鲁旭 作品数:20 被引量:28 H指数:3 供职机构: 中国食品药品检定研究院 更多>> 发文基金: 中央级公益性科研院所基本科研业务费专项 中国食品药品检定研究院中青年发展研究基金 国家科技重大专项 更多>> 相关领域: 医药卫生 理学 农业科学 更多>>
原型株及变异株SARS-CoV-2灭活疫苗在大鼠体内的免疫原性评价 2024年 目的评价原型株、Beta株、Gamma株和Delta株SARS-CoV-2灭活疫苗在大鼠体内的免疫原性。方法分别将原型株、Beta株、Gamma株和Delta株SARS-CoV-2灭活疫苗经大腿肌内免疫5只雌性Wistar大鼠2次,间隔14 d,免疫剂量均为3μg病毒蛋白/(0.5 mL·只),初次免疫后14、28和42 d,经静脉采集血,分离血清。间接ELISA法检测血清IgG抗体水平;微量中和试验检测血清中和抗体效价;计算血清中和抗体效价的抗原比,以评价2株病毒间的抗原性差异。结果初次免疫后14 d,全部免疫血清中均可检测到针对4株病毒的IgG抗体,28 d的IgG抗体水平较14 d提高10倍以上,42 d时效价略有下降。首次免疫后14 d,免疫原型株或Delta株疫苗的大鼠血清中,针对4株病毒的中和抗体全部阳转;免疫Beta株和Gamma株疫苗的大鼠血清中,针对Beta株和Gamma株病毒的中和抗体全部阳转,针对原型株或Delta株病毒的中和抗体部分阳转。初次免疫后28 d,4种病毒免疫血清中和抗体均阳转,中和抗体效价较14 d大幅升高;初次免疫42 d时中和抗体效价较28 d总体略有下降。Beta株与Gamma株间、原型株与Gamma株间抗原性差异较小,原型株与Beta株间抗原性差异较大。结论原型株、Beta株、Gamma株和Delta株SARSCoV-2灭活疫苗均能刺激大鼠产生较高效价的中和抗体,但免疫原性有差异。 徐康维 许丽 鲁旭 李晶 戈小琴 王开芹 权娅茹 李长贵关键词:灭活疫苗 IGG抗体 中和抗体 重组金黄色葡萄球菌疫苗特异性人血清IgG抗体Luminex系统多重检测方法的建立及验证 被引量:3 2020年 目的建立重组金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,SA)疫苗特异性人血清IgG抗体的Luminex系统多重检测方法,并进行验证。方法以重组SA疫苗所含的5种抗原(mHla、IsdB-N2、SpA5、mSEB、MntC)作为磁珠偶联蛋白,分别与相应磁珠偶联,加入参考血清(第3次免疫重组SA疫苗后21 d的志愿者血清,筛选出抗5种抗原特异性高效价血清8份,混合),37℃孵育;加入山羊F(ab′)2抗人IgG-Fc(PE),37℃孵育;用Luminex系统进行多重检测,并对偶联抗原浓度、孵育时间、二抗稀释度进行优化。同时分析5种抗原间的干扰情况,并验证方法学的特异性、准确性及精密性。结果mHla、IsdB-N2、SpA5、mSEB、MntC最适偶联浓度分别为30、150、7.5、2.5、7.5μg/2.5 mil,最适一抗及二抗孵育时间均为30 min,最适二抗稀释度为1∶5000。5种抗原间不存在明显的交叉表位,与特异的抗体反应过程无明显相互干扰。游离的重组蛋白对偶联抗原与抗体间反应的抑制率随着浓度的增加而增加,3种浓度的参考血清的回收率介于87.0%~120.8%之间,批内和批间CV值均<10%。结论成功建立并优化了重组SA疫苗特异性抗体的Luminex系统多重检测方法,且该方法具有良好的特异性、准确性及稳定性。 陈质斌 王斌 顾江 梁昊宇 鲁旭 曾明关键词:金黄色葡萄球菌 重组疫苗 血清抗体 黄花蒿花粉变应原致敏小鼠鼻炎模型建立及免疫学研究 被引量:3 2021年 目的优化黄花蒿花粉变应原致敏BALB/c小鼠鼻炎模型,探索可用于过敏反应评价的体液免疫和细胞免疫指标。