刘隽
- 作品数：15 被引量：75H指数：4
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金：国家杰出青年科学基金国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- microRNA在人脐血CD34^+CD38^-、CD34^+CD38^+细胞中的差异性表达
- 2008年
- 为进一步探讨microRNA(miRNA)在造血调控中的作用奠定基础,比较了miRNA在人脐血CD34+CD38-、CD34+CD38+细胞中的差异性表达。从人脐血中分离单个核细胞(MNC),应用FACSVantage分选流式细胞仪分选CD34+CD38-、CD34+CD38+细胞;抽提miRNA后与miRNA芯片杂交,应用生物信息学技术分析miRNA芯片的表达结果。结果发现,miRNA在人脐血CD34+CD38+细胞的表达水平比在CD34+CD38-细胞的表达水平降低至1/2以下者共11个,表达水平升高至2倍以上者共73个,以上84个miRNA被称为"干细胞性"miRNA。经比较Georgantas等和芯片表达结果,发现有12个(14.29%,12/84)相同的miRNA。部分miRNA经历了类似于CD34在造血细胞表面的发展历程。应用生物信息学技术可寻找到新的与造血调控相关的miRNA簇及miRNA的下游靶基因。结论:"干细胞性"miRNA在正常造血中发挥着重要作用,即miRNA的系统表达模式→造血干/祖细胞基因表达谱→造血干/祖细胞的自我更新和系列定向分化。
- 李欣李小青张佳华陈万新刘隽郭天南黄士昂
- 关键词：MICRORNA造血脐血
- 曲古菌素A抑制HL-60细胞端粒酶活性及亚单位hTERT的表达并诱导凋亡被引量：7
- 2006年
- 目的研究组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古菌素A(tri-chostatin A,TSA)抑制HL-60细胞端粒酶活性及亚单位hTERT的表达并诱导凋亡的机制。方法采用MTT法和倒置相差显微镜观察不同浓度曲古菌素A对HL-60细胞的抑制作用,流式细胞仪检测600 nmol.L-1TSA作用后的细胞凋亡情况,TRAP-ELISA法检测端粒酶活性变化,RT-PCR分析端粒酶三个亚单位的mRNA表达情况。结果曲古菌素A对HL-60细胞的抑制作用具有时间和剂量依赖性,Annex-inV/PI双染色体法检测凋亡显示,600 nmol.L-1TSA作用48h后,细胞凋亡率为42.6%。600 nmol.L-1曲古菌素A作用12、24和48 h后,端粒酶活性分别下降为1.95±0.25、1.73±0.12和1.52±0.09。RT-PCR显示,端粒酶逆转录酶hTERT表达下降,而端粒酶RNA模板(hTR)和端粒酶相关蛋白(hTP1)表达无明显改变。结论曲古菌素A(trichosta-tin,TSA)抑制HL-60细胞端粒酶活性下降,并诱导凋亡,其机制可能与曲古菌素A下调hTERT转录水平有关。
- 周咏明薛克营陈艳红刘隽黄士昂
- 关键词：曲古菌素A端粒酶端粒酶逆转录酶
- B-ALL患者PTEN表达及其启动子甲基化状态研究被引量：4
- 2007年
