凌晨
- 作品数：17 被引量：77H指数：6
- 供职机构：石河子大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划国家自然科学基金国家大学生创新性实验计划更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 新疆部分地区牛副流感病毒3型的检测与基因分型被引量：5
- 2016年
- 为调查新疆部分地区牛副流感病毒3型（BPIV3）的感染情况,从新疆石河子、奎屯、库尔勒、沙湾、阿克苏地区的5个规模化奶牛场采集1月龄以内犊牛鼻液206份,其中发病犊牛180份,相同日龄健康犊牛46份,通过采用抗原双抗体夹心ELISA的方法检测牛副流感病毒3型抗原,RT-PCR方法检测牛副流感病毒3型g M基因,并挑选不同地区的8株病毒进行序列分析比较其同源性,进行基因分型。结果：ELISA方法检测的感染率仅为2.43%,PCR方法检测的感染率为35.44%;扩增的M基因序列同源性为97.90%,与参考的BPIV3a亚型毒株的同源性为96.4%~99.6%,将其划分为BPIV3a亚型。本研究结果为新疆地区牛副流感病毒3型感染的防治与疫苗研究奠定了基础。
- 倪宏斌剡根强张坤凌晨冯广余宋康
- 关键词：ELISART-PCR基因分型
- 致犊牛脑膜炎大肠杆菌新疆分离株ibeB基因的特性分析被引量：6
- 2016年
- 【目的】分析致犊牛脑膜炎大肠杆菌分离株ibeB基因的分子生物学信息。【方法】以自脑炎死亡犊牛脑组织、肝组织分离鉴定的O161-K99-STa致病性大肠杆菌牛-EN株和牛-EG分离株为材料。根据GenBank中公布的脑膜炎大肠杆菌K1株RS218 ibeB基因序列设计1对引物,采用PCR方法,从分离株中成功克隆ibe B基因,比较分离株ibeB基因与不同来源大肠杆菌ibeB基因的部分生物信息学特性。【结果】分离株ibeB基因序列全长1500 bp,包含1371 bp开放阅读框,共编码457个氨基酸;生物信息学分析显示,牛-EN株与致人脑膜炎大肠杆菌K1 RS218的核苷酸和氨基酸同源性分别为90.5%和96.9%,牛-EG株与大肠杆菌K12的核苷酸和氨基酸同源性分别为99.4%和100.0%;ibeB蛋白为亲水性蛋白,分子质量为50.26 kDa,理论等电点为6.05;该蛋白无跨膜区,但具有信号肽序列;亚细胞定位显示,分泌信号通路位点(SP)占比例为0.939,说明该蛋白属于分泌型蛋白。【结论】从致脑膜炎大肠杆菌分离株中成功克隆ibeB基因,该基因与致人脑膜炎大肠杆菌K1 RS218 ibeB基因有较高的同源性,均有相似的生物学特性,属肠外致病性大肠杆菌。
- 凌晨蒋建军宋康张坤师燕霞冯广余倪宏斌朱玲王鹏雁剡根强
- 关键词：脑膜炎大肠杆菌克隆生物信息学分析
- 新疆部分规模化羊场绵羊肺炎支原体血清学调查被引量：10
- 2017年
- 为调查新疆部分地区规模化羊场绵羊肺炎支原体的感染情况,分别采用绵羊肺炎支原体(MO)、肺炎支原体(MP)双抗体夹心ELISA和间接ELISA检测具有呼吸道症状羔羊血清中的MO/MP抗原抗体,共检测5个地区5个规模化羊场67份发病羔羊血清。结果显示,5个不同地区羊场MO-Ag阳性率为26.66%~100%,MO-Ab阳性率为46.66%~100%,其中3个羊场MO-Ag阳性率为100%,湖羊、小尾寒羊的阳性率(75%~100%)远高于萨福克羊(26.66%);5个不同地区均存在MP感染,MP-Ag阳性率为0~29%,MP-Ab阳性率为19%~58.33%;75%的发病羔羊均存在MO和MP双重感染。调查结果表明,新疆地区规模化羊场普遍存在绵羊肺炎支原体感染,且呈高态势水平,应加强防控措施。本调查结果为新疆地区绵羊传染性胸膜肺炎的防控提供了血清流行病学数据。
- 剡文亮冯广云凌晨李岩王静梅
- 关键词：绵羊肺炎支原体血清学调查ELISA