方法以BALB/c小鼠为实验动物,以黄花蒿花粉变应原提取物为致敏蛋白,通过不同含量的主要变应原(Art a1)和不同致敏次数,设置不同免疫程序,皮下免疫小鼠,末次免疫后1周和5周分别用含50μg/ml和500μg/ml Art a1的黄花蒿花粉变应原提取物滴鼻激发,每天1次,每次持续1周。观察小鼠的过敏反应,检测鼻部组织病理变化,测定各组小鼠血清中抗原特异性IgE、IgG1、IgG2a等抗体水平及动态变化,检测小鼠脾脏中抗原特异性IL-4、IL-5、IL-2、IFN-γ等淋巴细胞数量变化。结果致敏小鼠经抗原激发后出现明显的抓挠和喷嚏反应;鼻部组织出现明显的变应性炎症;血清中黄花蒿花粉特异性IgE抗体水平的增高与激发抗原呈明显的相关性;致敏小鼠脾脏中抗原特异性IL-4淋巴细胞数量明显增多,而IFN-γ特异性淋巴细胞数量未见显著变化。结论成功建立黄花蒿花粉变应原过敏小鼠模型,通过ELISPOT技术检测到黄花蒿过敏小鼠抗原特异性IL-4淋巴细胞数量的升高,为后续脱敏治疗用制剂的疗效评价提供实验资料。 於洋 张影 鲁旭 周晨昱 杨蕾 曾明 张慧云 徐苗 何韶衡关键词:黄花蒿 过敏性鼻炎 屋尘螨致敏小鼠鼻炎模型建立及其免疫学评价 被引量:2 2021年 目的基于屋尘螨变应原组主要变应原(Der.p1)的剂量建立稳定的屋尘螨过敏小鼠模型,并以此系统筛选过敏评价生物标识。方法以屋尘螨变应原提取物为致敏蛋白,以氢氧化铝为佐剂,依据主要变应原(Der.p1)含量设置不同抗原浓度组和不同免疫针次,皮下注射免疫BALB/c小鼠,末次免疫一周后,采用Der.p1浓度为500μg/mL的屋尘螨变应原提取物滴鼻激发,每只小鼠20μL,每天1次,持续1周。通过观察小鼠的过敏反应症状、检测鼻部组织病理变化、测定各组小鼠体液免疫和细胞免疫指标的变化,筛选最佳的过敏模型建立程序。在此基础上更换不同来源屋尘螨抗原重新致敏BALB/c小鼠,验证过敏小鼠模型建立方法的可重复性。结果致敏小鼠经抗原激发后均出现明显的过敏反应,其中最佳免疫程序为Der.p1浓度100μg/mL、皮下注射两次。该致敏组小鼠经抗原激发后体内IL-4特异性淋巴细胞数(174±23)明显增多,与阴性对照组(22±0.5)比较差异具有统计学意义(P=0.011);脾淋巴细胞Th2型极化显著(Th1/Th2比值为0.362±0.028),与阴性对照组(0.832±0.07)比较差异具有统计学意义(P=0.034);血清屋尘螨特异性IgE抗体水平与激发前比较明显增高(P=0.00017),总IgE抗体水平与阴性对照组比较明显增高(P=0.041)。利用不同来源的屋尘螨抗原,选择优化的致敏程序建立过敏小鼠模型,表现出较好的可重现性。结论成功构建屋尘螨变应原特异性致敏小鼠模型,并以此筛选到致敏相关的生物标识,证实Der.p1剂量与致敏效果间的量效关系,为后续屋尘螨过敏症机制研究及屋尘螨变应原脱敏制剂研制提供实验基础。 张影 徐颖华 江霞云 鲁旭 鲁旭 杨蕾 王斌 王斌 赵爱华关键词:屋尘螨 免疫反应 微生态活菌制品质量控制 2022年 本文介绍了2020年版《中国药典》第三部中微生态活菌制品总论的内容和增修订情况,简要分析微生态活菌制品质量控制的要点和存在的缺陷,并对检验方法的发展提出了一些建议,便于从业人员更好的理解和执行《中国药典》2020年版。 鲁旭 田万红 马霄关键词:中国药典 SFTSV核酸检测试剂盒国家参考品的研制和乙型脑炎病毒E蛋白的研究 第一部分发热伴血小板减少综合征布尼亚病毒核酸检测试剂盒国家参考品的研制 【目的】发热伴血小板减少综合征布尼亚病毒(SFTSV)是首次在中国出现并由国内专家分离到的一种新病毒,病死率高达10%。目前针对该病毒尚无有效的疫... 鲁旭关键词:乙型脑炎 E蛋白 两种螨变应原注射液氯化钠含量检测方法的比较 被引量:1 2018年 目的验证电位滴定法用于螨变应原注射液氯化钠含量测定的可行性。