刘岩
- 作品数：4 被引量：15H指数：2
- 供职机构：沈阳医学院附属中心医院更多>>
- 发文基金：沈阳市科学技术计划项目辽宁省教育厅科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- LncRNA-HOTAIR调控H3K27me3影响巨噬细胞迁移的机制被引量：1
- 2022年
- 目的观察HOX转录反义RNA(LncRNA-HOTAIR)和组蛋白H3第27位赖氨酸三甲基化(H3K27me3)在氧化低密度脂蛋白(oxLDL)暴露的巨噬细胞模型中的表达,并在基因表观遗传学水平上探讨HOTAIR调控H3K27me3对巨噬细胞迁移的具体机制。方法体外培养RAW264.7巨噬细胞,以oxLDL暴露巨噬细胞制备模型。将细胞分为对照组(A组)、oxLDL组(B组)、巨噬细胞+组蛋白去甲基化酶抑制剂GSKJ4+oxLDL组(C组)、巨噬细胞+组蛋白甲基化酶抑制剂GSK126+oxLDL组(D组)、巨噬细胞+oe-HOTAIR+oxLDL组(E组)、巨噬细胞+pcDNA+oxLDL组(F组)、巨噬细胞+oe-HOTAIR+GSKJ4+oxLDL组(G组)、巨噬细胞+pcDNA+GSKJ4+oxLDL组(H组)、巨噬细胞+oe-HOTAIR+GSK126+oxLDL组(Ⅰ组)、巨噬细胞+pcDNA+GSK126+oxLDL组(J组)。采用Western blotting法分别检测各组细胞中H3K27me3、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)蛋白的表达,采用qPCR法检测各组细胞中HOTAIR表达,采用Transwell法检测各组细胞中巨噬细胞迁移能力。结果(1)与A组相比,B组TNF-α的表达和巨噬细胞迁移增加,HOTAIR和H3K27me3表达降低,且两者呈正相关(P<0.01)。(2)与B组相比,C组H3K27me3表达增加,TNF-α表达降低,巨噬细胞迁移减少(P<0.01),HOTAIR表达无明显变化(P>0.05);与B组相比,D组H3K27me3表达降低,TNF-α表达和巨噬细胞迁移增加(P<0.01),HOTAIR表达无明显变化(P>0.05)。(3)与B组相比,E组HOTAIR、H3K27me3表达增加,TNF-α表达降低,巨噬细胞迁移减少(P<0.01);与B组相比,F组HOTAIR、H3K27me3、TNF-α的表达和巨噬细胞迁移均无明显变化(P>0.05)。(4)与E组相比,G组HOTAIR表达无明显变化(P>0.05),H3K27me3表达增加,TNF-α表达降低,巨噬细胞迁移减少(P<0.01);与G组相比,H组HOTAIR和H3K27me3表达降低,TNF-α表达和巨噬细胞迁移增加(P<0.01);与E组相比,Ⅰ组HOTAIR的表达无明显变化(P>0.05),H3K27me3表达降低,TNF-α的表达和巨噬细胞迁移增加(P<0.01);与Ⅰ组相比,J组HOTAIR和H3K27me3表达降低,TNF-α表达和巨噬细胞迁�
- 刘岩张曼姜朝阳卞姝杜艾家陈鹤
- 关键词：组蛋白甲基化修饰炎症
- 组蛋白去乙酰化酶SIRT1调控氧化低密度脂蛋白诱导巨噬细胞凋亡的表达被引量：2
- 2022年
