陈晓穗
- 作品数：50 被引量：172H指数：7
- 供职机构：中国人民解放军海军总医院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金北京市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学化学工程更多>>
- 从半合成抗体库克隆抗TNF-α人单链抗体被引量：14
- 1999年
- 通过噬菌体抗体库技术，不经免疫克隆抗ＴＮＦ－α人单链抗体，用固相化的人重组ＴＮＦ－α抗原对半合成噬菌体抗体库进行了４轮“吸附－洗脱－扩增”的筛选，可见到明显富集，从第３轮和第４轮洗脱下来的克隆中获得两株可特异结合ＴＮＦ－α的克隆，其可变区分别属于ＶＨ１、ＶＨ３和Ｖλ１亚群。
- 王琰刘群英化冰陈宇萍朱迎春陈晓穗
- 关键词：噬菌体抗体库TNFΑ
- 联合应用错配PCR和交替延伸PCR法提高抗TNFα抗体亲和力
- 2004年
- 目的 :通过突变方法提高抗TNFα单链抗体pscTNF的亲和力。方法 :以pscTNF质粒为模板 ,应用错配PCR构建突变抗体库 ,筛选亲和力得到改善的变种 ,再以所获变种为模板 ,用交替延伸PCR技术 ,再次构建突变库 ,筛选活性得到改良的克隆。以斑点ELISA方法及硫氰酸盐洗脱ELISA法评估其亲和力的改善。结果 :从错配PCR抗体库中筛选得到 7个活性有所增强的变种 ,再通过交替延伸PCR使这 7个变种的突变位点交换重组 ,获得了亲和力进一步提高的克隆。结论 :联合应用错配PCR和交替延伸PCR法可提高单链抗体亲和力。
- 汪保安陈晓穗乔媛媛曲佳王欲晓王琰
- 关键词：抗体亲和力
- 用人外周血线粒体DNA 4977bp缺失检测辐射损伤初探被引量：6
- 2004年
- 初步探索用聚合酶链反应(PCR)方法进行辐射诱导的线粒体DNA4977bp缺失分析的可行性。对正常人外周血进行2GyCoγ射线的照射,照射后提取包含线粒体DNA的全基因组DNA,用PCR方法进行线粒60体DNA4977bp缺失分析,同时扩增很少缺失的线粒体DNA片段(16S?ND1);进而比较照射前后线粒体DNA4977bp缺失水平。结果表明,用于分析线粒体DNA4977bp缺失的引物对在最佳试验条件下,可特异性扩增出所有2Gy照射诱导的线粒体DNA4977bp缺失;该扩增产物经纯化、测序和核苷酸同源性分析,证实线粒体缺失发生在线粒体DNA序列的8470?13446bp。用于扩增16S?ND1的引物对在很大的温度变动范围内,均能扩出目的DNA片段。所有外周血样品在照射前无线粒体DNA4977bp缺失,2Gy60Coγ射线照射后特异诱导出此缺失。说明用本研究中建立的PCR方法,可用来分析电离辐射诱导的外周血有核细胞线粒体DNA4977bp缺失水平。
- 封江彬陆雪陈德清陈晓穗刘青杰
- 关键词：PCR扩增
- 人源化和人源抗体制备的研究
- 王琰陈晓穗周丽君王刚王卓智李竞乔媛媛刘晓琳王欲晓张海荣白银朱迎春
- 该研究旨在建立人源或人源化抗体的制备技术。克隆了多种鼠单抗的可变区基因，并在大肠杆菌获得功能性表达；构建了以上相应的多种人-鼠嵌合抗体并在真核细胞成功表达；建立了抗原表位定向选择法对鼠单抗进行人源化的技术，并进一步建立了...
- 关键词：
- 关键词：人源化人源抗体单克隆基因文库
- 重组人IL-8基因的诱导表达及表达产物生物学活性的初步鉴定
- 1998年
- 本文特通过序列分析证实的IL-8基因亚克隆到表达载体p^(BV220)中,构建成了重组表达质粒;通过温度诱导表达,SDS-PAGE电泳后获得的新生蛋白带与预计表达的IL-8分子相吻合,表达产物主要聚集在胞屑间隙中,白细胞趋化实验初步测定了表达产物的生物学活性.