方法利用电位滴定法和硫氰酸铵滴定法检测螨变应原注射液中氯化钠含量,确定两种方法的线性范围,并进行精密性、准确性验证。应用两种方法测定13批螨变应原注射液中氯化钠含量。结果电位滴定法测定螨变应原注射液氯化钠含量的线性检测范围(0.10~1.50 m L)较硫氰酸铵滴定法(0.50~1.50 m L)广;精密性验证结果表明,电位滴定法检测氯化钠含量的RSD不高于1.87%,硫氰酸铵滴定法不高于1.97%;准确性验证结果表明,硫氰酸铵滴定法检测氯化钠含量的加标回收率为95.20%~112.66%,电位滴定法为92.88%~99.44%。两种方法检测13批(共27个亚批)螨变应原注射液氯化钠含量,结果基本一致,差异无统计学意义(P>0.05),且全部符合该制品注册检验标准。结论电位滴定法可作为硫氰酸铵滴定法的补充方法,用于螨变应原注射液氯化钠含量的测定。 张影 李喆 鲁旭 幺山山 曾明 辛晓芳 王斌关键词:氯化钠 电位滴定法 益生性肠球菌安全性评价研究进展与监管 被引量:3 2019年 肠球菌目前作为益生菌的研究热点,被应用于多种微生态制剂,在胃肠道疾病等多种疾病的治疗和预防过程中发挥着重要作用。但肠球菌在某些条件下可能成为致病菌,在临床报告的数据中,有一部分院内感染就是由肠球菌引起。鉴于肠球菌的益生性和潜在的致病风险,迫切需要对肠球菌的安全性进行评价。目前国内外的研究主要从耐药性和毒力因子方面评价肠球菌的安全性,也有部分研究通过动物试验考察肠球菌的安全性,结果均表明,尚未发现益生性肠球菌的安全问题。 鲁旭 张影 曾明关键词:肠球菌 安全性 毒力因子 耐药性 乙型脑炎减毒活疫苗对中国主要流行基因型毒株的免疫效果 被引量:11 2019年 目的评价乙型脑炎(简称乙脑)减毒活疫苗SA14-14-2免疫人体后对中国流行的两种主要基因型(Ⅰ型和Ⅲ型)的免疫效果。方法收集乙脑减毒活疫苗免疫的健康儿童免疫前及免疫后28 d采集的血清样品,采用蚀斑减少中和试验(plaque reduction neutralization test,PRNT)检测血清中对中国流行的两种基因型乙脑病毒的中和抗体,并计算血清中和抗体阳转率。结果疫苗免疫后对国内流行的基因Ⅰ型和Ⅲ型乙脑病毒均产生了较高水平的中和抗体,血清中和抗体阳转率分别为90. 0%和92. 0%,几何平均滴度(GMT)分别为1︰26. 2和1︰27. 5,差异无统计学意义(P> 0. 05)。结论乙脑减毒活疫苗免疫人体后,对中国流行的2种基因型乙脑病毒均具有较好的免疫效果。 刘欣玉 鲁旭 赵丹华 徐宏山 李玉华关键词:乙型脑炎减毒活疫苗 基因型 免疫效果 螨变应原制品中苯酚含量测定通用方法的验证 被引量:1 2019年 目的筛选一种简便、易行的苯酚含量测定方法,作为螨变应原制品中苯酚含量测定的通用方法。方法建立比色法测定苯酚含量的标准曲线,并确定线性及测定范围;用比色法测定4种螨变应原制品中的苯酚含量,进行精密性和准确性验证;将比色法与企业标准规定方法测定结果进行比较。结果比色法6次检测结果显示,苯酚浓度在0~40μg/mL范围内与吸光度值呈良好的线性关系,R2均≥0. 999 8;比色法测定4种螨变应原制品苯酚含量,日内精密性相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)不超过2. 3%,日间精密性RSD不超过3. 5%;准确性验证回收率为98%~104%。比色法测定3家企业螨变应原制品苯酚含量,结果全部符合质量标准规定,且与各自企业标准中规定方法的测定结果一致,差异无统计学意义(P> 0. 05)。结论利用比色法测定螨变应原制品中苯酚含量,重复性好,准确度高,操作简便,可用作该制品苯酚含量测定的通用方法。 张影 鲁旭 梁昊宇 胡玥 幺山山 曾明 王斌关键词:苯酚 比色法 滴定法 高效液相色谱法