丁禹 作品数:17 被引量:41 H指数:4 供职机构: 杭州市第一人民医院 更多>> 发文基金: 浙江省医药卫生科学研究基金 浙江省自然科学基金 杭州市医药卫生科技计划项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 政治法律 更多>>
一种药物性耳聋相关的线粒体A1555G或C1494T突变快速检测的方法研究 丁禹 滕尧树 冷建杭多重耐药大肠埃希菌质粒介导耐药性的研究 被引量:1 2014年 目的:了解临床收集的多重耐药大肠埃希菌克隆播散状况及质粒介导耐药性的特性。方法通过K- B纸片法明确细菌耐药谱,脉冲场凝胶电泳(PFGE)进行耐药菌株的克隆分型,了解其克隆播散情况,通过质粒接合实验获得耐药性质粒的接合菌,用PCR方法筛选接合菌株的常见耐药基因,并利用S1酶切质粒再进行PFGE的方法判读分析质粒的分子大小,分析菌株间的质粒水平迁移状况。结果临床分离95株大肠埃希菌均为多重耐药菌,对青霉素类、头孢菌素类、喹诺酮类、四环素类等药物显示出广泛耐药性,PFGE分型显示克隆传播趋势不明显。耐药菌株常携带可接合性耐药质粒,质粒分子量大小分布在40-330kb,编码多种对青霉素类、头孢菌素类等药物耐药的耐药基因,包括CTX- M型、TEM型β-内酰胺酶基因,以及质粒介导喹诺酮耐药基因qnr等等。结论临床大肠埃希菌多重耐药性严重,耐药性的快速传播已非同源克隆细菌的简单播散,可接合质粒造成的耐药基因水平转移可能起到了相当重要的作用。 卓广超 沈俊娅 朱华 冷建杭 丁禹 汪燕 郑辉 丁晓霞关键词:大肠埃希菌 多重耐药性 质粒 阿尔兹海默病患者线粒体转运RNA变异的初步研究 2021年 目的探讨线粒体转运RNA基因多态性与阿尔兹海默病(AD)的相关性。方法提取100例AD患者和50例健康对照个体的外周血基因组DNA,PCR扩增22个线粒体tRNA基因并测序,测序结果与线粒体标准序列进行比对,使用DNA STAR软件鉴定多态性位点,同时结合种系进化保守分析对变异位点进行分析,筛选致病性突变位点。结果PCR直接测序结果共发现5个突变位点,tRNA^(Ile)A4263G、tRNA^(Ala)T5655C、tRNA^(Cys)T5802C、tRNA^(Glu)A14693G以及tRNA^(Thr)G15927A,但是这些变异位点在健康对照组中未发现。进一步的研究发现,A4263G、T5655C、T5802C、A14693G和G15927A变异在进化上高度保守,推测这些变异位点可能引起线粒体tRNA代谢障碍,导致线粒体呼吸链功能受损,引起线粒体功能损伤,进而参与AD的发病进程。结论线粒体tRNA^(Ile)A4263G、tRNA^(Ala)T5655C、tRNA^(Cys)T5802C、tRNA^(Glu)A14693G以及tRNA^(Thr)G15927A突变与AD有关,可为AD的早期诊断及预警提供理论依据。 袁妮娜 章瑜 丁禹 冷建杭关键词:阿尔兹海默病 线粒体tRNA^(Thr) T15941C突变位点与原发性高血压的相关性 被引量:3 2017年 目的探讨线粒体DNA突变和原发性高血压的相关性。方法本文报道一个具有母系遗传特征的中国汉族原发性高血压家系的临床和分子遗传学特征。使用聚合酶链反应(PCR)扩增母系成员和正常对照的线粒体基因,经过数据比对筛选突变并进行相关分析。