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低温诱导淡水白鲳细胞凋亡的研究被引量：2: 2006年; 为探讨10℃低温导致淡水白鲳尾鳍细胞系CBT死亡的原因及其可能机制.采用CCK-8试剂盒法检测细胞存活率,荧光染料H2DCFDA染色测定细胞内活性氧(ROS)含量,亚二倍体峰和Tunel分析检测细胞凋亡,琼脂糖凝胶电泳进行DNA片段分析,Hoechst33258染色观察凋亡细胞核形态变化,比色法测定乳酸脱氢酶(LDH)释放率.结果表明随CBT细胞受10℃低温作用时间的延长,细胞存活率显著下降,细胞内ROS含量和LDH释放率显著增加(P<0.01).低温处理3 d的CBT细胞经流式细胞仪检测出现亚二倍体峰,凋亡率为13%.再经32℃复温12 h后,琼脂糖凝胶电泳显示DNA凋亡梯带;Tunel检测,低温处理3、4和5 d的CBT细胞分别有23.49%,27.72%和35.10%发生凋亡.低温处理5 d的CBT细胞核分裂成多个小核,呈现出典型的凋亡小体.因此10℃低温能诱导CBT细胞凋亡.ROS参与了10℃低温致CBT细胞损伤及凋亡过程.; 俞宏朱敏杰严文静张铭; 关键词：淡水白鲳细胞凋亡活性氧

鱼类细胞低温伤害的红外光谱研究: 2006年; 分别对喜温性鱼类白鲳尾鳍细胞系CBT和广温性鱼类草鱼胚胎细胞系CP进行低温胁迫处理0～8d．采用傅立叶变换红外光谱技术检测细胞内DNA、RNA、蛋白质、磷脂、葡萄糖等相对含量的变化，得到低温对不同鱼类细胞伤害作用的动态资料．研究发现，在CBT细胞处理中，1～3d的DNA／酰胺Ⅱ、RNA／酰胺Ⅱ、葡萄糖／磷酸键、葡萄糖／磷脂的比值升高，第4日下降，5～7d值再度上升，第8日再次下降；RNA／DNA的比值1～3d降低，第4日升高，5～7d逐渐减少，第8日又上升．CP细胞DNA／酰胺Ⅱ、RNA／酰胺Ⅱ的值在处理1～3d无明显变化，第4日下降，5～8d又上升；葡萄糖／磷酸键、葡萄糖／磷脂值在0～2d平稳上升，3～7d下降，第8日突然上升；RNA／DNA有1、4、6d的高点和2、8d的低点．两种细胞的RNA／DNA比率与葡萄糖／磷酸键比率都有线性关系．生化物质变化与低温诱发细胞凋亡的过程有相关性．; 朱敏杰俞宏严文静张铭; 关键词：生化组分

低温诱导淡水白鲳尾鳍细胞系早期凋亡被引量：5: 2005年; 淡水白鲳属喜温性鱼类,本文以其尾鳍细胞系CBT为研究材料,探讨低温胁迫(10℃)对细胞的影响。实验采用MTT法测定细胞活力,透射电子显微镜观察超微结构,激光扫描共聚焦显微镜检测磷脂酰丝氨酸(PS)对翻和线粒体膜电位的变化。结果显示:低温处理导致细胞活力和线粒体膜电位显著下降(P<0.01);电镜下可见核质过聚等现象;10℃处理3d,Annexin-V-FITC/PI双染表明87.7%的细胞进入早期凋亡。由此认为,冷胁迫淡水白鲳CBT细胞致死的途径是细胞凋亡。; 严文静陈汉民赵小立俞宏张铭; 关键词：淡水白鲳显微镜检测 FITC 喜温性冷胁迫

低温诱导淡水白鲳尾鳍细胞CBT凋亡的研究: 淡水白鲳属于喜温性鱼类,水温降至10℃时就出现寒害死亡。本实验室在1997年建立了淡水白鲳尾鳍细胞系CBT,发现该细胞系具有与整体相一致的温度生长特性——10℃胁迫致死,这为探讨喜温性鱼类细胞的寒害机理提供了一个较为理想...; 俞宏; 关键词：淡水白鲳细胞凋亡活性氧维生素E; 文献传递

高速锁相环集成电路芯片的设计: 本课题的目标是设计一个高速锁相环的集成电路芯片。锁相环自1932年由De Bellescize提出至今，已经得到了广泛的应用与发展。随着半导体工艺技术的提高与成熟，锁相环电路已经以集成电路芯片的形式应用于诸多的产品中。...; 俞宏; 关键词：集成电路芯片锁相环电路电路结构; 文献传递

分离MEF和ES细胞的差速贴壁法研究(简报)被引量：6: 2006年; 胚胎干细胞的分化控制是胚胎干细胞研究的一个重要方面。由于常规的拟胚体诱导途径是在形成拟胚体后才开始进行诱导分化．受多种胚层的共同作用使得我们无法简便探索诱导分化的机制，而且用这种方法进行的诱导分化试验的结果检测比较困难且不够精确，因此通过单层贴壁诱导途径进行胚胎干细胞的分化研究的报道越来越多。Ying QL and Takahashi T．等使用了一种不经过拟胚体途径的单层ES细胞培养方法，不仅简化了操作步骤，而且能够精确观察到诱导分化的过程。; 徐超黄华荣俞宏赵小立陆永良戴利成姚行; 关键词：饲养层细胞差速贴壁拟胚体

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俞宏