刘永梅
- 作品数：25 被引量：124H指数：6
- 供职机构：军事医学科学院实验动物中心更多>>
- 发文基金：国家科技部专项基金北京市科委公益应用项目国家科技基础条件平台建设计划更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- 普通级啮齿类实验动物部分细菌携带情况的初步调查被引量：3
- 2001年
- 了解在实际生产中常用普通级啮齿类实验动物中清洁级规定排除的 4种主要细菌 (沙门菌、鼠棒状杆菌、嗜肺巴斯德杆菌、支气管败血性鲍特菌 )的携带状况 ,以及验证筛选的实验动物细菌检测常用普通培养基和生化培养基的应用效果。方法 无菌采集动物气管分泌物 ,接种血平皿 ;采集回盲部内容物接种DHL、SS琼脂平皿 ,37℃ 48h后挑取可疑菌落进行纯化 ,取纯培养物进行染色镜检、生化特性鉴定及血清学反应。结论 KM小鼠嗜肺巴斯德杆菌阳性率最高 ,为 6 0 % ;豚鼠携带支气管败血性鲍特菌 ,阳性率为 30 % ;总的细菌检出率为 2 0 % (其中嗜肺巴斯德杆菌总阳性率为 16 2 5 % ,支气管败血性鲍特菌总阳性率为 3 75 % ) ;选出的培养基应用于实验检测中是可行的。
- 范薇隋丽华刘永梅田克恭贺争鸣
- 关键词：细胞学检测
- 实验动物细菌检测常用生化培养基的筛选及应用被引量：1
- 2001年
- 目的 通过选择目前几个培养基生产厂家的几种常用生化培养基 ,利用已知标准菌株进行对比、优选 ,并提出应用时的一些注意事项 ,最终确定适合于实验动物细菌检测用的生化培养基。方法 将标准菌株接种血琼脂 ,取菌苔分别接种克氏双糖铁琼脂、硝酸盐培养基、尿素培养基、蛋白胨水、明胶液化培养基 ,37℃培养 ,观察结果。结果 鼠棒状杆菌和嗜肺巴斯德杆菌在各厂家的克氏双糖铁培养基上反应结果有较大差异 ;沙门菌在北京市双旋微生物培养基制品厂的尿素培养基上有淡淡的红色 (阳性 ) ,影响了实验结果的判断 ;中国药品生物制品检定所的硝酸盐培养基的试验管和空白对照管均为阳性 ,实验结果无法判断 ;微量生化反应管与干粉培养基的效果一样。结论 各厂家生化培养基的质量有待进一步提高 ,以杭州市天河微生物试剂有限公司生产的生化培养基质量相对较好。在实际应用中 ,可参照本研究的结果 ,结合本实验室的使用情况选择使用。
- 范薇隋丽华刘永梅田克恭贺争鸣
- 关键词：细菌检测生化实验动物培养基质标准菌株沙门菌
- 犬瘟热病毒核衣壳蛋白基因片段的克隆和表达被引量：6
- 2002年
- 目的 构建pMal N重组表达载体 ,转化E .coliDH5α ,诱导表达犬瘟热病毒 (CDV)重组核衣壳 (N)蛋白。方法 采用RT PCR技术 ,从CDVRNA中扩增编码N蛋白的基因片段 ,通过连接反应 ,构建重组克隆载体和重组表达载体 ,转化感受态。E .coliDH5α细胞。通过IPTG诱导表达CDV重组N蛋白。结果 扩增出约 1 7kbCDV全长的主要结构蛋白N蛋白基因 ,通过PCR获得 5 36bpN蛋白基因片段。将N蛋白基因片段克隆入原核表达载体pMal C2 ,表达产物麦芽糖结合蛋白 (MAP)与N蛋白的融合蛋白的相对分子质量约 6 0× 10 3,与预期大小一致。结论 构建的pMal N重组载体所表达的CDVN蛋白为进一步研究CDV的特异。
- 杨敬范薇隋丽华李俊梅刘永梅李文龙陈振文
- 关键词：犬瘟热病毒核衣壳蛋白基因片段克隆
- 实验动物微生物、寄生虫抽样调查及分析被引量：19
- 2008年
- 目的监控实验动物微生物、寄生虫质量。方法细菌检测:常规培养、生化鉴定,免疫荧光试验(IFA)查抗体。病毒检测:酶联免疫吸附试验(ELISA)、免疫酶试验(IEA)、免疫荧光试验(IFA)、血凝试验(HA)、血凝抑制试验(HAI)方法检测抗体。真菌检测:常规培养、镜检。寄生虫检测:涂片镜检、间接血凝试验(IHA)方法查抗体。结果五年来,SPF级动物检出了绿脓杆菌、嗜肺巴斯德菌、金黄色葡萄球菌、鞭毛虫,另外,泰泽病原体、小鼠细小病毒(MVM)、小鼠仙台病毒(M-SV)抗体阳性。清洁级动物检出了蠕虫,且泰泽病原体、大鼠仙台病毒(R-SV)、小鼠仙台病毒(M-SV)、小鼠肝炎病毒(MHV)抗体阳性。普通级动物检出了志贺菌、皮肤病原真菌、体外寄生虫、弓形虫,同时检出兔出血症病毒(RHDV)、犬细小病毒(CPV)、犬瘟热病毒(CDV)、犬肝炎病毒(ICHV)未达抗体保护效价,犬布鲁杆菌、猕猴疱疹病毒Ⅰ型(BV)抗体阳性。不同生产企业动物质量差异很大,有的动物合格率达100%,有的则同一动物有多种病原感染。结论实验动物微生物、寄生虫质量控制有待加强。
