颜桂军
- 作品数：79 被引量：103H指数：6
- 供职机构：南京大学医学院附属鼓楼医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划江苏省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学电子电信更多>>
- miR-181a促进人子宫内膜间质细胞蜕膜化催乳素的表达被引量：10
- 2012年
- 目的目前虽已发现一些在胚胎着床过程中起重要作用的分子,但微小RNA(microRNA,miRNA)在蜕膜化过程中作用的研究报道较少,文中调查孕鼠围着床期子宫组织中miR-181a的表达规律,并探讨miR-181a对人子宫内膜间质细胞(human endometrial stromal cell,hESC)体外诱导蜕膜化过程中蜕膜化标志基因蜕膜化催乳素(decidual prolactin,dPRL)表达的调控作用。方法收集怀孕0～6.5 d孕鼠子宫组织,采用TRIZOL法提取总RNA,通过实时定量PCR检测子宫组织中miR-181a的表达。制备Ad-miR-181a重组腺病毒,并感染hESC,24 h后采用0.5 mmol/L 8-Br-cAMP和1μmol/L Medroxyproges-terone(MPA)联合进行体外蜕膜化诱导培养;通过化学发光免疫法和实时定量PCR分别检测细胞培养液上清中dPRL的浓度与间质细胞中催乳素(prolactin,PRL)mRNA的表达;同时采用荧光素酶报告基因检测miR-181a对hESC中dPRL(-332/+65)启动子的调控作用。结果早孕小鼠子宫组织中miR-181a的表达高于非妊娠小鼠子宫,且随着妊娠天数的增加呈逐渐上升的趋势,在小鼠着床"窗口期"即孕4.5 d达到高峰(2.60±0.15倍,P<0.01,n=5),孕5.5 d子宫miR-181a的表达开始平稳下降;成功获得滴度为5.19×1010ifu/ml的miR-181a腺病毒,该腺病毒介导的miR-181a过表达显著增加hESC蜕膜化标志基因dPRL mRNA表达水平,增高超过8倍(P<0.01);在8-Br-cAMP和MPA联合诱导hESC体外蜕膜化时,高表达miR-181a可明显增加8-Br-cAMP联合MPA诱导的PRL mRNA表达水平与PRL蛋白分泌(P<0.01)。荧光素酶报告基因进一步证实miR-181a可以激活dPRL(-332/+65)启动子的活性达到2倍(P<0.05)。结论 miR-181a参与8-Br-cAMP和MPA诱导子宫内膜间质细胞蜕膜化过程中PRL的表达调控。
- 张群刘红玉蒋玥王玢颜桂军孙海翔胡娅莉
- 关键词：催乳素蜕膜化
- CD146/PI3K/AKT pathway Regulates Human Umbilical Cord Perivascular Cells induced Angiogenesis by Targeting JAGGED1
- Human mesenchymal stem cells derived from umbilical cord(UC)are a favorablesource for allogeneic cell therapy....
- 徐璐杨嫣君盛小强刁振宇颜桂军孙海翔
- 关键词：ANGIOGENESISCD146
- 一种Nur77磷酸化衍生肽及其在制备促进胚胎植入的药物中的应用
- 本发明公开了一种Nur77磷酸化衍生肽及其在制备促进胚胎植入的药物中的应用，本发明公开的磷酸化衍生肽序列如SEQ ID NO.1所示，通过小鼠体外胚胎黏附试验和延迟植入小鼠模型中的体内上皮‑胚胎粘附试验，以及分子细胞水平...