- 目的:探讨抑癌基因PTEN在急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)患者外周血单个核细胞中的表达及其与启动子甲基化状态之间的关系。方法:收集24例初发B-ALL患者和25例正常人外周血单个核细胞,通过Kol-mogorov-Smirnov(KS)分析,利用定量流式细胞术检测PTEN表达。提取基因组DNA后,采用MSP方法检测PTEN启动子甲基化状态,进而在体外培养过程中,以DNA甲基化转移酶抑制剂5-氮-2’脱氧胞嘧啶进行处理,观察其对B-ALL单个核细胞PTEN表达的影响。结果:25例正常人外周血单个核细胞均表达PTEN,KS分析时D值为0.941±0.017,而24例B-ALL患者中22例(91.6%)外周血单个核细胞PTEN表达明显缺失,D值仅为0.546±0.115,两者差异具有显著性意义(P<0.01);正常人和PTEN高表达的B-ALL患者外周血单个核细胞中未发现PTEN启动子发生甲基化修饰,而PTEN表达缺失的B-ALL患者中有5例(22.7%)出现PTEN启动子甲基化,将其单个核细胞培养时以5-氮-2’脱氧胞嘧啶处理4d,PTEN表达明显升高。结论:PTEN的表达缺失在B-ALL患者中很常见,其启动子甲基化导致的PTEN表达缺失在B-ALL的发生中可能起重要作用。
- 杨晶杜雯贺艳丽刘隽郑金娥黄士昂
- 关键词：BALLPTEN甲基化
- 成人急性髓细胞性白血病免疫表型与细胞遗传学及临床特征的关系被引量：18
- 2005年
- 背景与目的:新的WHO分类已迅速应用于白血病的诊断。依据多个系相关抗原的表达,多参数高分辨流式细胞术可准确地识别白血病细胞的系列来源和分化阶段,而且某些抗原表达与细胞遗传学改变和预后密切相关。本研究旨在探讨初治成人急性髓细胞性白血病(acutemyeloidleukemia,AML)的免疫表型特征,并对其与FAB分类、细胞遗传学和临床表现的关系进行分析。方法:采用多参数高分辨流式细胞术对96例成人AML患者骨髓进行免疫表型分析,染色体G显带技术对其中的73例进行核型分析。结果:AML患者中,某些免疫表型特征与FAB分类具有相关性,包括M3中缺乏表达HLA鄄DR、CD34和CD56,但CD2的表达增加;M2中CD19、M5中CD14和CD56的表达增加,而M0中未见MPO的表达。本组AML核型异常率为54.8%,其中CD22、CD56和TdT的表达与核型异常有显著性相关。10例t(8;21)改变仅见于M2中,并高表达CD15、CD19、CD34和CD56,但未见CD2和CD7表达。7例伴t(15;17)的M3患者中未见淋系抗原的表达。此外,CD4和TdT抗原的表达与患者年龄、CD7和CD14的表达与外周血白细胞计数、CD4、CD14和CD56的表达与血小板计数等均有显著性正相关。结论:AML患者免疫表型与细胞遗传学的相关性提示AML抗原的异常表达可能与基因的异常改变密切相关。
- 王兴兵郑金娥谷俊侠姚军霞杨晶刘隽李小青贺艳丽喻竞明魏君刘仲萍黄士昂
- 关键词：白血病髓细胞性急性免疫表型流式细胞术细胞遗传学
- 115例急性髓细胞白血病多参数流式细胞术免疫表型分析被引量：21
- 2005年
- 免疫表型检测已成为白血病诊断和分类的重要手段。为了解急性髓细胞白血病(AML)免疫表型特征,利用 三色流式细胞术CD45／SSC参数散点图设门方法,对115例AML患者幼稚细胞表面及胞浆内分化抗原进行分析;结 合FAB分类,比较AML不同亚型中抗原表达的差异,并对其诊断价值加以探讨。结果显示:在AML患者中,CD33、 CD38和CD13的表达最常见,分别达94.8％、91.3％、89.6％。在淋系抗原中,CD7的表达最为常见(20.2％),其次是 CD19(16.5%)和CD2(15％)。某些免疫表型特征与FAB分类具有相关性,包括M3中缺乏表达HLA-DR、CD34和 CD56,但CD2的表达增加;M2中CD19,M5中CD14和CD56的表达增加,而M0中未见MPO的表达。结论:多参数 流式细胞术是诊断AML的一项可靠技术,AML某些免疫表型特征与FAB分类具有明显相关性。
