何剑为
- 作品数：30 被引量：35H指数：4
- 供职机构：辽宁大学生命科学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金辽宁省高等学校优秀人才支持计划教育部留学回国人员科研启动基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生农业科学文化科学更多>>
- 不同炮制方法对大黄的遗传毒性的减毒效果的研究被引量：3
- 2011年
- 目的:通过不同的中药炮制方式,降低大黄的遗传毒性.方法:采用不同中药炮制方式炮制生大黄,应用鼠伤寒沙门菌体外回复突变试验(Ames)和彗星实验(Comet assay)对生大黄及不同炮制方式炮制后的大黄的遗传毒性进行研究.结果:生大黄Ames试验中TA97、TA102菌株无论代谢活化或非代谢活化皆为阳性;而除醋蒸样品在代谢非活化条件下呈阳性外,各菌株的清蒸和醋蒸大黄Ames试验均为阴性,但清炒和醋炒大黄仍为阳性.彗星实验结果显示,生大黄在1.25,2.5和5.0mg/mL浓度下,其尾长、尾部DNA含量与阴性对照组相比差异有统计学意义(P<0.01),且其毒性呈剂量-效应关系,大黄各剂量组清蒸和醋蒸与阴性对照组比较差异无统计学意义,达到了降低毒性的效果.而清炒和醋炒的样品仍具有遗传毒性.结论:生大黄具有一定的遗传毒性,清蒸和醋蒸两种炮制方式可以有效的降低大黄的遗传毒性,而清炒、醋炒减毒效果不明显.
- 邹志远宋有涛杨雷高鹭李辉陈冬松何剑为
- 关键词：AMES试验彗星试验遗传毒性
- 中药醇提物在制备治疗和预防淀粉样蛋白疾病的药物中的应用
- 本发明涉及中药醇提物在制备治疗和预防淀粉样蛋白疾病的药物中的应用。本发明，主要探究山茱萸和三七醇提物对溶菌酶成纤维的影响，以期为防治淀粉样沉积疾病寻找到新的有效的治疗药物。本发明结果显示三七、山茱萸醇提物组的荧光强度与正...
- 何剑为刘俊清孙越周雪洁孙永辉
- 文献传递
- 藏药绿萝花醇提物在制备防治淀粉样蛋白疾病的药物中的应用
- 本发明涉及藏药绿萝花醇提物在制备防治淀粉样蛋白疾病的药物中的应用。本发明主要探究藏药绿萝花醇提物对溶菌酶成纤维的影响，以期为防治淀粉样沉积疾病寻找到新的有效的治疗药物。本发明结果显示，绿萝花醇提物组的荧光强度与正常的单独...
- 何剑为刘俊清秦淑贞张霞孙瑞
- 文献传递
- 细胞水平疯牛病发病及治疗机理的研究
- 宋有涛何剑为张慧丽魏杰李辉邹志远
- （一）分子伴侣Hsp70家族对于朊病毒的调控机制。 1.酵母Hsp70家族中的Ssa1对于朊病毒“种子”在复制中的作用。 2.酵母Hsp70家族中的Ssb缺损对于朊病毒的影响。 3.不同生物来源Hsp70家族中的H...
- 关键词：
- 关键词：HSP70分子伴侣朊病毒疯牛病
- 过表达PDI对毕赤酵母分泌淀粉样蛋白的影响——以胱抑素为例
- 2021年
- 【目的】本研究旨在结合酵母菌蛋白质二硫键异构酶(protein disulfide isomerase,PDI)与其底物蛋白鸡胱抑素C(chicken cystatin C,cC)在酵母中的共表达,理解PDI影响外源蛋白合成与表达的调控规律。运用转录组深度测序技术(RNA-Seq)筛选差异基因,调取并鉴定影响cC表达的关键基因,为解析外源蛋白高效表达机制,改造工程菌株提供理论支撑。【方法】以巴斯德毕赤酵母GS115、GS115-cC为出发菌株,采用电转的方法将携带PDI编码基因的载体pPIC3.5K转入到GS115/GS115-cC菌株,使其在菌株中过表达,研究过表达PDI对cC表达的影响。采用RNA-Seq深度测序方法,研究重组毕赤酵母基因表达差异情况。并结合KEGG注释结果对数据进行分析,挑选差异显著表达基因进行验证,初步明确其在蛋白表达调控方面的功能。【结果】本研究通过构建过表达PDI重组毕赤酵母菌株,使得外源蛋白cC的表达量显著增加。利用RNA-seq技术分析过表达PDI菌株与正常菌株的差异,最终筛选了373个差异表达基因,其中有122个差异基因注释到KEGG生物通路,包括12个基因注释到蛋白质转运和分解代谢途径,21个基因注释到蛋白质折叠分选和降解途径,以及24个基因参与蛋白质的翻译途径等。【结论】在毕赤酵母中过表达PDI能显著增加外源蛋白cC的表达量。通过对过表达与正常表达PDI的毕赤酵母基因的表达谱分析,初步确定了其中一些转录情况变化显著的基因,明确了它们参与的细胞途径和信号通路,为改造具有高效率表达淀粉样蛋白的酵母菌株奠定基础。
- 牛婷婷周雪洁余小波蔡宜生陈静王瑞付爽栾闯何剑为
