黄文科
- 作品数：6 被引量：8H指数：2
- 供职机构：华南农业大学兽医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 禽流感病毒HA基因在狂犬病毒中的表达被引量：6
- 2008年
- 为了研究狂犬病毒作为载体表达外源基因的特性,将禽流感病毒HA基因插入狂犬病毒全基因组cDNA感染性克隆pHEP-3.0G基因与L基因的假基因位点,再通过反向遗传技术,获得了携带流感病毒HA基因的嵌合狂犬病毒(HepFHA),并进行了病毒传代与HA基因表达的研究.结果显示,重组病毒经BHK-21细胞传代10次,病毒表达稳定,但各代次常规红细胞凝集试验均为阴性;Western-blotting检测到病毒表达产物中存在部分HA蛋白的表达,其相对分子质量为39 540,与HA裂解的HA1蛋白相对分子质量相吻合.
- 艾军金晓芹孙京臣罗琴芳黄文科郭霄峰
- 关键词：狂犬病毒反向遗传技术HA基因
- H5N1和H9N2亚型AIV HA基因的原核表达及荧光抗体的制备
- 根据已知的禽流感病毒(AIV)A／Chicken／Guangdong／25／2000(H5N1)毒株和A／Chicken／Guangxi／KMIII／1999(H9N2)毒株的HA基因序列和表达载体pET-32a(+)、...
- 黄文科
- 关键词：血凝素原核表达荧光抗体
- 文献传递
- H5N1和H9N2亚型禽流感病毒HA基因的原核表达
- 2008年
- 采用自行设计的引物，通过PCR的方法，分别从pMD-HA5和pMD-HA9中成功扩增出AIV0025（H5N1）株和KMⅢ（H9N2）株的血凝素（hemagglutinin，HA）基因，然后分别亚克隆到pET-32a（＋）、pET-28a（＋）表达载体中，构建并筛选出阳性重组子，分别标记为pET32-HA5、pET28-HA9．将阳性重组质粒转化进BL21（DE3）宿主菌中，通过改变IPTG浓度和诱导时间，使重组蛋白获得表达，并确定了最佳诱导条件为IPTG终浓度1．0mmol／L、诱导时间4—5h．经SDS，PAGE和Western，blotting分析表明，重组蛋白相对分子质量约为85000和63000，主要存在于包涵体中，具有良好的免疫学活性．
- 黄文科林宝珍罗琴芳牛学锋郭霄峰
- 关键词：禽流感病毒HA基因原核表达
- H5N1和H9N2亚型AIV HA基因的原核表达
- 采用自行设计的引物,通过PCR的方法,分别从pMD-HA5和pMD-HA9中成功扩增出AIVA/Chicken/Guangdong/25/2000(H5N1)株和A/Chicken/Guangxi/KMⅢ/1999(H9...
- 黄文科林宝珍罗琴芳牛学锋郭霄峰
- 关键词：禽流感病毒血凝素原核表达
- 文献传递
- 猪IFN-α在巴斯德毕赤酵母中的分泌表达被引量：2
- 2010年
- 为了获得高效抗病毒活性的猪α-干扰素蛋白,采用PCR法扩增获得猪α-干扰素基因完整的开放阅读框(ORF),构建重组表达质粒pPICZαC-IFN,电击转化毕赤酵母感受态细胞X33.挑阳性菌落诱导表达,离心取上清,SDS-PAGE和Western-blotting分析,可见1条相对分子质量约19 400的清晰蛋白条带,与理论值相符,表明表达产物为猪α-干扰素.在Vero细胞上检测该干扰素抗VSV的活性为4.04×106IU/L.
- 林宝珍朱艳平黄文科岑路郭霄峰
- 关键词：巴斯德毕赤酵母分泌表达抗病毒活性
- 鸡、马免疫不同H7疫苗的抗体水平及其交叉反应性
- 研发并制备有效、广谱的H7亚型禽流感疫苗，以应对H7N9等人禽共患禽流感，具有重要的公共卫生学意义。通过对比分析，我们选取了两株具有代表性H7亚型A/Netherlands/219/2003 (H7N7)、A/Anhui...
- 罗琴芳唐满华黄文科潘蔚绮冯立强赵永坤张爱国赖汉漳张晓楠汤钦陈凌陈瑞爱
- 关键词：禽流感病毒
