付若彬
- 作品数:5 被引量:12H指数:3
- 供职机构:四川大学生命科学学院生物资源与生态环境教育部重点实验室更多>>
- 发文基金:四川省应用基础研究计划项目教育部科学技术研究重点项目更多>>
- 相关领域:生物学农业科学更多>>
- 重组猪生长激素在毕赤酵母中的表达及其生物活性研究
- 本研究首先将克隆到的猪生长激素(pGH)基因cDNA编码区片断定向插入pMD-T质粒,转化大肠杆菌JM109,用菌落PCR和质粒PCR方法筛选阳性克隆;以BamHI和EcoRI酶切鉴定重组质粒。将得到质粒用BamH I和...
- 付若彬
- 关键词:生长激素基因融合蛋白CDNA
- 文献传递
- 猪生长激素基因的克隆及在哺乳动物细胞中的表达被引量:7
- 2005年
- 应用RT-PCR技术克隆了猪生长激素(pGH)cDNA,该基因编码蛋白的信号肽序列与已有报道的pGH基因存在2个氨基酸残基的差异,而成熟肽却无差异。将 pGH cDNA定向插入真核表达载体VR1020,构建了重组真核表达质粒VpGH;利用脂质体法转染哺乳动物细胞COS7,对转染后的COS7细胞进行RT-PCR、ELISA和免疫荧光分析,分别在转录和翻译水平证实了目的基因在COS7细胞中得到正确转染表达。
- 刘燕飞尉研付若彬丁秀琼谭俊杰孟亚鹏刘世贵龙章富
- 关键词:猪生长激素基因克隆真核表达
- 胞内表达猪生长激素基因的重组酵母菌构建与鉴定被引量:3
- 2007年
- 将猪生长激素(pGH)cDNA定向插入毕赤酵母胞内表达载体pPIC 3.5k质粒,重组构建了pPIC 3.5k-pGH/GS115酵母表达系统,其表达产物的SDS-PAGE和Western blot结果表明,pGH蛋白在胞内获得正确表达,表达量达378 mg/L.
- 付若彬刘海华张海英张莉刘世贵龙章富
- 关键词:猪生长激素基因毕赤酵母真核表达
- 猪生长激素基因的原核表达及其抗体制备被引量:7
- 2005年
- 通过构建pGH基因的原核表达质粒,转化大肠埃希氏菌TOP10,经IPTG诱导,成功表达了重组猪生长激素的融合蛋白。经SDS PAGE分析,在分子质量50.4ku处有1条新的特异蛋白质条带。对以包涵体形式表达的融合蛋白进行SDS PAGE分离,并经透析得到了重组融合蛋白,以此融合蛋白免疫家兔,制备并纯化了抗pGH多克隆抗体,经酶联免疫吸附测定、蛋白质印迹分析和免疫组织化学方法检测,此抗体具有较高效价和特异性。成功地表达了pGH基因并获得了多克隆抗体。
- 李凤孟亚鹏刘燕飞谭俊杰付若彬刘世贵龙章富
- 关键词:生长激素原核表达多克隆抗体
- 重组pGH在毕赤酵母中的表达及其生物活性研究
- 本研究首先将克隆到的猪生长激素(pGH)基因cDNA编码区片断定向插入pMD-T质粒,转化大肠杆菌JM109,用菌落PCR和质粒PCR方法筛选阳性克隆;以BamH Ⅰ和EcoRI酶切鉴定重组质粒。将得到质粒用BamH Ⅰ...
- 付若彬
- 关键词:猪生长激素真核表达小白鼠
- 文献传递