- 目的观察组蛋白H3赖氨酸残基9乙酰化(H3K9Ac)在氧化低密度脂蛋白(oxLDL)诱导的巨噬细胞凋亡模型中的表达,探讨组蛋白去乙酰化酶———炎症因子沉默信息调节蛋白1(SIRT1)对组蛋白乙酰化的影响,及其通过基因表观遗传学作用,经氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)通路调控巨噬细胞凋亡的机制。方法培养BALB/c小鼠单核巨噬细胞(RAW264.7),并加入oxLDL构建巨噬细胞模型。将细胞分为对照组(加入双蒸水)和实验组(加入50μg/mL oxLDL),分别检测两组细胞凋亡及白细胞介素(IL-6)、SIRT1、H3K9Ac和PPARγ的蛋白表达水平。另外,将实验组细胞分别给予SIRT1兴奋剂(白藜芦醇,终浓度50 nmoL/L)和SIRT1抑制剂(尼克酰胺,终浓度50 nmoL/L),观察SIRT1过表达或抑制对oxLDL诱导巨噬细胞模型中细胞凋亡及SIRT1、H3K9Ac、PPARγ和磷酸化过氧化物酶体增殖物激活受体γ(Ser112位点)[pPPARγ(S112)]的蛋白表达水平的影响。采用Hoechst荧光凋亡染色法检测各组细胞凋亡;采用Western blotting法检测各组细胞IL-6、SIRT1、H3K9Ac、PPARγ和pPPARγ(S112)的蛋白表达。结果①实验组细胞凋亡数(84.88±5.89)高于对照组(7.13±3.31)(P<0.01)。实验组IL-6蛋白相对表达水平(0.50±0.01)高于对照组(0.20±0.02)(P<0.01)。实验组SIRT1蛋白相对表达水平(0.20±0.01)低于对照组(0.30±0.02)(P<0.01)。实验组H3K9Ac蛋白相对表达水平(0.32±0.02)高于对照组(0.22±0.02)(P<0.01)。实验组PPARγ蛋白相对表达水平(0.11±0.02)低于对照组(0.20±0.03)(P<0.01)。②SIRT1兴奋剂组细胞凋亡数(28.63±6.44)低于实验组(84.88±5.89)(P<0.01);SIRT1抑制剂组细胞凋亡数(266.88±35.10)高于实验组(84.88±5.89)(P<0.01)。SIRT1兴奋剂组SIRT1蛋白相对表达水平(0.27±0.03)高于实验组(0.20±0.01)(P<0.01);SIRT1抑制剂组SIRT1蛋白相对表达水平(0.10±0.01)低于实验组(0.20±0.01)(P<0.01)。SIRT1兴奋剂组H3K9Ac蛋白相对表达水平(0.21±0.02)低于实验组(0.
- 李卉姜朝阳刘岩张曼
- 关键词：组蛋白组蛋白去乙酰化酶乙酰化修饰
- rhBNP对内毒素介导的犬急性肾损伤的保护作用被引量：10
- 2014年
- 目的：观察重组人脑利钠肽（recombinant human brain natriuretic peptide，rhBNP）对犬急性肾损伤的保护作用，探讨rhBNP对内毒素介导的犬急性肾损伤血清HMGB1水平的影响。方法20只健康成年犬随机均分为4组（n＝5）：空白对照组，脓毒症组、低剂量干预组和高剂量干预组。除空白组外的15只健康成年犬静脉注射脂多糖建立脓毒症休克模型。脓毒症组和空白组不给予rhBNP处理，低剂量干预组和高剂量干预组分别给予5μg/kg、10μg/kg rhBNP处理。观察各组犬于0、2、4、8、12 h时的外周血管阻力（systemic vascular resistance index，SVRI），并在以上各时间点留取适量外周静脉血用于检测血清高迁移率族蛋白-1（high mobility group box-1，HMGB-1）的水平和肌酐值（creatinine values，CR），于12 h后处死动物并留取肾脏标本用于组织病理学观察。