- 王兴兵姚军霞郑金娥刘隽李小青贺艳丽喻竞明杨晶魏君刘仲萍黄士昂
- 关键词：急性髓细胞白血病免疫表型多参数流式细胞术
- 急性淋巴细胞性白血病跨系表达方式研究被引量：3
- 2006年
- 目的利用三色流式细胞术对急性淋巴细胞白血病(ALL)免疫表型跨系表达进行研究。方法采用CD45/SSC双参数散点图设门方法对135例ALL(111例B-ALL,24例T-ALL)患者幼稚细胞表面及胞质内分化抗原进行分析。结果在ALL中,髓系抗原(M)表达64%,T和B亚型中髓系抗原表达差异无显著性意义(P>0.05),其中CD13表达最为常见(40%),其次是CD33(37%)、CD11b(20%)和CD15(16%),CD13和CD33在CD34+病例中的表达均高于CD34-病例。B-ALL中,T系抗原CD4、CD2和CD7分别在19例、2例和2例中表达,CD4+和CD7+病例通常共表达CD13和(或)CD33;T-ALL中2例CD19表达者均伴CD13/CD33表达。结论ALL伴髓系表达的频率较高(B+M+,T+M+),偶尔出现B系,T系和髓系共表达的表型(B+T+M+),B系T系共表达但不伴髓系表达的表型(B+T+M-)极少,跨系表达多存在各未成熟的阶段,髓系抗原表达与干细胞表面标志CD34有一定的联系。
- 陈艳红王兴兵谷俊侠张佳华刘隽黄士昂
- 关键词：免疫分型髓系抗原
- 急性髓细胞性白血病细胞培养上清对树突细胞分化、成熟、凋亡及功能的影响被引量：10
- 2007年
- 背景与目的:树突细胞(dendritic cell,DC)在机体抗瘤免疫中起重要作用。研究已表明肿瘤患者和荷瘤动物体内DC功能受损并伴有DC数量的降低。最近的研究提示这种DC功能的受损可能是肿瘤细胞分泌的可溶性因子介导的免疫抑制所致。本研究拟观察急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)细胞分泌的可溶性因子对单核细胞来源DC的分化、成熟、凋亡及其功能的影响。方法:原代AML细胞培养24h后收集上清。在含有或不含有AML细胞培养上清的培养液中,利用IL-4和GM-CSF刺激单核细胞分化成不成熟DC(immature DC,iDC),IL-1β、IL-6、TNF-α和PGE-2促进DC成熟。流式细胞仪检测DC表型和凋亡率的变化。计算前体细胞频率(precursor frequency,PF),观察DC对异基因CD4+T细胞和CD8+T细胞的刺激功能。结果:AML细胞培养上清可显著抑制DC表面协同刺激分子CD80和CD86的表达,并可降低促成熟细胞因子对DC的促成熟作用。同时,与对照组相比,AML细胞培养上清可显著诱导DC的凋亡,凋亡率分别为(15.1±4.2)%和(29.4±9.5)%(P<0.01)。相对于正常成熟DC,AML细胞培养上清诱生的DC对异基因CD4+T细胞和CD8+T细胞的刺激功能显著降低(P<0.01),其中CD4+T细胞的前体细胞频率分别为(5.2±1.6)%和(1.8±0.5)%,CD8+T细胞的前体细胞频率分别为(6.5±2.0)%和(2.1±0.6)%。结论:AML细胞分泌的可溶性因子可抑制DC的发育和功能。
- 王兴兵刘隽吴竞生孙自敏黄士昂
- 关键词：CD4^+T细胞CD8^+T细胞凋亡
- 胰岛素样生长因子Ⅰ型受体在急性髓细胞性白血病中的表达及意义被引量：4
- 2007年