- 单增李斯特菌新疆分离株lmo0160基因克隆及序列分析被引量：5
- 2017年
- 【目的】单增李斯特菌是一种重要的食源性致病菌,常引起人和动物致病。其细胞壁表面LPXTG基序蛋白在单增李斯特菌致病过程中发挥重要作用,根据参考株全序列预测的41个LPXTG基序蛋白中仍有部分蛋白功能未知。对单增李斯特菌新疆绵羊脑分离株LM90SB2的LPXTG基序蛋白Lmo0160的基因进行克隆及生物信息学分析,为功能验证提供基础。【方法】根据GenBank中收录的lmo0160序列设计特异性引物,利用PCR方法对新疆分离株的lmo0160基因进行扩增,将扩增产物克隆到pMD 19-T载体,进行PCR、双酶切鉴定及序列测定,并对基因核苷酸序列和蛋白序列进行分析。【结果】分离株LM90SB2的lmo0160序列全长为1 708 bp,包含1 428 bp的开放阅读框,共编码475个氨基酸;LM90SB2株lmo0160核苷酸序列与CFSAN008100株(4b型,美国)、CFSAN023463株(4b型,美国)、J2-064株(4b型,美国)、F2365株(4b型,奶酪,美国)和NTSN株(4b型,绵羊脑,中国扬州)相似性为99.0%-99.1%;与M7株(4a型,牛奶,中国浙江)相似性为97.2%,与Finland1998株(1/2a型,美国)、N53-1株(1/2a型,熟火腿,瑞士)、N1546株(1/2a型,鱼,丹麦)和EGD-e株(1/2a型,美国)相似性为87.2%-91.1%;其推导的氨基酸序列与上述菌株相似性为91.8%-99.4%。系统进化树显示,LM90SB2菌株的lmo0160基因与CFSAN023463、F2365和NSTN菌株亲缘关系较近,处于同一分支上,而与标准株EGD-e菌株亲缘关系较远。蛋白质二级结构预测表明,LM90SB2的Lmo0160蛋白为亲水性蛋白,无信号肽,不形成跨膜结构。蛋白结构域预测表明Lmo0160蛋白含有胶原蛋白结合域和Cna B结构域。【结论】克隆了LM90SB2的lmo0160基因,为进一步研究LM90SB2的lmo0160基因功能奠定了基础。
- 张奇文凌晨马勋杜冬冬钱凌霄李红欢
- 关键词：单增李斯特菌克隆生物信息学分析
- 大肠杆菌K1侵袭血脑屏障的研究进展被引量：5
- 2017年
- 大肠杆菌K1株是引起新生儿败血症和脑膜炎的代表菌株,经血液循环进入大脑而致病。大肠杆菌K1黏附、侵袭脑微血管内皮细胞(BMECs)并穿越血脑屏障(BBB)的分子机制一直是众多学者研究探讨的热点。文章重点阐述致脑膜炎大肠杆菌K1穿越BBB的基因调控和信号介导通路,旨在了解致脑膜炎大肠杆菌感染的分子机理,为预防和治疗脑膜炎提供参考。
- 凌晨张奇文宋康蒋建军剡根强
- 关键词：大肠杆菌脑膜炎人脑微血管内皮细胞血脑屏障
- 猪源乳酸杆菌抑制金黄色葡萄球菌黏附仔猪小肠上皮细胞的影响被引量：3
- 2016年
- 为了分析猪源乳酸杆菌对仔猪小肠上皮细胞(ZYM-SIEC-02)的黏附作用以及p H值为4、5、6、7、8、9不同酸性介质下的生长情况,比较竞争、排斥和置换3种不同作用方式下猪源乳酸杆菌对金黄色葡萄球菌黏附仔猪小肠上皮细胞的抑制作用。结果表明:乳酸杆菌黏附仔猪小肠上皮细胞具有浓度效应,在适宜的范围内,随着乳酸杆菌浓度增加,黏附仔猪小肠上皮细胞的作用增强;108CFU/m L菌液黏附能力为(20.02±0.63)CFU/个,其效果较好。不同p H缓冲介质条件下乳酸杆菌黏附仔猪小肠上皮细胞的能力不同,但酸性环境有利于乳酸杆菌黏附仔猪小肠上皮细胞;p H值为4和5时,仔猪小肠上皮细胞黏附乳酸杆菌数量较多,分别为(55.3±0.96)和(59.9±1.26)CFU/个。乳酸杆菌对金黄色葡萄球菌黏附仔猪小肠上皮细胞均具有明显抑制作用,其中排斥作用方式的抑制能力最强(108CFU/m L乳酸杆菌),置换作用方式的抑制能力最弱(106CFU/m L乳酸杆菌)。本研究可为乳酸杆菌作为微生态制剂在兽医临床中的使用提供依据。
