刘秀财
- 作品数：33 被引量：66H指数：5
- 供职机构：齐齐哈尔医学院更多>>
- 发文基金：黑龙江省教育厅科学技术研究项目齐齐哈尔市科技局指导项目齐齐哈尔市科学技术计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学农业科学更多>>
- 蛋白激酶SGK3基因的克隆及其在乳腺癌细胞中的表达被引量：5
- 2015年
- 目的探讨通过克隆蛋白激酶(SGK)3基因并将其转染乳腺癌MCF-7细胞建立高表达SGK3的MCF-7细胞系的稳态性。方法利用真核表达载体N-端增强型绿色荧光蛋白(p EGFP-N1)通过基因克隆技术构建重组质粒,通过菌落PCR和DNA测序方法对重组质粒进行鉴定。通过PEI介导将重组质粒p EGFP-N1-SGK3转染至乳腺癌MCF-7细胞中,荧光显微镜和Western印迹方法对基因转染效率以及融合蛋白GFP-SGK3的表达进行鉴定。结果成功构建了真核表达质粒,将其命名为p EGFP-N1-SGK3;在荧光显微镜下可见多数细胞发出绿色荧光,表明获得了较高的转染效率;Western印迹结果显示,在转染p EGFP-N1-SGK3的细胞中可见阳性条带,而MCF-7亲本细胞和转染空载体的对照组细胞无阳性条带。结论成功构建了重组质粒p EGFP-N1-SGK3,获得了稳定表达融合蛋白GFP-SGK3的MCF-7细胞系,可用于后续SGK3细胞内功能的研究。
- 郭红艳孙晓杰李淑艳刘秀财刘波王宏兰蒋瑞雪
- 关键词：基因克隆乳腺癌
- 中药材挥发油含量与提取时间相关性研究被引量：1
- 2014年
- 目的:探讨不同中药材挥发油含量与提取时间及出油高峰的相关性。方法:采用水蒸气蒸馏技术对12种中药挥发油含量进行提取,并研究其提取时间及出油高峰的关系。结果:12种中药中八角茴香的挥发油含量最高,木香和佛手的含量最低;丁香挥发油的提取时间最长,苍术的最短;丁香的出油高峰持续时间最长,而佛手的最短。结论:水蒸气蒸馏技术是一种提取中药材挥发油的主要方式,通过对花椒等12种中药材挥发油提取的实验研究,发现不同中药材挥发油的含量及提取时间差异较大,其含量与提取时间无绝对相关性。
- 刘继鑫刘伯阳刘秀财孙艳孙艳宏郭家张浩
- 关键词：中药挥发油水蒸气蒸馏
- 血清糖皮质激素调节蛋白激酶3过表达对乳腺癌细胞凋亡的影响被引量：5
- 2012年
- 目的探讨血清糖皮质激素调节蛋白激酶3(SGK3)基因过表达对乳腺癌细胞凋亡的影响。方法构建pEGFP-N1-SGK3重组质粒,用载体质粒pEGFP-N1和重组质粒pEGFP-N1-SGK3转染乳腺癌MCF7细胞;MTT法观察转染细胞的增殖情况,流式细胞术分析细胞凋亡情况,RT-PCR检测凋亡相关基因表达。结果利用pEGFP-N1-SGK3质粒转染乳腺癌MCF7细胞,建立表达SGK3蛋白的细胞系;通过细胞增殖实验发现,SGK3的过表达可促进MCF7细胞增殖;流式细胞术分析显示,外源性SGK3可抑制MCF7细胞凋亡的发生,并影响凋亡相关基因bad、bcl-xl的表达。结论 SGK3的过表达可抑制乳腺癌MCF7细胞凋亡。
- 郭红艳孙晓杰刘秀财樊丽于英君
- 关键词：乳腺癌细胞凋亡
- 丙型肝炎病毒核心蛋白在大肠埃希菌中的表达及其纯化
- 2008年
- 目的建立稳定表达丙型肝炎病毒(HCV)核心蛋白的原核表达系统,获得高产量的纯化核心蛋白。方法以HCV株全长cDNA序列为模板,PCR扩增获得核心蛋白基因,构建原核表达载体pET-32a(+)-HCV-Core。转化大肠埃希菌DH5α,提取质粒,验证正确后,再次转化大肠埃希菌BL21中,IPTG诱导表达,SDS-PAGE、Westernblot验证融合蛋白的表达。超声破碎表达菌,Ni+-亲和柱对表达蛋白进行纯化及柱上复性。结果成功构建了原核表达载体pET-32a(+)-HCV-Core,并表达了预期分子量大小的目的蛋白。结论成功表达、纯化HCV核心融合蛋白,为进一步研究其生物学功能奠定了坚实的基础。
