金博士科研启动基金湛江市科技攻关计划项目更多>>
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- PCR法鉴定Rorcγt^(GFP)突变小鼠子代基因型
- 2012年
- 目的探讨PCR(聚合酶链式反应)法鉴定RorcγtGFP突变小鼠子代基因型的可行性。方法 Rorcγt(-/-)基因型雄性与Rorcγt(-/+)基因型雌性小鼠产生的6只新生小鼠,取尾部组织提取DNA,进行PCR扩增及琼脂糖凝胶电泳检测PCR产物,根据产物片段大小鉴定新生小鼠基因型。结果 3只小鼠PCR产物具有241bp片段,为Rorcγt(-/-)基因型;其余3只具有174bp及241bp片段,为Rorcγt(-/+)基因型。结论 PCR是检测RorcγtGFP突变品系小鼠基因型的简便。
- 陈嵘祎阿彩岭周英樊翌明
- 关键词：核受体聚合酶链式反应
- 靶向IGFBP7慢病毒载体遏制恶性黑素瘤的实验研究被引量：1
- 2015年
- 目的构建靶向IGFBP7的LV5病毒表达载体,并检测其表达效能及在黑素瘤细胞系中促凋亡的作用。方法以人igfbp7基因序列作为模版合成编码核酸序列,通过限制性内切酶NotⅠ和NsiⅠ酶切、T4 DNA连接酶连接,将igfbp7插入LV5-GFP,构建靶向IGFBP7的慢病毒质粒表达载体,筛选阳性克隆后与包装质粒通过脂质体共转染SK-MEL-28人黑素瘤细胞株,对照组转染LV5空载体。病毒感染SK-MEL-28,采用荧光显微镜观察感染的效率,Realtime PCR检测igfbp7m RNA的表达,流式细胞术检测对照组及处理组细胞凋亡率。统计数据分析LV5-NC-IGFBP7促黑素瘤凋亡的效9能。结果成功构建LV5-NC-IGFBP7,病毒转染后测定其滴度为1x10 UT/m L,细胞感染率在80%以上,Realtime PCR检测表明处理组igfbp7 m RNA表达高于对照组(P<0.01),但对照组及处理组凋亡率差异无统计学意义(P>0.05)。结论靶向IGFBP7的LV5-NC-IGFBP7病毒载体能有效促进igfbp7 m RNA高表达,但促恶性黑素瘤凋亡的效能有待提高。
- 陈嵘祎阿彩岭李南潘紫凤蔡川川罗世英
- 关键词：病毒载体IGFBP7恶性黑素瘤
- RNAa效应研究及应用进展
- 2013年
- RNAa(RNA activation)是指某些最新发现的反标准非编码RNA(ncRNA)在转录水平上激活目的基因表达的现象,这种发挥激活作用的小分子RNA又叫小激活RNA(saRNA),属小分子双链非编码RNA家族,其作用机制尚未完全明了,但其应用前景已引起人们的关注。该文就RNAa的效应及其应用进展进行了综述。
- 阿彩岭陈嵘祎
- 关键词：RNAI肿瘤
- 雌激素化小鼠念珠菌性阴道炎模型中COX-2,TSLP的表达及其意义被引量：4
- 2012年
- 目的探讨环氧化酶2(cyclooxy genase,COX-2)、胸腺间质淋巴细胞生成素(thymic stromal lymphopoietin,TSLP)在雌激素化小鼠念珠菌性阴道炎模型中的表达及其在致病中的作用。方法将60只小鼠随机分为雌激素化白念珠菌感染组(EI组)、雌激素化非感染组(E组)及正常对照组(C组),EI组采用皮下注射雌激素及阴道内接种白念珠菌造模,E组仅皮下注射雌激素。念珠菌接种后第2,4,7,14天,3组小鼠阴道冲洗液中真菌量的动态变化采用集落形成单位(CFU)计数。各组小鼠阴道组织中的念珠菌感染情况,COX-2和TSLP的表达分别采用PAS染色、免疫荧光激光共聚焦检测,并进行统计学分析。结果 EI组CFU自接种后第2天升高、第4天达到高峰、之后下降。EI组CFU平均值(3.47±1.82)×103/mL高于E,C组(E,C组无念珠菌生长,P<0.01);第7天,EI组COX-2绿色荧光程度较强(0.252±0.020),明显高于E组(0.155±0.005)和C组(0.098±0.006),经比较差异具有统计学意义(P<0.001);第7天,EI组TSLP红色荧光最强(0.391±0.011)明显高于E组(0.243±0.020)和C组(0.155±0.006),经比较差异有统计学意义(P<0.001)。结论在雌激素化小鼠念珠菌感染模型中,黏膜中COX-2,TSLP表达的上调可能在念珠菌致病中起重要作用。
