刘建兵
- 作品数：16 被引量：24H指数：3
- 供职机构：山西医科大学基础医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金北京市自然科学基金国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学更多>>
- ROS调控MMPs对子宫内膜崩解的作用被引量：2
- 2015年
- 子宫内膜周期性的剥脱是高等灵长类动物特有的生理现象。活性氧(ROS)在女性生殖系统的生理过程具有重要的作用。本研究的目的是试图弄清ROS是否对子宫内膜的剥脱起作用以及通过调控金属基质蛋白酶(MMPs)起作用。本研究采用雌性C57小鼠去势,序惯性地给予雌孕激素模拟增殖期和分泌期,花生油注射至宫腔以人工诱导蜕膜化,将孕酮皮埋管移除以造成孕酮的撤退,建立小鼠月经样模型,并在孕酮撤退前1 h、3 h和7 h给予抗氧化剂NAC消除ROS;利用大体和组织形态学方法检测子宫内膜的状态,显示350 mg/kg NAC能够抑制子宫内膜的剥脱;利用Western方法检测ROS在月经发生过程中对MMP-2、MMP-9和MMP-13的调控作用,显示NAC处理组与对照组比,NAC能够抑制MMP-9在24 h的表达,也能够抑制MMP-13在16 h和24 h的表达,但并不能抑制MMP-2在16 h和24 h的表达。因此,ROS在小鼠月经样模型中通过调控MMPs特别是MMP-9和MMP-13对子宫内膜的崩解起至关重要的作用。
- 刘书言武斌陈西华王树芳刘建兵王介东贺斌徐祥波
- 关键词：剥脱金属基质蛋白酶
- ESR1和 PRKN基因甲基化在多囊卵巢综合征发病中的作用及机制研究
- 2023年
- 目的探讨ESR1和PRKN基因甲基化水平与多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)发生的关系及其机制。方法采用病例对照研究,选取2021年1月至2021年6月期间在山西医科大学第一医院生殖医学科就诊的60例PCOS患者(PCOS组)及40例正常育龄妇女(对照组)为研究对象,提取全血DNA及总RNA,采用甲基化特异性聚合酶链反应(methylation specific polymerase chain reaction,MS-PCR)技术检测研究对象外周血ESR1和PRKN基因启动子区的甲基化状态,并采用实时荧光定量PCR检测ESR1和PRKN基因mRNA表达水平,分析ESR1和PRKN基因启动子区甲基化状态和mRNA表达水平与PCOS发生的关系。结果 PCOS组患者外周血ESR1基因启动子区甲基化水平[56.7%(34/60)]显著低于对照组[77.5%(31/40),P=0.035];PRKN基因启动子区甲基化水平[76.7%(46/60)]显著高于对照组[52.5%(21/40),P=0.012]。PCOS组患者外周血ESR1 mRNA表达水平(1.30±0.93)显著高于对照组(0.97±0.50,P=0.034);PCOS组患者的PRKN mRNA表达水平(1.06±0.83)与对照组相比差异无统计学意义(1.15±1.01,P>0.05)。结论 PCOS患者ESR1和PRKN基因甲基化水平改变导致其表达水平改变,进而在PCOS的发生中发挥了重要作用。
- 王淇蓉昝志芳段毓杨恺刘建兵杜根来李莉
- 关键词：甲基化多囊卵巢综合征
- 环氧合酶在小鼠子宫内膜崩解过程中的定位被引量：2
- 2015年