结果该家系的高血压发病率较高,此外,母系成员的线粒体基因全序列分析结果显示,存在同质性的tRNA^(Thr) T15941C的突变以及ND1C3497T突变,T15941C突变位于tRNA^(Thr)基因T_ψC环上高度保守的61号碱基,突变破坏了原有的57A-61T的碱基配对,生物信息学软件分析也发现T15941C突变改变了tRNA^(Thr)的二级结构,可能会引起线粒体tRNA代谢障碍。结论线粒体tRNA^(Thr) T15941C和ND1C3497T突变可能是这个原发性高血压家系发病的重要分子基础。该家系表现出的线粒体DNA同质性突变,发病年龄等表型差异,提示核基因、环境因素和线粒体遗传背景等可能对tRNA^(Thr) T15941C突变的表型表达有一定的影响。 丁禹 高贝贝 朱侯勇 童国新 周亮 叶显华 黄进宇关键词:原发性高血压 线粒体突变 线粒体DNA损伤在PCOS-IR中的作用机制初步研究 丁禹 卓广超 章彩娟 冷建杭 项目组对PCOS患者和正常对照个体进行了临床、分子遗传学,细胞和生物化学的评估,发现多个和PCOS相关的线粒体DNA突变位点,这些突变位于进化上高度保守的区域,突变引起tRNA代谢障碍,进而线粒体蛋白合成受阻。同时,结合...关键词:关键词:分子遗传学 细胞实验 抗磷脂酶A2受体抗体在特发性膜性肾病检测的临床意义 被引量:1 2017年 目的探讨抗磷脂酶A2受体(PLA2R)抗体检测在特发性膜性肾病(IMN)中的,临床意义。方法选择2016年1月至12月期间行肾活检并确诊的IMN患者38例,继发性膜性肾病(SMN)患者46例,以同期体检中心志愿者30例作为对照,采用定量检测血清中抗PLA2R抗体并加以分析。结果与对照组比较发现,IMN组中抗PLA2R抗体水平显著升高,差异有统计学意义(P〈0.05);SMN组中抗PLA2R抗体水平稍微升高,差异无统计意义(P〉0.05)。与SMN组比较,IMN组中抗PLA2R抗体水平显著升高,差异有统计学意义(t=4.937,P〈0.05)。抗PLA2R抗体的敏感度为68.4%,特异度为93.5%,阳性预测值为89.7%,阴性预测值为78.2%。在病理Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ分期中检出率分别是38.5%(5/13),83.3%(15/18),85.7%(6/7)。结论PLA2R抗体在IMN中较高的敏感度和特异度,可作为实验室诊断指标之一,可用于IMN与SMN之间鉴别。 杨伟华 丁禹 马平悦 肖长超 袁妮娜关键词:膜性肾病 酶联免疫吸附试验 高血压患者血液流变学检测分析及其临床意义 被引量:5 2015年 目的探讨血液流变学结果与高血压分级的关系,为临床开展高血压诊治提供理论依据。方法利用全自动血液流变仪检测315例高血压患者(高血压Ⅰ级100例、Ⅱ级113例,Ⅲ级102例)和69例健康对照者的全血切变率A、B、C、D、血浆粘度和红细胞聚集指数,并做统计分析。结果和健康对照组相比,高血压患者的全血切变率A、B、C、D和聚集指数差异均有统计学意义(P〈0.05)。此外,随着高血压级别的升高,全血切变率A、B、C、D和血浆粘度差异均有统计学意义(P〈0.05)。结论高血压患者血液粘度增高,使血流阻力增大;观察高血压患者血流变学指标,对于高血压的诊断和治疗具有一定的临床意义。 高贝贝 丁禹 黄进宇关键词:高血压 血液流变学 复发性口腔溃疡患者外周血活化淋巴细胞的表达研究 2012年 目的探讨复发性口腔溃疡(ROU)患者外周血淋巴细胞的活化状态及意义.方法采用流式细胞术检测68例反复发作的口腔溃疡患者(观察组)和25例体检健康者(对照组)外周血活化淋巴细胞状态.