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HPLC结合MALDI-TOF-MS分析木聚糖水解产物被引量：2: 2015年; 利用HPLC结合MALDI-TOF-MS对1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)衍生化后山毛榉木聚糖水解产物进行分析,检测到了难以获得标准品对照的木聚糖水解产物。结果表明,稀硫酸水解山毛榉木聚糖的主要水解产物有木糖和4-O-甲基葡萄糖醛酸-木糖(B2),以及少量4-O-甲基葡萄糖醛酸(B1)。内切重组木聚糖酶An Xyn10C水解山毛榉木聚糖产生木糖、木二糖和4-O-甲基葡萄糖醛酸-木三糖(B3),而内切重组木聚糖酶Ho Xyn11A水解山毛榉木聚糖主要产生木糖、木二糖、木三糖、4-O-甲基葡萄糖醛酸-木四糖(B4)和4-O-甲基葡萄糖醛酸-木五糖(B5)。基于PMP柱前衍生化的HPLC结合MALDI-TOF-MS方法能高效地分析复杂的木聚糖水解产物。; 黎海龙李成国秦光辉刘健甘礼惠谢茹胜龙敏南; 关键词：低聚木糖 MALDI-TOF-MS HPLC

一种利用高效液相色谱分析木聚糖水解液的方法: 一种利用高效液相色谱分析木聚糖水解液的方法，涉及木聚糖。1)取配制好的糖标准品溶液或生物质水解液加到NaOH溶液中，加入PMP甲醇溶液，反应后取出冷却，用HCl中和，用氯仿萃取，漩涡震荡后除去有机溶剂，离心，取上清液稀释...; 刘健龙敏南甘礼惠黎海龙; 文献传递

能源植物半纤维素高效定向酶水解研究: 半纤维素占木质纤维素生物质含量的15％～35％，是自然界中第二大可再生资源。半纤维素在木质纤维素生物质转化和利用中扮演重要的角色。一方面，半纤维素及其水解中间产物会阻碍和抑制纤维素酶水解，将半纤维素快速水解为单糖能提高纤...; 黎海龙; 关键词：半纤维素芒草半纤维素酶

β-葡萄糖苷酶的异源表达及与纤维素酶协同酶解竹纤维被引量：4: 2013年; 在毕赤酵母GSll5中表达东方肉座菌EU7．22的B．葡萄糖苷酶基因（bglI），获得基因工程菌株BPl7。优化BPl7发酵产酶条件后，重组β－1葡萄糖苷酶活力达121IU／mL。酶学性质研究表明，该酶最适反应温度为70℃。在60％以下有较好的热稳定性；最适催化pH为5．0，在pH3．0～8．0之间有较好的稳定性。将异源表达的B．葡萄糖苷酶添加到东方肉座菌的纤维素酶液中协同降解经过预处理的竹纤维，当纤维素酶添加量为FPA20IU／g底物，β一葡萄糖苷酶添加量为BG6IU／g底物时，纤维二糖浓度显著下降，酶解得率达到83．03％，表明重组β－葡萄糖苷酶的加入更有利于纤维素的酶解糖化。; 成奕瑾张婷黎海龙龙传南刘健龙敏南; 关键词：纤维素酶 Β-葡萄糖苷酶毕赤酵母异源表达

半纤维素侧链降解酶——α-葡萄糖醛酸酶的研究进展被引量：3: 2014年; 半纤维素是自然界中最丰富的可再生资源之一,将半纤维素降解为单糖并转化为燃料或化学品一直是科学界研究的热点。半纤维素是由木糖基主链以及α-葡萄糖醛酸等侧链共同组成的异质多聚体。α-葡萄糖醛酸酶是半纤维素完全降解过程中的关键酶之一,能够水解4-O-甲基葡萄糖醛酸与木糖之间的α-1,2-糖苷键。本文综述了α-葡萄糖醛酸酶的分类、催化机制及晶体结构、酶学性质和基因克隆表达等方面的研究进展,同时对该研究进行了展望。; 吴金连薛勇黎海龙甘礼惠刘健龙敏南; 关键词：半纤维素酶学特性

竹屑制备高取代度羧甲基纤维素钠的优化及其表征被引量：6: 2015年; 从竹材加工剩余物竹屑中提取纤维素,然后制备羧甲基纤维素钠。采用Plackett-Burman(PB)设计与中心组合法对影响竹纤维羧甲基纤维素钠取代度的6个相关因素进行了研究,结果表明,关键因子为氢氧化钠与纤维素的质量比、氯乙酸钠与纤维素的质量比和醚化时间;建立此三因素对羧甲基纤维素钠取代度影响的二次回归模型,优化得到最佳制备条件是:氢氧化钠与纤维素的质量比为0.8、氯乙酸钠与纤维素的质量比为1.2,醚化时间为2 h。制得羧甲基纤维素钠的黏度为136 m Pa·s,取代度为0.93。利用扫描电镜、红外光谱、X射线衍射和热重分析等对制得样品进行表征。结果表明,利用廉价的竹屑可以制备高取代度的羧甲基纤维素钠。; 余小龙刘健甘礼惠黎海龙龙敏南; 关键词：竹屑羧甲基纤维素钠取代度

东方肉座菌GH10家族木聚糖酶基因的克隆及异源表达被引量：3: 2015年; 木聚糖酶是降解半纤维素最主要的酶,对于开发可再生生物能源具有重要的应用价值。分别以东方肉座菌(Hypocrea orientalis)EU7-22的基因组DNA和c DNA为模板,利用染色体步移和PCR技术首次克隆获得该菌GH10家族木聚糖酶Ⅲ的基因(xynⅢ),并对其进行生物信息学分析。结果表明:该基因全长1283 bp(gxynⅢ),含有3个内含子;CDS序列为1044 bp(cxynⅢ),编码347个氨基酸,N端含有一个16 aa的信号肽序列;XYNⅢ氨基酸序列与Trichoderma pseudokoningii的endoxylanase具有较高的同源性。经生物信息学分析,XYNⅢ成熟蛋白可能含有18个N-糖基化位点,其理论等电点(p I)为6.14,蛋白质分子质量为36.55 ku,属于亲水性蛋白;SWISS-Model建模预测,XYNⅢ成熟蛋白中含有11个α螺旋,其核心结构为8个β折叠片围成一个柱状结构。同时将编码成熟蛋白的基因片段mxynⅢ与p PIC9K质粒连接构建表达载体后转化毕赤酵母,对重组子表达产物进行酶活检测显示该基因能在毕赤酵母中表达有生物活性的XYNⅢ并分泌到胞外,发酵液中的木聚糖酶活在诱导培养168 h后可达到127.5 IU/m L。; 吴金连薛勇黎海龙刘健甘礼惠龙敏南; 关键词：基因克隆生物信息学分析异源表达

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黎海龙