- 颜桂军孙海翔姜瑞伟王海滨
- 基于小鼠谱系追踪的围着床期子宫内膜上皮-间质转化探究
- 2024年
- 目的利用Ltf cre Rosa26^(mT/mG)小鼠模型,进行围着床期子宫内膜上皮-间质转化(EMT)的谱系追踪研究,寻找子宫内膜EMT的直接形态学证据。方法收集8周龄雌性Ltf cre Rosa26^(mT/mG)小鼠子宫组织进行冰冻切片,分别与上皮细胞、间质细胞、免疫细胞的标志物E-cadherin、Vimentin、CD45共染后,激光共聚焦荧光显微镜(confocal)观察成像。围着床期研究:8周龄的Ltf cre Rosa26^(mT/mG)雌鼠与可育雄鼠按1:1合笼,以见栓当日上午为0.5 dpc,收集2.5 dpc、3.5 dpc、4.0 dpc、4.5 dpc的小鼠子宫进行冰冻切片,分析胚胎种植对子宫内膜EMT的影响。雌孕激素序贯刺激模型:8周龄的雌性Ltf cre Rosa26^(mT/mG)小鼠进行卵巢切除术,2周后进行雌激素(E_(2))、孕激素(P 4)序贯刺激,在不同处理后收集小鼠子宫组织,分析雌孕激素对子宫内膜EMT的影响。结果Ltf cre Rosa26^(mT/mG)小鼠子宫内膜间质中零星分布着增强绿色荧光蛋白阳性(EGFP+)细胞,与E-cadherin、Vimentin、CD45共染后,confocal结果显示,部分EGFP+细胞表现为Vimentin+,这部分Vimentin+EGFP+细胞即为由上皮细胞EMT形成的间质细胞。围着床期研究:围着床期中,与2.5 dpc、4.0 dpc相比,3.5 dpc时子宫内膜间质中EGFP+细胞个数显著降低(P<0.01)。雌孕激素序贯刺激模型:与卵巢切除后相比,E_(2)刺激后间质中EGFP+细胞数量显著降低,休息2 d后间质中EGFP+细胞数量显著增加,P 4刺激后间质中EGFP+细胞数量又显著降低(P<0.05)。结论子宫内膜中存在上皮细胞EMT形成的间质细胞,子宫内膜EMT在非胚胎植入时期就已经存在,且受到雌孕激素的严格调控。
- 唐心怡曹志文王晓莹周继东张阳岳秋玲姜瑞伟李朝军颜桂军孙海翔
- 关键词：上皮-间质转化胚胎种植
- CD81参与子痫前期发病的机制——抑制滋养细胞侵袭并促进血管内皮细胞激活被引量：8
- 2017年
- 子痫前期（preeclampsia，PE）是以孕20周后出现高血压和尿蛋白为特征的妊娠并发症。早发型重度PE对母儿危害严重，包括母体多器官功能损害及胎儿生长受限等。目前PE发病的“二阶段”学说认为，第一阶段是早孕期绒毛外滋养细胞侵袭不足，使子宫螺旋小动脉重塑障碍导致“胎盘浅着床”，第二阶段则是浅着床的胎盘向母体循环释放异常分子，导致中晚孕期母体出现血管内皮激活，出现相关临床表现。很多研究致力于寻找连接PE二阶段发病的重要分子，但迄今尚未检索到相关成果报道。
- 沈莉刁振宇孙海翔颜桂军王志群李若天戴毅敏王景美李洁丁海林赵光锋郑明明薛平平刘沫周艳胡娅莉
- 关键词：滋养细胞侵袭子痫前期内皮细胞激活发病CD81多器官功能损害胎儿生长受限
- 基于新一代测序的SNP单体型分析在先天性挛缩性蜘蛛样指症PGD中的应用被引量：1
- 2017年
- 目的探讨基于新一代测序(NGS)的单核苷酸多态性(SNP)单体型分析在先天性挛缩性蜘蛛样指症(CCA)种植前遗传学诊断中的有效性。方法对活检的滋养层细胞采用多重置换扩增(MDA)的方法扩增全基因组,应用基于NGS的SNP单体型分析和直接测序两种方法对MDA产物进行CCA的种植前遗传学诊断(PGD)。结果应用MDA方法对活检的4枚囊胚的滋养层细胞成功地进行了全基因组扩增;通过基于NGS的SNP单体型分析发现,其中两枚是未感染CCA的囊胚,另两枚是感染CCA的囊胚;单体型分析结果与直接测序法结果一致。取卵5个月后患者移植一枚基因型正常的冷冻囊胚,于妊娠的第38周经剖宫产成功分娩一体重为2 850g的健康婴儿。结论基于NGS的SNP单体型分析是单基因病的种植前遗传学诊断的有效筛查工具。