结果观察组 NK 细胞表达的 CD16+、CD56+以及 T 细胞表达的 CD4+、CD69+和 CD8+、CD69+百分率明显高于对照组(P〈0.01),而 B 细胞表达的 CD19+、CD69+的表达阳性率与对照组比差异无统计学意义(P 〉0.05).结论采用流式细胞术检测外周血活化淋巴细胞亚群,可作为 ROU 患者临床免疫诊断的指标,具有一定的临床价值. 丁禹 姚家俊 马惠珍 冷建杭关键词:流式细胞术 活化淋巴细胞 一种药物性耳聋相关的线粒体A1555G或C1494T突变快速检测的方法研究 被引量:1 2017年 目的线粒体12S rRNA突变是药物性耳聋的重要分子基础,其中A1555G和C1494T突变被报道和非综合症性耳聋有关,本研究旨在建立一种药物性耳聋相关的线粒体12S rRNA A1555G或C1494T突变快速检测的新方法,为耳聋的早期诊断和预防提供理论依据。方法以3种基因型(野生型、A1555G突变型、C1494T突变型)的线粒体12S rRNA序列为模板,使用Primer 5.0软件设计4条引物进行PCR扩增,同时检测A1555G或C1494T突变,并初步用于200例非综合症性耳聋患者的临床基因突变检测分析,最后通过PCR-Sanger测序进行评估。结果携带A1555G突变的个体经过PCR扩增后可以电泳检测出两条带(226 bp和736 bp),携带C1494T突变的个体经过电泳检测出488 bp和736 bp两条条带,而野生型的12S rRNA使用该方法仅扩增出736 bp一条条带。200例非综合症性耳聋患者中的A1555G和C1494T突变的检出率为4%(8/200),其中A1555G突变个体4例,C1494T突变个体4例;DNA测序分析检测突变型检出率为4%(8/200)。2种方法具有极好的一致性(Kappa=1.000,P<0.01)。结论该方法是一种简便、经济、准确、有效的A1555G和C1494T突变检测方法,可用于鉴定药物性耳聋相关的线粒体12S rRNA基因突变,从而有效的预防药物性耳聋的发生。 丁禹 卓广超 郑辉 黄水仙 冷建杭关键词:药物性耳聋 线粒体 PCR Mito Q10联合二甲双胍作用于PCOS-IR大鼠的疗效实验观察 2018年 目的比较基于线粒体为靶点的抗氧化剂(MitoQ10)和二甲双胍对多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠胰岛素抵抗(IR)的生殖内分泌紊乱的治疗作用,为MitoQ10进一步应用于PCOS-IR治疗的临床研究提供理论依据。方法选取50只21日龄SPF级雌性SD大鼠,随机分为A、B、C、D、E组,使用丙酸睾丸酮和高脂饮食建立PCOS-IR老鼠模型。建模成功后,A组大鼠给予100mg/kg的二甲双胍治疗,B组大鼠给予2mg/mL的MitoQ10治疗,C组大鼠给予100mg/kg二甲双胍和2mg/mL的MitoQ10联合治疗,D组大鼠设定为模型组,E组大鼠设为空白组。干预前后采血测定睾酮(T)、促黄体生成素(LH)、卵泡刺激素(FSH)、空腹胰岛素(FIN)、空腹血糖(FPG),甘油三酯(TG),胆固醇(TC),低密度脂蛋白(LDL),并计算HOMA-IR的指数,最后剖取卵巢进行病理切片观察。结果治疗前后大鼠的血FINS、T、TG、TC、LDL以及HOMA-IR均显著降低(P<0.05);MitoQ10与二甲双胍能在不同程度的改善PCOS-IR大鼠的内分泌代谢的病理改变。结论 MitoQ10可以较好的改善PCOS-IR大鼠的内分泌状态,具有较好的疗效。 丁禹 郑辉 卓广超 张利棕 章彩娟 冷建杭关键词:多囊卵巢综合征 胰岛素抵抗 二甲双胍 抗氧化治疗