- 刘秀财王克霞成军洪源王琦杜佳菊季生吉
- 关键词：核心蛋白原核表达蛋白纯化
- 丙型肝炎NS5A基因多克隆抗体的制备被引量：1
- 2010年
- 目的:构建丙型肝炎病毒(HCV)NS5A蛋白原核表达载体,获得高产量的纯化目的蛋白,并制备其多克隆抗体。方法:应用聚合酶链反应技术,PCR扩增获得NS5A基因,将NS5A基因插入至原核表达载体pET-32a(+)中,转化大肠埃希菌DH5α提取质粒,验证正确后,转化大肠埃希菌BL21中,以IPTG诱导,获得NS5A融合蛋白的可诱导性表达,通过SDS-PAGE电泳、Western blot免疫印迹分析证实融合蛋白表达的特异性。利用Ni+亲和柱对表达蛋白进行纯化及柱上复性。纯化蛋白免疫新西兰兔,利用Western blot和ELISA法对多克隆抗体进行特异性和效价检测。结果:NS5A融合蛋白表达成功,成功获得了融合蛋白及兔抗NS5A多克隆抗体。结论:成功表达NS5A基因融合蛋白,获得高特异性、兔抗NS5A多克隆抗体,为研究NS5A基因的生物学功能提供了重要制剂。
- 刘秀财李耕慧郭伟华
- 关键词：原核表达蛋白纯化
- 魅力课堂 生动教学——生物化学教学方法的探讨
- 2012年
- 生物化学是运用化学的理论和方法研究生命物质的边缘学科。该学科具有一定的逻辑性。所以教学只有在良好的教学模式下才得以实施。本文对于生物化学学科的教学模式进行了详细的论述。
- 刘秀财李淑燕张梅郭红艳
- 关键词：课堂教学模式生物化学
- 实验室用恒温延续时间报时器
- 本实用新型公开了一种实验室用恒温延续时间报时器，包括矩形的壳体，壳体内设有探头存放室，面板上方设有水浴温度显示屏和电子计时器。报时器系统设置在水浴温度显示屏的下方，该系统的中心处为旋转定时器，旋转定时器由温控开关控制，旋...
- 刘秀财
- 文献传递
- 丙型肝炎病毒Core和NS5A基因原核表达载体构建及蛋白纯化
- 目的丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)感染所致丙型肝炎是慢性肝病及肝细胞癌(hepatic cell cancer,HCC)的病因之一;但迄今尚无疫苗和特异有效的治疗方式。深入研究丙型肝炎病毒的感...
- 刘秀财
- 关键词：丙型肝炎原核表达蛋白纯化
- 文献传递
- 妊娠期糖尿病小鼠表皮生长因子的表达及其意义被引量：1
- 2015年
- 目的探讨妊娠期糖尿病小鼠表皮生长因子的表达与发病的关系。方法采用STZ建立妊娠糖尿病小鼠模型,测定母鼠血糖、胎盘系数;ELISA法测定母鼠血清EGF含量,RT-PCR、免疫组化测定GDM组和对照组胎盘EGF的表达。结果 GDM组胎盘系数高于对照组(P<0.01);GDM组母鼠血清EGF高于对照组(P<0.01);而RTPCR和免疫组化结果显示GDM组胎盘EGF表达与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论 GDM导致血清EGF发生变化,而EGF并非GDM发病的原因。
- 张梅王宏兰张坤刘秀财郭红艳李淑艳
- 关键词：妊娠期糖尿病表皮生长因子表皮生长因子受体
- 生物化学教学中应用PBL教学模式的探讨被引量：5
- 2011年
- 目的:探讨PBL教学模式在生物化学教学中的应用效果。方法:选取齐齐哈尔医学院2009级本科专业2个教学班分别作为研究组和对照组。研究组在教学中实施PBL教学模式,对照组采用常规讲授法。待课程结束时,统计两组学生的考试成绩并进行分析。结果:研究组的学生考试成绩和对教学方法的评价均明显优于对照组(P<0.05)。结论:应用PBL教学模式进行生理学教学效果良好,值得推广。
- 刘秀财王宏兰齐晓丹王淑英孙晓杰冯丽郭红艳富东娜
- 关键词：PBL教学模式生物化学教学改革基础教育
