齐静
- 作品数：142 被引量：252H指数：8
- 供职机构：山东省农业科学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技重大专项山东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学化学工程更多>>
- 猪TRIM56敲除质粒、细胞系及其构建方法和应用
- 本发明涉及分子生物学技术领域，特别涉及猪TRIM56基因敲除质粒的构建，猪TRIM56敲除PAM‑KNU细胞系的构建，敲除细胞系中能明显促进PRRSV增殖，可以用于抗病毒作用研究。
- 杜以军吴香菊齐静张秀婷丛晓燕李均同
- 鹅IL-2基因在大肠杆菌中的表达及其可溶性单体的分离被引量：3
- 2008年
- 将去除信号肽编码序列的鹅IL-2基因克隆到原核表达载体pET-28a(+),构建了重组表达质粒pET-28a (+)-goIL-2,转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导,实现了重组鹅IL-2(rgoIL-2)蛋白在大肠杆菌中的表达。SDS-PAGE和Western-blotting分析显示,表达蛋白的分子量约为15.0 kD,能被抗鹅IL-2单克隆抗体特异识别。可溶性分析表明表达蛋白大部分以包涵体形式存在,部分以可溶形式存在,非变性电泳可见可溶性蛋白存在单体和多聚体组分。镍柱亲和层析法纯化的rgoIL-2蛋白过滤后,利用(?)KTA FPLC(快速蛋白分离纯化系统)进作逐级分离,非变性电泳可见单一的鹅IL-2可溶性蛋白单体。体外生物学活性分析显示鹅IL-2可溶性蛋白单体能刺激鹅淋巴细胞增殖。这为进一步研究鹅IL-2的生物学功能及其临床应用奠定基础。
- 齐静陈吉刚王金勇方杰吴佳俊周继勇
- 关键词：原核表达纯化
- 用线性梯度平板准确测定药物敏感性和分离抗药性菌株被引量：4
- 2011年
- 菌群在药物的最低抑菌浓度附近的动力学过程是抗生素药理学研究的核心问题.建立一种能确定精确的MIC且又能准确分离抗药性菌株的方法,是目前临床对药敏实验新的要求.根据Fick扩散定律制备了线性梯度平板:将15mL含适当浓度恩诺沙星的琼脂培养基在9cm培养皿中倾斜凝固,刚好覆盖整个平板底面,然后水平放置,再在其上层加入同样体积的无药琼脂培养基,凝固12h后,药物浓度达到扩散平衡而呈均匀连续线性梯度.通过实测验证药物浓度在平板表面呈线性梯度分布.将待检E.coli菌群均匀涂布在梯度平板上,培养12h后,随恩诺沙星浓度提高依次形成连续密集小菌落区和离散大菌落区,根据两区域的分界线可以确定菌群自然形成的真实的MIC,与常规药敏实验方法测定结果一致.大菌落重新涂布高梯度平板,分界线显著上升,并检测出抗药性基因突变,表明该方法很容易筛选出菌群中的抗药性菌株.梯度平板可以方便地呈现整个菌群在MIC附近的动力学过程和遗传生理变化,并预警该抗生素使用后可能出现的抗药性,从而指导临床抗菌药物的选择和使用.
- 刘玉庆李靖冉杜加法胡明白华齐静高超魏甜甜苏红金健玲高培基
- 关键词：E.COLI恩诺沙星MIC
- 一种细菌抗药性检测系统及其操作方法
- 本发明公开了一种细菌抗药性检测系统及其操作方法，系统包括药敏试验接种仪、药敏试验图像采集转换仪、药敏检测盒、菌株培养器，药敏检测盒中设置有培养基，药敏试验接种仪向药敏检测盒中接种菌株，菌株培养器为药敏检测盒中的菌株提供生...
