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鸡胚胎干细胞的离体培养与鉴定被引量：4: 2009年; 为探讨鸡胚胎干细胞的培养条件及鉴定方法,本试验以鸡胚成纤维细胞为饲养层,以高糖DMEM为基础培养基并添加SCF、bFGF、mLIF等抑制分化的细胞因子,离体培养鸡x期胚盘细胞。结果显示,该培养体系可以获得典型的呈集落状生长的细胞克隆,传至第4代仍可检测到胚胎干细胞的特定表面抗原SSEA-1;细胞克隆经悬滴——悬浮培养可形成拟胚体,并检测到中、内、外3个胚层的特异性基因CH-T、TTR、和β-activin的表达。结果表明,本试验培养出具有多分化潜能的鸡胚胎干细胞。; 陈胜锋黄文静陈志胜计慧琴王丙云; 关键词：鸡胚胎干细胞

不同冷冻保护剂对鸡胚胎干细胞冻存与复苏的影响被引量：3: 2008年; 通过计算复苏后细胞存活率以及观察细胞生长状态,比较了二甲基亚砜(DMSO)、乙二醇(EG)和甘油3种冷冻保护剂对鸡ES细胞的冷冻保存效果。结果显示:1)当DMSO的浓度为5%、10%和15%时,鸡ES细胞复苏后的存活率分别为73.57%、85.47%和78.90%;当EG浓度为5%、10%、和15%时,复苏后细胞存活率分别为68%、74.30%和67.70%;当甘油浓度为5%、10%和15%时细胞的复苏存活率分别为31.20%、51.40%和50.60%。在相同浓度下,以DMSO保护效果最佳,EG次之,甘油最差。同一种保护剂,以10%浓度的保存效果最好;2)以DMSO为冷冻保护剂,复苏后的鸡ES原代培养在饲养层上可以较好的生长,并形成集落,当浓度为10%时AKP阳性克隆数最高为23.5个。上述结果提示.以10%的DMSO作为鸡ES细胞的冷冻保护剂效果最佳。; 王丙云黄文静计慧琴陈胜锋陈志胜; 关键词：鸡胚胎干细胞冷冻保存

不同饲养层对鸡胚胎干细胞培养效果的影响: 胚胎干细胞离体培养的关键技术是在保证细胞具备无限增殖能力的同时维持其未分化状态,目前最有效的方法是采用饲养层细胞来培养胚胎干细胞。饲养层既可分泌成纤维细胞生长因子等促有丝分裂因子促进其增殖,又可分泌白血病抑制因子等多种分...; 陈胜锋黄文静王丙云陈志胜计慧琴; 文献传递

不同冷冻保护剂对鸡胚盘细胞冻存保护效果的比较研究: 从 x 期鸡胚中分离鸡胚盘细胞进行离体培养是获得鸡胚胎干细胞的重要途径。高效的鸡胚盘细胞体外冻存方法可以节约重复从鸡胚中分离胚盘的时间,提高鸡胚胎干细胞培养的效率。; 陈胜锋黄文静王丙云陈志胜计慧琴; 文献传递

离体培养鸡胚胎干细胞的鉴定: 胚胎干细胞的一个重要特性就是在长期离体培养条件下能维持其未分化状态。碱性磷酸酶(AKP)以及胚胎阶段表面特异性抗原(SSEAs)检测是鉴定离体培养细胞处于未分化状态的常用方法。胚胎干细胞中含有丰富的 AKP,而在已分化细...; 王丙云黄文静陈志胜陈胜锋计慧琴; 文献传递

同位素标记检测卵黄抗体对大肠杆菌的黏附抑制作用被引量：3: 2011年; 仔猪大肠杆菌性腹泻的主要病原为产肠毒素性大肠杆菌（enterototxigenic Escherichia coli，ETEC）。ETEC的致病作用主要由肠毒素和黏附素性菌毛等两类毒力因子共同构成，其主要的致病环节是ETEC通过黏附素性菌毛与小肠黏膜上皮细胞外的黏膜蛋白特异性受体相结合，继而增殖并产生大量毒素引起小肠吸收分泌功能失常从而导致腹泻；另外，卵黄抗体具有稳定性高、耐酸、耐碱、耐热的特点，在各种蛋白酶的作用下仍能保持一定的抗体活性。; 李冬虹黄文静卢玉葵邓桦赵佳荣马春全; 关键词：产肠毒素性大肠杆菌卵黄抗体同位素标记大肠杆菌性腹泻致病作用

不同饲养层对鸡胚胎干细胞培养效果的影响被引量：4: 2010年; 目的:为探索鸡胚胎干细胞培养的优化条件,比较不同饲养层对鸡胚胎干细胞离体培养的效果。方法:用传至第2代的鸡胚成纤维细胞与鸭胚成纤维细胞,经丝裂霉素处理后制作饲养层,比较这2种饲养层以及不用饲养层对鸡胚胎干细胞离体培养效果的影响。结果:在以鸡胚成纤维细胞和鸭胚成纤维细胞作为饲养层的培养体系中,鸡胚胎干细胞均可保持良好的生长状态,而且2种饲养层对鸡胚胎干细胞克隆形成的影响差异不显著(P>0.05)。结论:鸡胚成纤维细胞和鸭胚成纤维细胞均可作为较好的饲养层细胞用于鸡胚胎干细胞的离体培养。; 陈志胜王丙云黄文静陈胜锋计慧琴; 关键词：鸡胚胎干细胞饲养层鸡胚成纤维细胞鸭胚成纤维细胞

鸡拟胚体的离体培养及特异性基因表达的检测: 胚胎干细胞最重要的特性是具有发育的全能性,可以分化为内、中、外3个胚层的几乎所有类型的细胞。悬浮培养的胚胎干细胞在无饲养层也无分化抑制剂的条件下,可形成类似早期胚胎的拟胚体。; 王丙云黄文静陈志胜陈胜锋计慧琴; 文献传递

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黄文静