结果①光镜下观察脓毒症组肾小管上皮细胞肿胀、出现管型，间质细胞肿胀，肾脏组织病理评分为3分；低剂量干预组与高剂量干预组上述改变明显减轻，但2者镜下观察差异不显著，肾脏组织病理评分均为1～2分。②与同时间点脓毒症组相比，低剂量干预组在8、12 h时血清CR水平显著降低（P＜0.01），高剂量干预组血清CR水平在4 h、8 h、12 h时显著降低（P＜0.01）；高剂量干预组与低剂量干预组相比，血清CR水平在4 h、8 h、12 h时均有显著性差异（P＜0.05）。③与同时间点脓毒症组比较，低剂量干预组在2 h时SVRI显著降低（P＜0.01），高剂量干预组在2 h、4 h时SVRI显著降低（P＜0.01）；高剂量干预组与低剂量干预组相比，SVRI于4 h时差异有统计学意义（P＜0.05）。④与同时间点脓毒症组相比，低剂量干预组与高剂量干预组犬血清HMGB-1水平均显著降低（P＜0.01）；高剂量干预组与同时间点低剂量干预组比较，血清HMGB-1水平显著性减少（P＜0.05）。结论
- 李牧刘岩李辉
- 关键词：脓毒症急性肾损伤重组人脑利钠肽高迁移率族蛋白
- 环脂蛋白20调控组蛋白H2B泛素化经NF-κB信号通路对巨噬细胞迁移的影响被引量：2
- 2022年
- 目的探讨环指蛋白20(RNF20)调控组蛋白H2B泛素化(H2Bub)经核因子-κB(NF-κB)途径对巨噬细胞迁移的影响。方法将培养好的巨噬细胞分为7组,A组(对照组):培养48 h;B组(ox-LDL刺激组):50 mg/mL oxLDL刺激巨噬细胞48 h;C组(ox-LDL+oe-RNF20转染组):oe-RNF20转染巨噬细胞后用50 mg/mL ox-LDL刺激48 h;D组(ox-LDL+pcDNA转染对照组):pcDNA转染巨噬细胞后用50 mg/mL ox-LDL刺激48 h;E组(ox-LDL+SN50干预组):50 mg/mL ox-LDL刺激巨噬细胞24 h后再给予10μg/mL的SN50处理24 h,共干预48 h;F组(ox-LDL+LY294002干预组):50 mg/mL ox-LDL刺激巨噬细胞24 h后再给予10μg/mL的LY294002处理24 h,共干预48 h;G组(ox-LDL+p38干预组):50 mg/mL ox-LDL刺激24 h后再给予10μg/mL的p38,共干预48 h。采用Transwell法观察巨噬细胞迁移数量,Western blotting法检测RNF20、H2B、H2Bub、NF-κB及白细胞介素6(IL-6)表达。结果在oxLDL刺激的巨噬细胞中,与A组比较,B组RNF20蛋白表达、H2Bub/H2B降低,巨噬细胞迁移数量增多,NF-κB和IL-6蛋白表达增加(P均<0.01)。在RNF20过表达细胞模型中,与B组比较,C组RNF20蛋白表达、H2Bub/H2B增加,NF-κB、IL-6蛋白表达减少,巨噬细胞迁移数量减少(P均<0.01);D组RNF20蛋白表达、H2Bub/H2B、NF-κB、IL-6无明显改变,巨噬细胞迁移数量无明显改变(P均>0.05)。给予SN50(NF-κB抑制剂)、SB203580(p38抑制剂)和LY294002(PI3K抑制剂)处理巨噬细胞后,与B组比较,E、F、G组RNF20蛋白表达、H2Bub/H2B无明显改变(P均>0.05);E组NF-κB、IL-6蛋白表达及巨噬细胞迁移数量减少(P均<0.01);F、G组NF-κB、IL-6蛋白表达及巨噬细胞迁移数量无明显改变(P均>0.05)。结论RNF20减少,H2Bub减少,加剧巨噬细胞迁移及炎症反应,促进了动脉粥样硬化的形成,此过程经NF-κB信号通路起作用。
- 卞姝张曼刘岩姜朝阳陈红
