丁庆豹
- 作品数：45 被引量：141H指数：8
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- 相关领域：生物学化学工程轻工技术与工程医药卫生更多>>
- 从核糖核酸酶解液中分离核苷酸的方法
- 邱蔚然丁庆豹高淑红谢胜
- 本发明提供了一种从核糖核酸酶解液中分离核苷酸的方法。本发明通过阳阴离子交换树脂的有序排列组合，一次分离纯化得到高纯度单核苷酸。本发明采用两根阳离子交换树脂柱、一根大孔弱碱阴离子交换树脂柱和一根弱碱阴离子交换树脂柱，将酶解...
- 关键词：
- 关键词：核苷酸
- 一种乙酰短杆菌及以该菌种为酶源制备5-氟尿苷的方法
- 邱蔚然丁庆豹闫蓬勃
- 本发明公开了一种乙酰短杆菌QD96，以及以该菌种为酶源制备5-氟尿苷的方法。本发明利用该菌种产生的核苷磷酸化酶和嘧啶核苷磷酸化酶，在微生物非增值情况下进行酶反应而生成5-FUR。该方法可以采用较高的底物浓度，使摩尔转化率...
- 关键词：
- 关键词：乙酰短杆菌
- 乙酰短杆菌酶法合成5-甲基尿苷被引量：6
- 1999年
- 用乙酰短杆菌完整细胞为酶源，以鸟苷和胸腺嘧啶为底物，酶法合成５－甲基尿苷。最佳反应条件为：底物浓度１００～２００ｍｍｏｌ／Ｌ，ｐＨ８．０，磷酸盐缓冲液浓度１０～５０ｍｍｏｌ／Ｌ，６０°Ｃ，摇床转速１２０ｒ／ｍｉｎ，反应１ｈ即达到平衡，５－甲基尿苷转化率达６０％以上。
- 丁庆豹邱蔚然
- 关键词：酶法乙酰短杆菌
- 联合β-半乳糖苷酶和L-阿拉伯糖异构酶酶法合成D-塔格糖的研究
- 2012年
- 将大肠杆菌K-12中的β-半乳糖苷酶基因lacZ和L-阿拉伯糖异构酶基因araA以串联方式克隆到载体pET-28a(+)上,并转入大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达。通过SDS-PAGE分析发现,重组菌株能表达出大量可溶性β-半乳糖苷酶蛋白和L-阿拉伯糖异构酶蛋白。以重悬菌液为酶源,可将乳糖降解为D-半乳糖,并将D-半乳糖转化为D-塔格糖。在温度为50℃,pH 7.0的缓冲液中,经一段时间反应后,D-塔格糖的转化率可达21%以上。加入Mn^(2+)、Co^(2+)和Fe^(2+)均能够使D-塔格糖的转化率提高。
- 张留权王玥丁庆豹欧伶许彦梅张春艳魏晓琨
- 关键词：大肠杆菌L-阿拉伯糖异构酶D-塔格糖
- 乙酰短杆菌中核苷磷酸化酶的性质研究
- 2013年
- 以乙酰短杆菌完整细胞为酶源,研究不同条件下核苷磷酸化酶的性质。方法:将乙酰短杆菌湿菌体置于不同保藏温度及在不同种类缓冲溶液中考察其稳定性;在有或无核保护下核苷磷酸化酶对热的稳定性;并设计核苷的磷酸解反应或合成反应,测定核苷磷酸化酶的活力及酶促反应的表观米氏常数。结果:乙酰短杆菌中的核苷磷酸化酶经低温保藏可以保持较长时间的稳定性;菌体在60℃处理1小时即失去核苷磷酸化酶的活力,但是添加胸腺嘧啶有明显的保护作用;菌体中核苷磷酸化酶的合成能力明显大于磷酸解能力;对尿苷和5-甲基尿苷的表观米氏常数和最大反应速率分别为16.7、11.4 mmol/L,0.0063、0.0041 mmol/L.min。结论:含核苷磷酸化酶的乙酰短杆菌完整细胞作为酶源,在低温下可以长时间保藏,反应中的碱基对核苷磷酸化酶的抗热性有益,该菌种可以作为工业上核苷磷酸化酶的来源。