- 环氧合酶(cyclooxygenase,COX)是生物体内参与催化前列腺素生成的一种关键酶,虽然COX有COX-1和COX-2两种同工酶的形式,但这两种同工酶催化底物、抑制剂、组织和细胞内定位以及生理功能有较大差异。本研究利用小鼠生理性孕酮撤退月经模型,通过免疫组化的方法研究COX-1和COX-2在月经期子宫内膜崩解过程中的定位。免疫组化结果显示,两种蛋白质都定位于子宫腔上皮及其附近和内膜崩解区域,且COX-2在子宫内膜蜕膜化区域与基底层分离的外周也有表达,提示COX在参与子宫内膜崩解出血起到一定的作用。
- 赵皓琦曹惠子陈西华王树芳刘建兵李云峰贺斌王介东刘书言徐祥波
- ROS对子宫内膜崩解的作用
- 2015年
- 为探讨ROS在小鼠月经样模型中的作用,将雌性C57小鼠去势,序惯性的给予雌二醇(E2)或孕酮(P4),模拟增殖期和分泌期,花生油注射至宫腔以人工诱导蜕膜化,将孕酮皮埋管移除以造成孕酮的撤退,建立小鼠月经样模型,并在孕酮撤退前1、3、7h给予抗氧化剂NAC消除ROS,利用大体变化、阴道细胞学涂片和组织形态学方法检测子宫的状态,并利用氮蓝四唑(NBT)染色的组织超氧阴离子色度法检测ROS的含量,以研究ROS在月经发生过程中对子宫内膜崩解的作用。阴道细胞学涂片显示,350 mg/kg和500mg/kg NAC能够抑制子宫内膜的出血,而200mg/kg NAC则不能,子宫大体和组织形态学结果显示,350mg/kg和500mg/kg NAC能够抑制子宫内膜的崩解,而200mg/kg NAC则不能,同时,350mg/kg和500mg/kg NAC能够显著抑制ROS的产生,而200mg/kg NAC则没有。说明350mg/kg是抑制子宫内膜崩解的合适剂量,且ROS对子宫内膜的崩解起至关重要的作用。
- 刘书言武斌陈西华贺斌王树芳刘建兵徐祥波王介东
- 关键词：子宫内膜崩解活性氧小鼠
- miR-205在宫颈鳞癌中的表达及其对癌细胞迁移、侵袭能力的影响被引量：4
- 2022年
- 目的筛选宫颈癌中差异表达的微小RNA(miRNA,miR),探讨关键miRNA对宫颈癌发生发展的作用及其机制。方法采用生物信息学方法分析并以差异倍数>2.5及P<0.01为条件筛选宫颈鳞癌中差异表达的miRNA;采用原位杂交和qRT-PCR分别检测miR-205及白细胞介素(IL)-32的表达;采用CCK-8法检测细胞增殖活力;应用Transwell模型评价细胞迁移及侵袭能力;利用Western blotting检测侵袭相关基质金属蛋白酶(MMP)-2及MMP-9蛋白的表达量。结果生物信息学分析获得宫颈鳞癌中差异表达的miRNA 106个,其中70个上调,36个下调;其中miR-205的表达量变化最大。原位杂交及qRT-PCR结果表明,miR-205在宫颈鳞癌细胞中的表达量明显高于癌旁组织(P<0.05)。miR-205可明显提升宫颈癌细胞的增殖、迁移及侵袭能力(P<0.05)。在宫颈癌细胞系HeLa及SiHa细胞中,过表达miR-205可增强IL-32的表达,降低miR-205表达则可抑制IL-32的表达(P<0.05)。荧光素酶报告基因检测结果显示,miR-205可与IL-32启动子作用提高靶基因的表达量(P<0.05);降低miR-205及IL-32表达均可抑制细胞的侵袭能力(P<0.05);IL-32表达降低能明显抑制侵袭相关蛋白MMP-2及MMP-9的表达(P<0.05)。结论宫颈鳞癌中miR-205表达量明显增高,可能通过上调IL-32的表达促进MMP-2及MMP-9的表达,最终促进宫颈癌细胞的增殖、迁移及侵袭。
- 刘建兵刘建兵李文龙王伟王伟崔小华崔小华李莉李莉
- 关键词：宫颈肿瘤细胞增殖细胞侵袭细胞运动
- HIF1A与VEGF在小鼠月经样模型的表达与共定位被引量：3
- 2017年