- 隋丽华范薇杨敬耿志贤时彦胜邱业峰吴娜刘永梅李俊梅王冬平叶华虎张小飞曾林
- 关键词：实验动物微生物寄生虫
- 犬实验感染CDV的病理学研究被引量：27
- 1998年
- 对实验感染犬瘟热病毒的病犬进行了系统的病理学观察，并用酶标ＳＰＡ法对病犬脏器组织中ＣＤＶ抗原进行了定位检查。结果表明，淋巴系统各器官组织是ＣＤＶ急性感染早期首先侵犯的靶器官。脏器组织的病理改变与ＣＤＶ抗原检出呈正相关。脏器组织中包涵体的检出与形态结构具有一定的特征性和示病意义，但采用免疫组化方法检查ＣＤＶ抗原，更具优越性。作者认为，ＣＤＶ９３０３９株和ＣＤＶ９３０４１株是致病力很强的泛嗜性ＣＤＶ。
- 遇秀玲田克恭吴娜隋丽华李俊梅刘永梅渠川玫
- 关键词：犬瘟热病毒免疫组化检查病理学
- 从病兔分离的支气管败血波氏杆菌的特性被引量：3
- 1996年
- 从病兔分离的支气管败血波氏杆菌的特性田克恭，隋丽华，遇秀玲，吴娜，刘永梅军事医学科学院实验动物中心（北京１０００７１）１９９５年春季，实验兔场发生以呼吸道症状为主的疾病，经细菌学鉴定证实为支气管败血波氏杆菌感染。现将该菌的致病特点和培养特性叙述如下。...
- 田克恭隋丽华遇秀玲吴娜刘永梅
- 关键词：支气管疾病
- 犬α干扰素基因的密码子优化及高效表达被引量：1
- 2008年
- 根据密码子优化原则,利用重组PCR方法扩增犬α干扰素基因,将测序正确的基因分别克隆于三种原核表达载体pET22b（＋）、pET24b（＋）和pET28b（＋）中。再将重组质粒转入大肠杆菌BL21（DE3）中进行诱导表达,SDS-PAGE和Western blot分析表明,目的蛋白主要以包涵体形式表达,大小约为25 kDa;其中,pET22b（＋）载体的表达量较高,约占总蛋白的50%-60%。
- 张小飞叶华虎隋丽华陈旖刘永梅曾林
- 关键词：原核表达重组干扰素
- 接种CPV疫苗犬抗体水平的动态观察被引量：1
- 1993年
- 在用 Galaxy-6 MHP-六联疫苗免疫接种的23只比格幼犬中,有18只(78.3%)能产生抵抗 CPV 感染的抗体;母源抗体水平≥1:10对抗体的产生有干扰作用;第二次免疫时抗体水平≤1:10,才能在免疫后产生持续≥1(?)80效价的抗体;第三次免疫与第二次免疫间隔5周,效果较好。
- 田克恭李砚忠康冬柳渠川玫彭传贵刘永梅
- 关键词：犬病犬细小病毒抗体
- 埃希氏大肠杆菌移行犬肺引起死亡
- 2001年
- 北京某饲养场的幼犬成窝死亡 ,以呼吸道症状为主 ,从多处脏器分离出致病菌一株 ,根据细菌鉴定结果 ,结合临床表现和病理观察 ,证实送检犬因埃希氏大肠杆菌移位引起大叶性肺炎是导致死亡的主要原因 ,同时伴有肠道反应。药敏结果可见 ,本菌对大部分抗生素产生耐药 ,说明滥用抗生素引起机体功能紊乱 ,抵抗力下降 ,致使正常菌群移位 ,是导致感染的主要原因。通过动物试验 ,腹腔注射此株埃希氏大肠杆菌 ,可导致小鼠菌血症、败血症而死亡 ,而持续一周食入本菌 ,不但不致病 ,且能增强体质 ,可考虑用作饲喂微生态制剂。
- 隋丽华田克恭遇秀玲范微吴娜杨敬刘永梅
- 关键词：埃希氏大肠杆菌肺部感染
- 猕猴群及新引入猕猴群志贺菌分布情况及药物敏感性调查被引量：2
- 2007年
- 目的对原有猴群及新引入猴群进行志贺菌带菌情况及抗生素敏感性调查。方法采用国标(GB/T14926.47-2001)的检测方法,对1 149份猕猴粪便样品进行细菌分离、鉴定及药敏实验。结果原猴群感染率比引入猴群高2.75%,且两组均以B群志贺菌感染为主;原猴群D群感染率也较高,而新引入猴群无D群感染,C群感染率较高。药物敏感性试验,原猴群感染菌对头孢噻肟、头孢唑啉较敏感,但高敏菌株并不多,绝大多数菌株耐药;新引入猴群感染菌对头孢曲松、头孢噻肟、痢特灵、头孢哌酮较为敏感,且高敏感率较原猴群高。结论由于引入新的猴群,志贺菌的分型较复杂,且综合药物敏感性较差。此试验为动物生产及防病治病提供了依据。
- 隋丽华范薇杨敬洪宝庆刘永梅
- 关键词：猕猴志贺菌药物敏感性