- 关键词：毕赤酵母蛋白质二硫键异构酶转录组测序
- 高等学校食用菌栽培学课程教学改革研究被引量：13
- 2015年
- 近年来食用菌生产企业对栽培技术专业人才的需求日益增加,我们通过教学实践,在分析传统食用菌栽培学教学模式弊端的同时,对其进行改革创新,引入新的授课方式,加强实践基地的建设与优化,针对当下大学生普遍缺乏劳动锻炼,动手能力较差,被动接受知识的特点,指导学生自己设计、完成食用菌栽培学实验,使学生能够改变被动学习的习惯,从而提高他们顺利完成科学研究任务的效率和能力。同时结合市场需求,通过与企业合作等方式使科研工作更贴近市场需求,培养出既能迎合市场以及企业需求,也可投入科研创新的优秀人才。
- 何剑为娄虹回晶郑方亮刘剑利
- 关键词：食用菌栽培学课堂教学模式
- Val55点突变对鸡胱抑素I66Q结构稳定性影响的分子动力学研究
- 2012年
- Val55是鸡胱抑素(Chicken cystatin,cC)铰链环状区的重要位点。本文采用分子动力学模拟的方法研究了V55位点突变对cC典型的淀粉样突变体I66Q结构稳定性的影响情况,并深入探讨了其分子机制。研究表明V55N和V55D对I66Q突变体都有稳定其结构的作用,但V55N的稳定作用更显著。进一步研究发现V55N和V55D对I66Q的这种稳定作用是由于突变后的55位残基与邻近残基形成了较多稳定的氢键,从而增加了自身位点及Loop1、β2-β3的稳定性,并进一步稳定了I66Q的α-螺旋和疏水核心结构。这可能最终阻碍胱抑素淀粉样突变体I66Q结构域交换的发生。
- 张梦媛徐利楠沈曼莉何剑为宋有涛
- 关键词：胱抑素分子动力学模拟
- 响应面法优化姜黄素提取工艺及其对类淀粉样蛋白聚集形成的抑制
- 2013年
- 目的:半胱氨酸酶抑制剂(cC)L68Q突变后能够以二聚体开始进一步产生类淀粉样聚集。研究姜黄素对基因重组突变cC的毕赤酵母Pichia pastoris X-33表达菌的生长和分泌的影响,以及抑制突变cC的类淀粉样聚集的作用。方法:采用响应面法优化姜黄素的提取工艺,通过液体比浊法探究姜黄素对基因重组菌株生长抑制的作用,通过SDS-PAGE研究不同浓度的姜黄素对cC的分泌的作用,通过刚果红染色法研究姜黄素对cC蛋白聚集的抑制作用。结果:由Design-Expert响应面分析软件得到姜黄素最佳提取条件为:液固比30:1(mL/g)、超声功率300W、提取时间15min,此条件下提取率达3.97mg/g。姜黄素对重组菌体生长的抑制作用的相对稳定,但随着姜黄素添加量的增加,其对蛋白分泌量和聚集沉淀量均抑制明显。结论:姜黄素对基因重组cC的生长、分泌和聚集有抑制作用。
- 张良杨松何剑为邹志远贾丽娇蒋坤孟宪军张慧丽
- 关键词：姜黄素响应面法优化
- 鱼糜制品凝胶特性改良研究进展被引量：6
- 2014年
- 鱼糜制品是指将鱼体经过采肉、漂洗、脱水,再精滤而制得的肌肉蛋白浓缩物。通常,鱼糜制品是指冷冻鱼糜,即含有鱼肉肌原纤维蛋白的新鲜鱼糜与防止蛋白质冷冻变性的添加物(抗冻剂)混合后冷冻保藏的食品。鱼糜制品的凝胶特性如硬度、伸缩性以及粘性主要由鱼糜中的肌原纤维蛋白特性及其凝胶状态决定,因此,鱼糜的凝胶变化过程是制作鱼糜制品的关键流程。本文参考了大量国内外文献,对鱼糜制品凝胶特性的影响因素进行了简要分析,并在此基础上对工艺改良方法进行了阐述,总结了多糖类和非肌肉蛋白类凝胶增强剂的研究实例,旨在为鱼糜制品行业提供改良鱼糜凝胶特性的理论依据和技术支撑。
- 王禹刘填王娜时博阳贺敏李辉何剑为
- 关键词：鱼糜制品凝胶特性影响因素
- 酵母抗朊病毒药物筛选模型细胞培养条件优选
- 2013年
- 目的探讨基于酵母的抗朊病毒药物筛选模型在初级筛选时的细胞培养最佳条件。方法通过表型分析的方法探讨了培养基pH值、初始菌液浓度、细胞生长时期3个因素对基于酵母的抗朊病毒药物筛选模型灵敏度的影响。结果培养基pH值能够影响酵母朊病毒[psi-]细胞的颜色表型,pH>7.46时,[psi-]酵母菌落变为白色,但对[PSI+]的聚集状态不造成影响;菌液初始浓度为A600nm=0.02时,相对于A600nm=0.5、A600nm=0.2时的药物治愈率要高几倍到几十倍;处于对数生长期的[PSI+]酵母细胞对药物的敏感性较差,而处于延滞期和稳定期的[PSI+]酵母细胞对药物的敏感性较强。结论酵母抗朊病毒药物筛选模型在初级筛选时的细胞培养最佳条件为pH<6,菌液初始浓度为A600nm=0.02,处于稳定期的酵母细胞。
- 李辉王莹钟正伟王莉洁何剑为宋有涛
- 关键词：PH
