魏颖
- 作品数：15 被引量：27H指数：4
- 供职机构：上海市针灸经络研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市教育发展基金上海市教育委员会重点学科基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学哲学宗教化学工程更多>>
- 针灸临床研究现状与基本策略被引量：1
- 2012年
- 根据针灸临床研究的现状,探讨其基本策略。认为目前一些针灸临床研究存在片面套用西医临床研究方法的部分概念,简单化对待针灸临床研究的现象。在今后的针灸临床研究中,应充分考虑针灸临床整体过程的自身特点,回答临床评价的关键问题,重视优效性、等效性、非劣效性设计在针灸临床研究中的科学合理应用,并由此逐步构建符合中医针灸特点的临床研究方法,以提高针灸临床研究的质量。
- 杨永清魏颖王宇尹磊淼徐玉东刘艳艳
- 关键词：针灸
- 大鼠钙结合蛋白S100A9基因克隆、表达及纯化研究被引量：1
- 2010年
- 目的构建大鼠钙结合蛋白S100A9的原核表达质粒并获得纯化重组蛋白。方法根据大鼠S100A9基因mRNA序列,设计PCR引物,常规扩增后重组连入原核表达载体pET32a,并进行序列测定。利用异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)和不同温度诱导表达,聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定结果,并亲和层析纯化重组蛋白。结果 PCR扩增获得的条带与预期的DNA表达片段大小一致,克隆构建了pET-32a-S100A9原核表达载体,测序结果与预期完全一致,经亲和层析纯化获得毫克级纯化重组蛋白,并发现该蛋白在21℃有比较强的表达。结论为进一步探讨S100A9蛋白生物学功能奠定基础。
- 尹磊淼宋凯张庆华魏颖王宇徐玉东杨永清
- 关键词：钙结合蛋白质类基因表达自身免疫性疾病
- 大鼠淋巴细胞培养上清液总IgG含量ELISA检测方法的建立被引量：1
- 2012年
- 目的:建立一种定量测定大鼠淋巴细胞培养上清液中总IgG(免疫球蛋白G)含量的双抗体夹心ELISA(酶联免疫吸附试验)检测方法。方法:用方阵实验确定包被抗体、检测抗体的最佳工作浓度;绘制标准曲线,确定线性范围;评价标准曲线的可重复性、精密度和可应用性。结果:包被抗体和检测抗体的最佳效价分别为2μg/ml和1:4000稀释;检测的线性范围为0.25-16ng/ml。经方法学评价,可重复性和精密度较高,应用性较强。结论:该方法灵敏度高,重复性好,可作为科研过程中检测大鼠淋巴细胞培养上清液总IgG含量的一种精确、方便、可靠的方法。
- 单纯筱王宇尹磊淼徐玉东魏颖冉君刘晓燕刘奇杨永清
- 关键词：IGG双抗体夹心ELISA
- 蛋白质磷酸化检测方法及原理被引量：2
- 2013年
- 蛋白质是生命活动的物质基础，是机体细胞的重要组成部分。新生蛋白质多肽需要经过翻译后修饰才能转变为成熟蛋白质。翻译后修饰包括：甲基化、羟基化、羧基化、糖基化、脂酰化、异戊烯基化等共价修饰。蛋白质磷酸化是最重要的蛋白质翻译后修饰之一，在蛋白激酶催化作用下，
- 刘奇尹磊淼魏颖王宇徐玉东冉君杨永清
- 关键词：蛋白质磷酸化翻译后修饰生命活动机体细胞共价修饰
- Tricine电泳优化方法在针灸效应小分子蛋白检测中的应用被引量：2
- 2012年
- 目的改进一种适合分离、鉴定针灸效应小分子蛋白的Tricine-SDS-PAGE电泳体系。方法研究调整分离胶中聚丙烯酰胺浓度和凝胶交联度并加入适量甘油,从而优化Tricine电泳系统。结果与常规Glycine-SDS-PAGE电泳系统比较,分离胶聚丙烯酰胺浓度为l6.8%、交联度为5.8%、含10.4%甘油的Tricine-SDS-PAGE电泳明显减少10 kD分子量蛋白的弥散,成功分离了分子量为11.0 kD的S100A8和11.8 kD的S100A11等两个针刺抗哮喘小分子蛋白。结论优化的Tricine-SDS-PAGE电泳系统可有效分离针灸效应小分子蛋白。