- 凌晨宋康王鹏雁蒋建军剡根强
- 关键词：乳酸杆菌金黄色葡萄球菌
- 猪源乳酸杆菌对致病性沙门菌、大肠埃希菌黏附仔猪小肠上皮细胞的影响被引量：7
- 2013年
- 为了通过仔猪小肠上皮细胞(ZYM-SIEC-02)体外培养模型,观察猪源乳酸杆菌对细胞的黏附作用,以及对致病性沙门菌、大肠埃希菌黏附细胞的竞争、排斥和置换作用。采用乳酸杆菌在体外与ZYM-SIEC-02共同孵育镜下观察其黏附效果;乳酸杆菌与致病性沙门菌、大肠埃希菌共同黏附ZYM-SIEC-02观察其黏附竞争性;用乳酸杆菌预处理ZYM-SIEC-02后再加入致病性沙门菌、大肠埃希菌孵育观察其黏附排斥性;用致病性沙门菌、大肠埃希菌预处理ZYM-SIEC-02后再加入乳酸杆菌孵育观察其黏附置换性。结果表明:乳酸杆菌可以黏附ZYM-SIEC-02,具有剂量效应。乳酸杆菌与致病性沙门菌或大肠埃希菌同时加入细胞一起培养时,能竞争性的黏附细胞且黏附抑制率也具有剂量效应。乳酸杆菌预处理细胞后再加入致病菌,高含量乳酸杆菌(1010 mL-1)能使致病菌的黏附率下降。但是,用致病菌预处理细胞后再加入乳酸杆菌,只有高含量的乳酸杆菌可以置换致病菌,而低含量乳酸杆菌却能增加致病菌对细胞的黏附。研究结果为乳酸菌作为微生态制剂用于临床上防治仔猪沙门菌病、大肠埃希菌病,减少食物源性污染和提高食品安全提供试验依据和理论基础。
- 凌晨蒋光邻钱莹宋康马燕王鹏雁蒋建军
- 关键词：乳酸杆菌致病性大肠埃希菌
- 新疆阿克苏地区牛传染性鼻气管炎病毒与牛副流感病毒3型感染的检测被引量：3
- 2018年
- 为调查阿克苏地区是否存在牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)与牛副流感病毒3型(BPIV-3)的感染,从阿克苏两个规模化奶牛场采集1月龄以内可疑发病犊牛鼻液样品18份,采用双抗体夹心ELISA方法检测两种病毒的抗原,PCR方法检测牛传染性鼻气管炎病毒gD基因,RT-PCR方法检测牛副流感病毒3型的gM基因。结果表明,ELISA方法检测IBRV和BPIV-3的感染率分别为22.22%和0%;PCR方法检测IBRV的感染率为72.22%;RT-PCR检测BPIV-3的感染率为44.44%;同时患有两种病毒的检出率为22.22%。说明在阿克苏地区存在IBRV与BPIV-3的感染,且存在两种病毒的双重感染。
- 廉德平倪宏斌凌晨张坤剡根强
- 关键词：牛传染性鼻气管炎病毒ELISAPCRRT-PCR
- 新疆部分地区致犊牛腹泻大肠杆菌的分离鉴定及药物敏感性测定被引量：12
- 2016年
- 为确定新疆石河子、沙湾、阿克苏、博乐4个地区6个规模化牛场初生犊牛腹泻死亡与大肠杆菌的相关性,采集6个规模化牛场因腹泻死亡犊牛的肠系膜淋巴结等病料进行细菌分离鉴定。结果:从60份样品中分离并经生化鉴定获得53株呈β溶血的大肠杆菌;49株携带K99、F41菌毛基因及STa肠毒素基因;10株不同地区来源代表株均能迅速致死小鼠;多数分离株对氨苄西林、阿莫西林、阿莫西林/克拉维酸、头孢噻吩、头孢拉啶、庆大霉素、环丙沙星等耐药,对阿米卡星、头孢西丁等敏感。研究表明,携带K99、F41菌毛及STa的产毒性大肠杆菌是引起这6个牛场初生犊牛腹泻并造成死亡的主要病原之一。
- 宋康王静梅蒋建军凌晨冯广余剡根强
- 关键词：初生犊牛腹泻产肠毒素大肠杆菌药敏试验
- 母猪适时配种技术
- 2013年
- 1 母猪发情鉴定
母猪一般在3～7月龄出现初情期。初情期后，卵巢中有规律地进行卵泡成熟和排卵过程，并具有周期性。1个发情周期在19～23 d之间，常年发情，不受季节限制。一般在饲喂后半小时，用试情公猪多次进行发情检查，根据发情母猪的外部特征判断母猪。常见母猪发情表现详见表1。
- 凌晨杨志远蒋建军
- 关键词：发情母猪配种技术发情鉴定发情周期发情检查发情表现