- 目的研究胰岛素样生长因子Ⅰ型受体(IGF-ⅠR)在急性髓细胞性白血病(AML)中的表达特点及抗IGF-ⅠR单克隆抗体对人急性早幼粒细胞白血病细胞株HL-60的作用。方法通过流式细胞仪检测白血病细胞和HL-60细胞表面IGF-ⅠR的表达,并用鼠抗人IGF-ⅠR单克隆抗体(IGF-ⅠRMAb)作用于HL-60细胞,用CCK-8法检测细胞增殖,用流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期的变化。结果IGF-ⅠR在急性髓细胞白血病和HL-60细胞普遍表达,原始细胞比例越高,IGF-ⅠR表达越强(P<0.01)。0.001～10.000μg/ml的IGF-ⅠRMAb可抑制HL-60细胞生长,且随时间的延长和药物剂量的增大,这种抑制作用更加明显(P<0.05)。0.001～10.000μg/ml浓度范围内,IGF-ⅠRMAb诱导HL-60细胞的凋亡率随药物浓度的增大而增高,但对HL-60细胞周期无显著影响。结论IGF-ⅠR在急性髓细胞性白血病中普遍表达,IGF-ⅠR的高表达可能与细胞的恶性转化和白血病细胞的生长有密切关系。IGF系统对肿瘤细胞的促增殖及抗凋亡作用能被IGF-ⅠR单克隆抗体所阻断,IGF-ⅠR有可能成为抗白血病治疗的靶点。
- 孙思刘隽周咏明熊芳李玥莹刘伟王萍黄士昂
- 关键词：急性白血病抗体流式细胞术
- herg1基因调控慢性髓细胞白血病细胞的增殖和细胞周期
- 2008年
- 目的:研究herg1基因在慢性髓细胞白血病(CML)细胞的表达及其对CML细胞增殖和细胞周期的调控作用。方法:应用RT-PCR方法测定33例初治慢性髓细胞白血病患者和10例健康志愿者的骨髓细胞herg1基因的表达,检测特异性抑制剂处理后CML细胞株K562增殖凋亡和细胞周期的变化。结果:①在初发CML病例中,herg1mRNA的表达率是72.7%(24/33),高于正常对照(20%)(P<0.01)。CML加速期和急变期的herg1mRNA的表达率分别为75%和90.9%,高于正常对照(P<0.01),但是herg1的表达与CML的临床分期并无相关性(P>0.05)。②E-4031(1μmol/L)可呈时间依赖性抑制细胞增殖,不诱导明显凋亡。③E-4031阻滞K562细胞周期于G1期。结论:CML细胞herg1基因表达失调,IHERG抑制剂E-4031对K562细胞的增殖和细胞周期具有调控作用,herg1基因可能与CML发病机制相关。
- 刘黎琼李慧玉曾惠刘隽周咏明黄士昂
- 关键词：白血病髓样慢性K562细胞细胞周期
- 多参数流式细胞术分析505例急性淋巴细胞白血病跨系列表达方式(英文)被引量：2
- 2009年
- 跨系列抗原表达是白血病免疫表型的一个重要特征。对于急性淋巴细胞白血病(ALL)的跨系表达方式,目前国内尚缺乏大样本多参数的研究报道。本研究利用三色流式细胞术探讨505例ALL(431例B-ALL,74例T-ALL)患者23种系相关抗原的跨系表达方式。结果显示:全部ALL病例中,髓系抗原的表达率为56.4%,其中以CD13(32.7%)的表达最常见,其次为CD33(29.5%)、CD15(19.2%)和CD11b(7.7%)。CD13/CD33在CD34+病例中的表达高于CD34-病例。在B-ALL中,T系抗原CD4、CD5、CD7和CD2的表达率依次为6.3%、2.8%、1.9%和1.4%,并且CD7+、CD2+和CD4+病例通常共表达CD13和(或)CD33。在T-ALL,B系抗原cCD79a、CD19和CD22的表达率分别为8.1%、6.8%、和2.8%,而全部CD19和CD22表达者均伴CD13/CD33表达。结论:ALL的跨系表达多存在未成熟的阶段,以跨髓系抗原的表达最常见(B+M+,T+M+),偶有B系、T系和髓系抗原的共表达(B+T+M+),仅有B系和T系跨系表达的极少(B+T+M-)。
- 王兴兵杜雯夏亮郑金娥刘隽贺艳丽孙自敏黄士昂
- 关键词：急性淋巴细胞白血病免疫分型
