马全刚
- 作品数：3 被引量：14H指数：2
- 供职机构：扬州大学兽医学院江苏省人兽共患病学重点实验室更多>>
- 发文基金：江苏省“青蓝工程”基金江苏省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 甲型H1N1流感病毒HA基因的原核表达及免疫反应性分析被引量：6
- 2010年
- 目的构建甲型H1N1流感病毒HA基因的原核表达质粒,获得融合表达蛋白,并对表达蛋白的免疫反应性进行分析。方法人工合成A/California/05/2009 H1N1流感病毒的HA基因,以合成基因为模板,通过PCR方法扩增出去除信号肽的HA部分基因片段,然后将去除信号肽的HA基因克隆至pET30a(+)原核表达载体中,构建出原核表达质粒,再将重组质粒转化E.coliBL21(DE3)表达菌株;重组菌经IPTG诱导后,收集菌体进行SDS-PAGE电泳分析,Western blot分析表达产物的免疫反应性。结果获得了HA基因的原核表达重组菌,细菌经IPTG诱导表达后,SDS-PAGE分析可见约67.4 ku大小的目的蛋白表达条带,Western blot结果显示,表达产物与人甲型H1N1流感患者阳性血清具有反应性。结论成功表达出甲型H1N1流感病毒的HA蛋白,该蛋白具有良好的免疫反应性,为甲型H1N1流感的快速诊断方法的建立提供了生物材料。
- 马全刚潘志明游猛黄金林耿士忠李晓波顾健焦新安
- 关键词：甲型H1N1流感病毒血凝素原核表达免疫反应性
- 鼠伤寒沙门菌鞭毛蛋白与新城疫病毒F蛋白的融合表达及免疫原性分析被引量：8
- 2010年
- 应用PCR技术分别扩增鼠伤寒沙门菌鞭毛蛋白fliC基因以及含有新城疫病毒F蛋白部分表位的基因片段,通过柔性肽(Gly4Ser)2编码序列将二者串联并克隆到质粒pET30a+上,获得重组原核表达质粒pET-fliC-F,将其转化入大肠埃希菌BL21(DE3)中表达。Western blot证实重组菌表达的fliC-F融合蛋白能与小鼠抗fliC和抗F蛋白两种多抗血清发生特异性反应。动物试验显示,fliC-F融合蛋白能够刺激C3H/HeJ小鼠产生针对F蛋白的特异性血清抗体,说明原核表达系统表达的fliC-F融合蛋白具有较好的免疫原性。
- 游猛潘志明耿士忠马全刚方强焦新安
- 关键词：鼠伤寒沙门菌鞭毛蛋白新城疫病毒融合蛋白免疫原性
- H1N1甲型流感病毒HA基因与沙门菌fljB基因的融合表达与鉴定
- 本研究将A/California/05/2009 H1N1甲型流感病毒的血凝素HA基因部分片段与鼠伤寒沙门菌Ⅱ型鞭毛蛋白fljB基因融合表达，以期构建新型甲型流感疫苗。本实验成功表达出HA1-2-fljB融合蛋白，证明该...
- 杨芸潘志明马全刚张磊焦新安
- 关键词：沙门菌免疫反应