- 刘玉庆骆延波李璐璐黄保华齐静胡明张庆张印
- 文献传递
- 猪TRIM56全长及其截短体真核表达质粒的构建及蛋白的表达和定位
- 2023年
- 本研究构建了猪TRIM56(sTRIM56)全长及其截短体的真核表达质粒,并检测了其融合蛋白的表达和定位。首先,根据sTRIM56基因序列及结构特点,设计扩增全长及4个截短体的引物,提取猪肺泡巨噬细胞3D4/21的总RNA,RT-PCR扩增sTRIM56全长及截短体基因,并将其克隆至pXJ41真核表达载体,构建全长及其截短体的真核表达质粒。其次,将sTRIM56全长及截短体真核表达质粒转染HEK-293T细胞,Western blotting检测其蛋白表达;转染猪肺泡巨噬细胞3D4/21,间接免疫荧光试验(IFA)检测其亚细胞定位。双酶切和测序结果显示,sTRIM56全长及截短体的真核表达质粒构建成功;sTRIM56蛋白约为82 kDa,与预期相符,各截短体蛋白条带也与预期相符;sTRIM56全长及4个截短体蛋白均主要定位于细胞质中。本研究结果可为后续深入研究sTRIM56蛋白及其不同结构域的抗病毒作用及分子机制奠定基础。
- 姚来娣吴香菊齐静丛晓燕李均同贾杏林杜以军
- 关键词：真核表达质粒
- 环介导等温扩增超级细菌NDM-1基因的引物及检测超级细菌NDM-1基因的试剂盒及检测方法
- 本发明属于细菌基因检测技术领域环介导等温扩增超级细菌NDM-1基因的引物，由一对外引物，一对内引物和一对环引物组成，外引物与内引物的摩尔比为1:8，外引物与环引物的摩尔比为1:4。检测超级细菌NDM-1基因的试剂盒，包括...
- 齐静刘玉庆杜以军白华骆延波朱晓玲胡明胡新新张秀美
- 新型吸管式药敏检测盒的制备及在奶牛乳房炎诊治中的初步应用
- 为适应兽医临床简陋的条件,为养殖场提供实用的药敏检测方法,本研究根据试管稀释法原理,研制吸管式药敏检测盒,并对该药敏检测盒的准确性、稳定性进行检验;然后对引起奶牛乳房炎的临床分离病原菌进行药敏检测。结果表明,吸管式药敏检...
- 白华齐静胡明胡欣欣朱义梅朱小玲骆延波刘玉庆吴聪明
- 关键词：兽医临床病原菌乳房炎
- 一种多重荧光定量PCR检测试剂盒及应用
- 本发明涉及生物技术中的病毒检测技术领域，特别涉及一种多重荧光定量PCR检测试剂盒及应用。试剂盒中的反应液中含有一对通用引物和4条特异性TaqMan探针，并标记不同荧光基团，实现一个反应体系可同时鉴别PRRSV经典毒株、高...
- 胡悦杜以军齐静张全芳吴香菊步迅姜丹丹范阳阳
- 高效表达的猪粒细胞巨噬细胞集落刺激因子基因及其表达蛋白的用途
- 本发明涉及生物技术中基因表达领域，特别涉及一种高效表达的猪粒细胞巨噬细胞集落刺激因子基因，如序列表中序列2所示，还涉及猪粒细胞巨噬细胞集落刺激因子基因表达蛋白在增强高致病性PRRSV灭活疫苗体液免疫和细胞免疫应答中的应用...
- 杜以军齐静王金宝吴家强黄保华郭立辉陈蕾丛晓燕孙文博任素芳李俊时建立吕伟
- 文献传递
- 环介导等温扩增多重耐药cfr基因的引物及检测多重耐药cfr基因的试剂盒及检测方法
- 本发明属于细菌基因检测技术领域环介导等温扩增多重耐药cfr基因的引物，包括一对外引物，一对内引物和一个环引物，外引物与内引物的摩尔比为1:8，外引物与环引物的摩尔比为1:4。检测多重耐药cfr基因的试剂盒，包括若干个装有...
- 齐静刘玉庆杜以军白华骆延波朱晓玲胡明胡新新张秀美
- 文献传递