- 尹磊淼魏颖王宇冉君刘晓燕徐玉东杨永清
- 关键词：针灸效应
- 三种脂质体法转染试剂转染原代大鼠气道平滑肌细胞效果的比较
- 2013年
- 气道平滑肌细胞（airway smooth muscle cells，ASMCs）是呼吸道的重要组成部分之一，受气道内各类免疫细胞所释放的细胞因子和炎性介质的调节产生相应的收缩，其自身也能够分泌细胞因子、趋化因子、生长因子、黏附分子和基质金属蛋白酶等，参与气道炎症、气道高反应性与气道重塑的发生发展，是研究哮喘、COPD等气道呼吸性疾病细胞分子机制的重要载体。国内外研究中使用的ASMCs大多从活组织（比如动物气管、支气管和活检样品等）中分离并原代培养获得，这比细胞系更能准确地模拟来源组织在体内环境的特异性特征。
- 徐玉东王宇魏颖尹磊淼杨永清
- 关键词：气道平滑肌细胞原代大鼠脂质体法分泌细胞因子气道高反应性细胞分子机制
- 蛋白免疫印迹法检测小分子蛋白的实验条件优化研究被引量：6
- 2015年
- 目的:蛋白免疫印迹法自发明以来被广泛应用于现代生物学研究中的蛋白质定性和半定量分析。为了提高蛋白免疫印迹法的检测效率,需针对不同蛋白的特性调节相关的实验条件参数。本文旨在探讨免疫印迹法不同参数对小分子蛋白检测效果的影响,从而优化并获得最佳实验条件。方法:比较不同转膜电压和时间、转移缓冲液甲醇含量、不同化学发光剂对小分子蛋白的检测效果。结果:选择20 V、10 min转膜电压和时间所获得的信号显著高于10 V、25 min转膜条件,选择含20%甲醇转移缓冲液所获得的信号显著高于无甲醇转移缓冲液,选择飞克级化学发光剂所获得的信号显著高于纳克级化学发光剂。结论:选用高电压、短时间组合,选择含20%甲醇转移缓冲液和飞克级化学发光剂信号均有助于小分子蛋白免疫印迹检测。
- 王文倩魏颖王宇徐玉东杨永清尹磊淼
- 关键词：免疫印迹法WESTEMBLOT甲醇
- 钙结合蛋白S100A11生物学功能及其相关疾病研究进展被引量：4
- 2012年
- S100家族是一个分子量在9～14kD之间、以独特的螺旋-环-螺旋（helix．100p．helix）EF手型基序为特征的、可以形成二聚体和多聚体的多基因调控酸性钙结合蛋白家族，主要存在于脊椎动物中，在细胞内外发挥其独特的生物学功能。S100家族到目前为止至少包含21个成员，其中16个S100蛋白的编码基因位于人1号染色体q21区域。S100家族是多功能信号蛋白家族，转导钙依赖性细胞调节信号，参与调控多种生物学过程。
- 刘晓燕尹磊淼王宇徐玉东魏颖冉君单纯筱杨永清
- 关键词：S100A11生物学功能相关疾病S100蛋白1号染色体生物学过程
- 针刺抗哮喘效应蛋白CC10克隆表达纯化及抗哮喘活性功能验证研究
- 魏颖
- Cyclophilin A与免疫相关疾病关系的研究进展被引量：1
- 2012年
- 亲环蛋白A(Cyclophilin A,CypA)是免疫抑制剂环孢菌素A(Cyclosporine A,CsA)的体内受体。它是目前所知的人类亲环素(Cyps)家族成员中占细胞溶质的量最大的蛋白,且是Cyps家族中最重要的一员,在生物体中广泛表达,发挥重要的生物学作用。首先,CypA本身被认为具有蛋白质的折叠、转运、修复、细胞信号转导和免疫调节等作用;其次,CypA与CD147之间的趋化因子样作用与多种疾病关系密切。研究发现其在多种疾病发生发展过程中表达变化,如炎症、肿瘤、艾滋病和丙型肝炎等免疫相关疾病。CypA有可能成为人类某些免疫相关疾病早期诊断、预防和治疗的重要分子靶标。因此,CypA以成为医学研究中的热点,人们希望通过对其深入的了解为这些疾病的治疗提供新的思路、策略和方法。
- 单纯筱尹磊淼王宇徐玉东刘晓燕魏颖冉君刘奇杨永清
- 关键词：CYCLOPHILIN免疫相关疾病