- 陈嵘祎张金娥阿彩岭杨艳平吴志华
- 关键词：COX-2TSLP念珠菌性阴道炎
- 两种方法分离小鼠脾原始T淋巴细胞效果比较被引量：9
- 2013年
- 目的比较Ficoll-Paque梯度离心法与免疫磁珠法分离T淋巴细胞的效果差异,筛选有效的、优异的分选小鼠脾原始T淋巴细胞方法。方法分别采用Ficoll-Paque梯度离心法及Miltenyi Biotec免疫磁珠进行小鼠淋巴细胞分离。血小板计数器统计单核淋巴细胞数,苔盼蓝染色判断细胞存活率,流式细胞术鉴定CD4+CD62+T淋巴细胞纯度,并进行统计学分析。结果免疫磁珠法CD4+CD62+T淋巴细胞纯度较高为(66.27±3.52)%,Ficoll-Paque梯度离心法细胞纯度为(15.27±4.16)%,两者比较差异有统计学意义(P<0.01);但Ficoll-Paque梯度离心法获取淋巴细胞数(1.47±0.35)×108较免疫磁珠法的(0.67±0.26)×108多,两者比较差异有统计学意义(t=8.199,P<0.01),且Ficoll-Paque梯度离心法细胞存活率(93.9±2.6)%较免疫磁珠法的(89.9±2.9)%高,两者比较差异亦有统计学意义(P<0.05)。结论免疫磁珠法适合分离小鼠脾原始T淋巴细胞并用于细胞纯度要求高的免疫学实验,但细胞得率需进一步优化。
- 陈嵘祎阿彩岭周英樊翌明
- 关键词：免疫磁珠梯度离心
- 小鼠Th17细胞分化模型的构建
- 2014年
- 目的构建小鼠Th17细胞体外诱导分化模型。方法提取小鼠脾淋巴细胞,采用免疫磁珠纯化++CD4 CD62L T细胞(原始T细胞),分对照组及Th17组。Th17组采用CD3、CD28、IFN-、IL-4抗体及IL-6、TGF-1、IL-23培养72 h,采用Real-time PCR检测RORt和IL-17F mRNA表达。结果 Th17组T细胞RORt、IL-17F mRNA表达明显高于对照组(P<0.01)。结论构建Th17细胞体外诱导分化模型可用于T细胞分化研究。
- 陈嵘祎周飞周英阿彩岭王丹纯
- 关键词：T细胞分化TH17细胞
- 体外分化Th17细胞IL-17f,ctBP和Gfi1的表达被引量：2
- 2014年
- 目的检测小鼠Th17细胞诱导分化模型中IL-17f,ctBP和Gfi1的表达情况并探讨其临床意义。方法提取小鼠脾淋巴细胞,采用免疫磁珠纯化CD4+CD62L+T细胞后,空白对照组用RPMI 1640培养,Th17分化组用anti-CD3ε,anti-CD28,anti-IFN-γ,anti-IL-4抗体及IL-6,TGF-β1和IL-23等细胞因子培育,诱导原始T细胞向Th17细胞分化。两组细胞分别培养72 h后,采用Realtime-PCR检测IL-17f,ctBP,Gfi1 mRNA的表达情况。结果 Th17分化组细胞经相关抗体及细胞因子刺激诱导分化后,其IL-17f mRNA表达明显增高(分化前为1,分化后达194.011721),但ctBPmRNA,Gfi1 mRNA表达均明显低于空白对照组,以上差异均有统计学意义(P均<0.01),对照组ctBPmRNA分化前为1,Th17分化后为0.45375958,Gfi1 mRNA表达在对照组分化前为1,Th17分化后为0.00430432。结论 ctBP和Gfi1在Th17分化组中表达显著下调,但上述两种转录辅抑制因子是否参与了Th17细胞的分化调控值得进一步研究。
- 陈嵘祎周飞周英阿彩岭
- 关键词：IL-17CTBP小鼠