- 陈林君刁振宇徐志鹏周建军颜桂军孙海翔
- 关键词：种植前遗传学诊断多重置换扩增
- P300/CBP相关因子(PCAF)表达水平对人子宫内膜间质细胞增殖的影响被引量：1
- 2013年
- 目的:观察P300/CBP相关因子(P300/CBP associated factor,PCAF)对人子宫内膜间质细胞增殖的调控作用。方法:通过Western blotting、实时定量PCR及Cell Counting Kit-8(CCK-8)细胞增殖实验,观察分析Ad-FLAG-PCAF重组腺病毒介导的PCAF过表达及PCAF-siRNA介导的PCAF低表达对体外培养的人子宫内膜间质细胞增殖的影响。结果:获得滴度为8×1010ifu/ml的重组Ad-FLAG-PCAF腺病毒,转染体外培养的人子宫内膜间质细胞后,可有效介导细胞内FLAG-PCAF融合蛋白的高表达;而转染PCAF特异的siRNA后,可有效抑制人子宫内膜间质细胞中PCAF的表达。PCAF过表达的人子宫内膜间质细胞中,其细胞周期标志蛋白cyclinD1和cyclinD3的表达水平显著降低(P<0.05),而PCAF低表达的人子宫内膜间质细胞中,其cyclinD1和cyclinD3的表达水平显著升高(P<0.05);此外,CCK-8实验结果显示,PCAF过表达能显著抑制由雌、孕激素共同刺激所引起的人子宫内膜间质细胞的增殖,而基因沉默人子宫内膜间质细胞中内源性PCAF的表达后,间质细胞的增殖增加>20%(P<0.05)。结论:PCAF可能通过蛋白乙酰化修饰作用,参与调控人子宫内膜间质细胞的增殖过程。
- 朱丽华刘红玉沈晓月甄鑫王玢颜桂军孙海翔
- 关键词：P300增殖
- EHD1蛋白表达量作为检测标志物在预测IVF-ET妊娠结局中的应用
- 本申请公开一种EHD1蛋白表达量作为检测标志物在制备用于预测IVF‑ET妊娠结局产品中的应用，即在胚胎移植前，利用人宫内膜中EHD1的绝对表达量预测体外受精‑胚胎移植的妊娠结局，该方法简单高效，可以准确评估IVF‑ET患...
- 孙海翔颜桂军周铨张慧
- 文献传递
- 血管内皮特异性过表达microRNA-155对大鼠妊娠过程的影响
- 2017年
- 目的 :建立血管内皮特异过表达microRNA-155(miR-155)转基因大鼠模型并观察其血压、蛋白尿等表型及妊娠负荷施加后的变化。方法:把外源miR-155基因插入血管内皮细胞特异表达VE-cadherin启动子下游,构建转基因表达载体,将所得载体线性化后,通过受精卵显微注射技术,构建miR-155转基因大鼠,并利用特异引物PCR法鉴定转基因大鼠基因型。通过尾套法、生化检测、组织学检查对未孕和妊娠雌性转基因大鼠的表型进行初步分析。结果:血管内皮特异性过表达miR-155转基因大鼠在胸主动脉、腹主动脉、肾脏、心脏组织miR-155表达较野生型鼠增高2.3、3.3、2.9、3.3倍。未妊娠时miR-155转基因雌性大鼠血压、尿蛋白、血管壁和肾脏结构与非转基因型大鼠比较,差异均无统计学意义。但妊娠后miR-155转基因雌性大鼠血压轻度增高、蛋白尿增加、胎儿生长受限发生率增加,胸/腹主动脉的血管壁结构紊乱和肾小管上皮空泡样变等。结论:血管内皮特异性miR-155转基因大鼠妊娠负荷增加后,表现出子痫前期表型。
- 吴梦菲颜桂军沈莉胡娅莉
- 关键词：MIR-155转基因大鼠子痫前期
- 反复种植失败患者子宫内膜FHL1低表达影响胚胎黏附的机制研究
- <正>目的:研究反复种植失败患者(RIF)子宫内膜FHL家族成员FHL1异常低表达调控胚胎黏附的分子机制。方法:通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、Western Blot以及免疫组化的方法分析FHL1在正常可孕妇...
- 闫蔷黄晨阳姜瑞伟张春雪张梅颜桂军孙海翔
- 文献传递