- 何菱陈晓穗王欲晓骆训懿谢帮铁刘晓琳李战青卢妙茹朱迎春
- 关键词：IL-8基因克隆
- 重组人铜锌超氧化物歧化酶对电离辐射损伤小鼠免疫细胞的影响(论著)
- 1997年
- 目的：探讨电离辐射对免疫细胞的影响及重组人铜锌超氧化物歧化酶（ｒｈＣｕＺｎＳＯＤ）的抗辐射作用。方法：观察６０Ｃｏγ射线５～７Ｇｙ照射前后不同时段给予ｒｈＣｕＺｎＳＯＤ对小鼠免疫细胞的影响。结果：电离辐射对小鼠免疫细胞有明显的损伤作用。与照射对照组比较，ｒｈＣｕＺｎＳＯＤ可减轻电离辐射对小鼠免疫细胞的影响，其作用包括增强脾Ｔ淋巴细胞对刀豆蛋白Ａ诱导的增殖反应，提高脾自然杀伤细胞的活性，升高全脾淋巴细胞及外周血白细胞和淋巴细胞的数量。辐射前后给药组的效果优于辐射前或辐射后给药组。结论：ｒｈＣｕＺｎＳＯＤ对防止免疫细胞的辐射损伤有一定作用。
- 陈晓穗骆训懿周丽君谢邦铁王欲晓
- 关键词：铜锌超氧化物歧化酶免疫细胞
- 抗TNF-α人-鼠嵌合抗体的构建及表达被引量：2
- 2000年
- 目的 :构建和表达抗TNF α人 鼠嵌合抗体。方法 :将抗TNF α鼠单抗Z8的轻、重链可变区基因插入到含有人κ链和IgG1重链恒定区基因的真核细胞表达载体中 ,分别构建轻、重链分开表达和共同表达的人 鼠嵌合抗体真核表达载体 ,转染真核细胞 ,通过ELISA、RT PCR、免疫印迹检测TNF α的活性。用L92 9细胞检测嵌合抗体体外中和TNF α的活性。结果 :ELISA鉴定结果表明该嵌合抗体与TNF α特异性结合 ;PT PCR结果显示转染后细胞系有人 鼠嵌合抗体mRNA的转录 ;免疫印迹结果证实有人IgG蛋白的表达 ;体外中和实验证明此嵌合抗体能中和TNF α对L92 9细胞的毒性。结论
- 周丽君陈晓穗王欲晓朱迎春张海荣谢帮铁王琰
- 关键词：TNF-Α人-鼠嵌合抗体基因表达
- 长效重组人超氧化物歧化酶的研制及其辐射防护作用
- 1994年
- 选用无毒、无免疫原性的高分子化合物聚乙二醇(PEG)为修饰剂,以活性酯法制备出PEG- 重组人超氧化物歧化酶(PEG-rh SOD)共价结合物.修饰酶的生物半衰期为15h,比修饰前延长了90倍,对酸、碱、热的耐受力明显高于修饰前.用照射小鼠的活存率评价了PEG-rhSOD的辐射防护作用.小鼠受8.5Gy γ射线照射前1h腹腔注射30万U/kg PEG-rh SOD,可提高活存率42%,与未修饰的rhSOD相比,活存率提高14%.实验仍在进行中.
- 骆训懿王晶翼周丽君陈宇萍陈晓穗朱迎春刘晓琳谢邦铁李战青
- 关键词：超氧物歧化酶
- 抗人重组铜-锌超氧化物歧化酶单克隆抗体的制备及其在纯化抗原中的应用
- 1994年
- 利用重组质粒pCZS转化大肠杆菌,制备出人重组铜-锌超氧化物歧化酶(rhCu-Zn SOD),进一步建立了3株鼠抗rhCu-Zn SOD的单克隆抗体(McAb)杂交瘤细胞株.经鉴定,它们分泌的McAb分别属于IgG_1和IgG_2a亚类,能特异性地识别人Cu-Zn SOD,与pCZS空载菌蛋白无交叉反应.将此McAb制备了免疫亲和层析柱,从大肠杆菌的粗提液中纯化出rhCu-Zn SOD,十二烷基磺酸钠—聚丙烯酰胶凝胺电泳(SDS-PAGE)显示单一条带,纯度>98%,回收率50%,酶比活达10 971.3 U/mg蛋白,rhCu-Zn SOD McAb的制备为Cu-Zn SOD产品的纯化、分析及作用机理研究等提供了有力的工具.
- 陈晓穗王晶翼骆训一谢邦铁刘晓琳赵丽朱迎春周丽君陈宇萍李战青
- 关键词：单克隆抗体超氧物歧化酶铜锌
- 非胰岛素依赖型糖尿病患者血清内洋地黄素浓度的变化被引量：1
- 1998年
- 探讨血清内洋地黄素浓度与糖尿病之间的关系。结果表明,非胰岛素依赖型糖尿病(NIDDM)患者内洋地黄素水平为(0.49±0.16)μg/L,明显高于正常人(0.22±0.11)μg/L(P<0.01).提示内洋地黄素可能参与糖尿病患者并发心血管疾病的发病机制。并发心血管病的NID-DM患者内洋地黄素浓度为(0.52±0.18)μg/L,亦明显高于无并发症的患者(0.43±0.10)μg/L(P<0.05),进一步提示糖尿病患者容易并发心血管疾病的机制之一可能是内洋地黄素的释放增多。结果还显示,内洋地黄素水平与病程无关。内洋地黄素是通过其缩血管效应和刺激平滑肌增生作用促进糖尿病并发的心血管疾患的发生、发展。
- 陈晓穗凌云谢邦铁张海荣周丽君
- 关键词：糖尿病并发症内洋地黄素NIDDM