- 张春艳许彦梅王玥丁庆豹欧伶
- 关键词：核苷磷酸化酶乙酰短杆菌酶学性质尿苷
- 产气肠杆菌菌体内核苷磷酸化酶的诱导表达被引量：1
- 2008年
- 目的:阿糖腺苷(Ara-A)是一种广谱抗病毒药物,临床上用于治疗多种病毒性疾病,同时也是合成阿糖腺苷单磷酸(Ara-AMP)的重要原料、本课题旨在寻找一种高效酶法生产嘌呤类阿糖核苷的方法。方法:以产气肠杆菌完整细胞为酶源,研究产气肠杆菌菌体培养条件对核苷磷酸化酶的影响及其诱导性。结果:胸苷磷酸化酶、尿苷磷酸化酶和嘌呤核苷磷酸化酶均可被多种核苷、核苷酸甚至碱基诱导。胞苷或胞苷酸的添加量为15-20mmol/L,诱导时间在0-8小时均可。经胞苷和胞苷酸诱导的菌体可使酶反应时间缩短6倍,大大提高了反应效率。经诱导的菌体,在反应后仍保持较高的核苷磷酸化酶活力:而未经诱导的菌体,一次反应后即丧失大量的酶活力。结论:核苷磷酸化酶的活性可以通过诱导而提高,以此优化阿糖腺苷的生产。
- 魏晓琨刘岩岩周丽娜丁庆豹王昌禄
- 关键词：产气肠杆菌核苷磷酸化酶阿糖腺苷
- 产气肠杆菌中核苷磷酸化酶的诱导及酶法合成阿糖腺苷
- 各种核苷及类似物对产气肠杆菌中核苷磷酸化酶的诱导性进行了研究．其中胞苷和胞苷酸对嘌呤核苷磷酸化酶、尿苷磷酸化酶和胸苷磷酸化酶具有较强的诱导作用．经诱导后的产气肠杆菌进行转化阿糖腺苷,效率大幅度提高,反应时间从36小时缩短...
- 魏晓琨丁庆豹郭勇莉欧伶王昌禄邱蔚然
- 关键词：产气肠杆菌嘌呤核苷磷酸化酶胸苷磷酸化酶阿糖腺苷
- 文献传递
- 用固定化啤酒酵母细胞合成胞嘧啶核苷二磷酸胆碱被引量：13
- 2002年
- κ-卡拉胶 -魔芋多糖复配胶包埋的啤酒酵母细胞 ,经冻融处理后用于合成胞嘧啶核苷二磷酸胆碱 (CDP-胆碱 )。结果表明 :2 5 0 m L摇瓶中加入 5 0 m L反应液 (葡萄糖 40 0 mmol/ L,CMP1 0 mmol/ L,磷酸胆碱 5 0 mmol/ L,K2 HPO4 -KH2 PO4 缓冲液 1 0 0 mmol/ L,Mg SO4 1 0 mmol/ L,p H=8.0 ) ,固定化细胞 1 2 0 0 g/ L,3 4°C、1 5 0 r/ min下 ,反应 4h后补加 40 0 mmol/ L葡萄糖 ,反应 8h可使60 %以上的 CMP转化为 CDP-胆碱。反应液经灭菌和添加辅酶 I(NAD+ )后 ,固定化细胞可连续使用 4次 ,CDP-胆碱转化率维持在 40
- 牛红星邱蔚然丁庆豹
- 关键词：卡拉胶魔芋多糖啤酒酵母固定化细胞医药工业
- 麦芽根中5′-磷酸二酯酶的制备及性质被引量：9
- 2002年
- 从麦芽根中提取 5′-磷酸二酯酶 ,酶活可达 474U/ m L。将所得酶液用于水解酵母核糖核酸 ,得到 5′-CMP、UMP、GMP、AMP 4种单核苷酸。最佳反应条件为 :底物 RNA浓度为0 .0 1 g/ m L,每毫升底物的酶用量为 3 0 U,酶解温度 70°C,p H7.0 ,时间 2 h,5′-核苷酸转化率达80 %。
- 李德莹邱蔚然丁庆豹
- 关键词：麦芽根核糖核酸热稳定性
- 生产抗癌新药氟铁龙中间体-5-FUR的NP酶条件优化的研究
- 闫蓬勃邱蔚然丁庆豹
- 关键词：药物中间体核苷磷酸化酶
- 文献传递