- 目的在小鼠月经模型基础上,研究低氧诱导因子(HIF1A)与血管内皮生长因子(VEGF)蛋白及mRNA的表达与定位,探索HIF1A与VEGF在月经发生中可能的调控机制。方法建立小鼠月经样模型,假孕小鼠通过花生油子宫腔注射的方法诱导小鼠子宫内膜发生蜕膜化,切除卵巢致孕酮(P4)撤退以模拟月经的发生。在P4撤退后0、8、12、16、24h分别收集小鼠子宫;利用免疫组化与Western blot方法检测HIF1A、VEGF的定位与表达量,利用Real-time PCR检测二者mRNA相对表达量;分析HIF1A与VEGF的表达变化趋势与相关性。结果 P4撤退后,小鼠子宫内膜发生崩解出血,模拟月经发生。免疫组化结果显示,HIF1A蛋白在P4撤退后12、16h,内膜基质蜕膜细胞核中的表达量逐渐升高;HIF1A表达区域与VEGF表达的区域均集中在子宫内膜蜕膜化区域外周,即崩解组织与基底层交界区域。Western blot蛋白定量结果显示,细胞核中HIF1A蛋白表达量在P4撤退后8、12、16h显著增高,VEGF在细胞质中的表达量在P4撤退后0、8、12h较高。HIF1A与VEGF mRNA的表达变化趋势非常相似,即P4撤退后,逐渐升高,在12h达到峰值,随后逐渐下降。结论结果提示月经发生子宫内膜崩解中,HIF1A转录因子功能激活并调节VEGF mRNA的表达。
- 庄太凤陈西华贺斌陆超刘建兵王树芳周芳郭士格南楠王介东徐祥波
- 关键词：VEGF子宫内膜
- 子宫内膜癌中的lncRNA-miRNA-mRNA ceRNA网络的整合分析被引量：6
- 2021年
- 子宫内膜癌(uterine corpus endometrial carcinoma, UCEC)是危害女性健康的癌症之一,但其发生发展机制尚不完全清楚。基因的异常表达在细胞癌变过程中发挥着重要的作用。本研究利用生物信息学方法对UCEC中异常表达的基因进行网络调控分析,为UCEC的机制研究及预后治疗提供理论依据。首先,利用"limma"包筛选得到差异表达的RNA分子;接着,利用R软件中的"GDCRNATools"包构建lncRNA-miRNA-mRNAceRNA网络;最后,利用DAVID(TheDatabasefor Annotation,Visualization and Integrated Discovery)、R软件中的"survival"包、MCODE(Molecular COmplex Detection)插件、StarBase数据库等对ceRNA网络中的RNA分子进行综合分析。结果显示,在UCEC中,我们鉴定了1 319个mRNA、68个lncRNA及100个miRNA为差异表达的RNA分子。同时,利用这些UCEC中的差异表达RNA分子,成功构建了ceRNA网络,结果表明,HCG11、LINC00958、LINC00667、MAGI2-AS3和AC093010.3可能具有ceRNA的功能。通过进一步对该网络成员的分析,结果发现,该网络中的mRNA分子聚集于内皮细胞增殖、细胞骨架和锌离子结合负调控等生物学过程中。生存分析显示,hsa-miR-449a、LINC00958、PKIA和DPYSL2等19个差异表达的RNA分子与UCEC患者预后显著相关。最后,利用MCODE插件对ceRNA网络进行筛选,共获得一个子网络,其成员分别是LINC00667、hsa-miR-449a、hsa-miR-34a-5p和RECK。该研究结果提示,在UCEC的发生发展中存在lncRNA、miRNA和mRNA的差异表达,并且这些RNA分子之间存在ceRNA网络模式的调控,其中一些关键分子与患者的预后相关,这将为进一步研究与理解UCEC的发病机制及预后提供理论依据。
- 李文龙林晓雨李小文郝建卿崔小华刘建兵李莉
- 关键词：子宫内膜癌预后
- 宫颈鳞癌预后相关lncRNA-miRNA-mRNA ceRNA网络构建与分析
- 2023年
- 目的拟筛选宫颈鳞癌预后相关的miRNAs分子并探索其可能的作用机制,为改善宫颈鳞癌预后提供实验依据。方法通过生物信息学方法比较分析宫颈鳞癌患者和正常对照的基因表达情况,获得差异表达的miRNA;然后进行生存分析,找到与预后相关的关键miRNA;最后通过构建lncRNA-miRNA-mRNA竞争性内源RNA(ceRNA)网络及基因本体论(GO)和京都基因和基因组百科全书(KEGG)分析,探索预后相关的ceRNA网络。结果共获得宫颈鳞癌中差异表达的miRNA 106个,其中,9个miRNAs(hsa-miR-425-5p、hsa-miR-145-3p、hsa-miR-1307-3p、hsa-miR-200c-3p、hsa-miR-142-5p、hsa-miR-145-5p、hsa-miR-155-5p、hsa-miR-210-5p、hsa-miR-142-3p)与预后显著相关。成功构建了一个宫颈鳞癌预后相关的ceRNA网络,其中包括5个miRNA节点、132个mRNA节点、44个lncRNA节点和181条边。最后,GO和KEGG分析显示该网络主要涉及蛋白结合、生长因子结合、转录因子的活化、DNA特异序列的结合等功能,主要参与环磷酸鸟苷酸-蛋白激酶(cGMP-PK)G、腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)、叉头框蛋白(Fox)O信号通路等的调节。结论hsa-miR-425-5p等9个miRNAs与宫颈鳞癌预后显著相关,并可能通过lncRNA-miRNA-mRNA ceRNA网络的方式参与预后调控,为宫颈鳞癌预后相关机制研究提供新思路。
- 刘建兵刘建兵王伟王伟李莉
- 关键词：宫颈鳞癌MIRNA
- 肿瘤坏死因子在小鼠药理性孕酮撤退月经样模型中的定位和表达
- 2013年
- 目的在药理性撤退小鼠月经样模型中,观察孕酮撤退后,肿瘤坏死因子(TNF-α)的定位和表达情况。方法卵巢切除的小鼠在诱导蜕膜化之后给予米非司酮即通过拮抗孕酮受体的方法(药理性撤退),导致孕酮撤退,并用免疫组化的方法观察米非司酮处理的不同时相,TNF-α在小鼠子宫内膜的定位;用实时PCR的方法观察TNF-α表达情况。结果免疫组化结果显示米非司酮处理后0～8 h,TNF-α主要存在于腔周围的血管内皮细胞;12～16 h,主要存在于内流的白细胞;24～48 h,主要存在于崩解组织边缘的间质细胞区域和修复好腺上皮细胞周围的间质细胞。实时PCR结果显示TNF-αmRNA在孕酮撤退后24 h内都有表达,并且TNF-α表达量逐渐增高,在12 h、16 h达到峰值。结论在此小鼠月经样模型中,米非司酮处理即孕酮撤退后TNF-α在此模型子宫中定位呈区域性分布,并诱导TNF-α表达升高,可能参与了子宫内膜的崩解。
- 李云峰陈西华徐丙元刘建兵张树成贺斌徐祥波王介东
- 关键词：肿瘤坏死因子-Α
- 2016至2017年度国家自然科学基金生殖系统／围生医学／新生儿领域项目申请与资助情况分析被引量：3
- 2017年
- 国家自然科学基金“生殖系统／围生医学／新生儿”领域（申请代码H04）主要资助围绕生殖系统结构功能与发育异常、损伤与修复、炎症与感染，生殖内分泌异常及相关疾病，生殖系统遗传性疾病，各种生殖系统相关的非肿瘤性疾病，生殖细胞发生与受精，胚胎着床及胎儿发育、产前诊断，胎盘结构、功能及发育异常，妊娠及妊娠相关性疾病，新生儿相关疾病，乳腺结构、功能及发育异常，避孕、节育与妊娠终止，女性不孕不育与辅助生殖，
- 张弘张弘吕群燕
- 关键词：国家自然科学基金生殖系统围生医学新生儿发育异常非肿瘤性疾病
