卢实
- 作品数：48 被引量：182H指数：7
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖北省科技攻关计划湖北省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- SDF-1/CXCR4对卵巢上皮性癌细胞增殖和侵袭的影响被引量：5
- 2008年
- 目的:研究SDF-1/CXCR4在卵巢癌细胞生物学活性中的作用。方法:用RT-PCR方法检测卵巢癌细胞株SW626及Anglne中的SDF-1和CXCR4的表达。细胞经外源性SDF-1或者抗CXCR4单克隆抗体干预后,用MTT法检测细胞增殖,PI测细胞凋亡,Annexin-V/PI法检测细胞早期凋亡,Transwell小室检测细胞的迁移侵袭活性。结果:两株卵巢癌细胞株中,SW626细胞既表达SDF-1又表达CXCR4,Anglne细胞则两者均不表达。在SW626细胞中,SDF-1作用于无血清状态下培养的细胞(吸光度A值为0.911±0.01),与对照组(吸光度A值为0.506±0.01)相比,差异有统计学意义(P<0.01),而加入抗CXCR4单克隆抗体作用后(10μg/ml A值为0.725±0.01,20μg/ml A值为0.650±0.02),与SDF-1组相比,差异均有统计学意义(分别为P<0.05和P<0.01);抗CXCR4单克隆抗体作用于无血清状态下培养的细胞(10μg/ml A值为0.655±0.11和20μg/ml A值为0.520±0.04),与对照组(A值为0.724±0.03)相比,差异均有统计学意义(P<0.05)。加入外源性SDF-1后,SW626细胞在无血清状态下的早期凋亡数为15.6%,相对于对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。抗CXCR4单克隆抗体可增加SW626细胞中的PI阳性细胞数(P<0.01)。并且,与对照组相比,SDF-1促进SW626细胞的迁移和侵袭能力增强(P<0.01),而此活性可被抗CXCR4单克隆抗体阻断。结论:SDF-1/CXCR4可能通过促进细胞增殖、迁移、侵袭及抑制其凋亡,使卵巢癌细胞获得进展。
- 王晓翊卢实林晓琰王泽华
- 关键词：SDF-1CXCR4趋化因子类
- 促凋亡因子Omi/HtrA2对凋亡抑制蛋白表达及A549细胞凋亡的影响被引量：2
- 2007年
- 目的观察Omi/HtrA2对凋亡抑制蛋白(XIAP)表达的影响和对肺癌A549细胞凋亡的影响。方法将构建的携带绿色荧光蛋白(GFP)和Omi/HtrA2基因的表达载体(PEGFP-N1- Omi)转染至人肺腺癌A549细胞中,用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot检测Omi/ HtrA2对XIAP转录和表达的影响,流式细胞仪检测Omi/HtrA2协同顺铂作用于A549细胞后该细胞的凋亡变化。结果Omi/HtrA2基因转染组XIAP的mRNA表达水平下降37%(P<0.05),XIAP的蛋白表达水平下降69%(P<0.05),顺铂诱导后,基因转染组细胞凋亡率为(36.00±1.95)%,显著高于对照组的细胞凋亡率(17.00±1.12)%(P<0.05)。结论Omi/HtrA2通过抑制XIAP的抗凋亡作用可协同顺铂促进A549细胞凋亡。
- 卢实陈大瑜胡晓勇胡汉黄畦
- 关键词：肺癌基因表达脱噬作用
- 湖北省部分地区围绝经期妇女尿失禁影响因素调查被引量：5
- 2017年
- 调查湖北省部分地区围绝经妇女尿失禁(UI)的患病率及影响因素。方法 2014年4月-2014年12月采用多阶段随机抽样法抽取湖北省武汉市3个中心城区社区服务中心和湖北省鹤峰、房县2个贫困山区40~65岁的围绝经期妇女进行横断面问卷调查,并对妇女的基本特征、UI症状及危险因素进行分析。结果共发放了1 577份问卷调查,收回有效问卷1 519份,女性UI的发病率为38.5%,其中压力性、急迫性及混合性UI的发病率分别为31.9%,24.1%及17.4%。单因素回归分析结果显示:年龄、BMI、文化程度、绝经、生产次数、分娩方式、会阴裂伤史、运动状况、心脏病、糖尿病、血脂、关节炎、妇科疾病、慢性盆腔痛、萎缩性阴道炎、盆腔器官脱垂、便秘、粪失禁、性意愿减退及居住地区是UI的潜在危险因素(P<0.05);多因素Logisitic分析显示:老龄化、超重、月经不规律、妇科疾病、慢性盆腔痛、盆腔器官脱垂、便秘及粪失禁是UI的独立危险因素。结论湖北省部分地区围绝经妇女UI的发生与年龄、体重指数增加、萎缩性阴道炎、便秘及盆腔器官脱垂等密切相关。
- 卢实张雅君丁学慧张红菱
- 关键词：UI围绝经期流行病学
- 环孢素A治疗反复性自然流产的研究进展被引量：4
- 2020年
- 早期妊娠的成功依赖于良好的胚胎植入和胎盘血管重铸。母胎界面对胚胎免疫耐受和免疫排斥的动态平衡保证了胚胎成功植入子宫内膜;滋养细胞正常的迁移和侵袭有助于胎盘血管重铸,维持正常妊娠。而目前,生育期妇女出现反复性自然流产(recurrent spontaneous abortion,RSA)的比例逐年升高,免疫因素在反复性自然流产中的作用越来越受到重视。
- 于子婕卢实
- 关键词：环孢素A滋养细胞母胎免疫耐受反复性流产
- 壳聚糖脱乙酰度两种测定方法的比较被引量：7
- 2009年
- 采用酸碱指示剂滴定法和线性电位滴定法测定壳聚糖的脱乙酰度,结果表明线性电位滴定法比酸碱指示剂滴定法能更好地避免人为误差,具有较高的准确性和精密度,而且操作简单。
- 赵颖杨琰卢实张红菱
- 关键词：壳聚糖脱乙酰度
- 卵巢癌相关成纤维细胞的培养及其对癌细胞侵袭力的影响被引量：5
- 2008年
- 目的探讨卵巢癌相关成纤维细胞(CAFs)对卵巢癌细胞株CAOV3侵袭力的影响。方法用组织块贴壁培养法获得原代卵巢CAFs和卵巢正常成纤维细胞(NFs);通过倒置相差显微镜观察细胞形态和多种蛋白的免疫组化染色,对卵巢CAFs进行鉴定,观察CAFs对CAOV3侵袭力的影响。结果获得纯化的卵巢CAFs,其波形蛋白、α-平滑肌肌动蛋白染色呈阳性,角蛋白呈阴性;CAFs可显著提高CAOV3的侵袭能力(P<0.01)。结论与NFs相比,CAFs在形态结构、蛋白表达等方面均有显著差异,卵巢CAFs可增强CAOV3侵袭作用。
- 王晓翊卢实杨守华韩方唐慧娟王泽华
- 关键词：卵巢肿瘤癌相关成纤维细胞细胞培养侵袭力
- mdr1启动子调控双自杀基因对卵巢癌SKOV3耐药细胞的靶向杀伤作用
- 2007年
- 目的观察多药耐药基因1(mdr1)启动子调控腺病毒介导的胞嘧啶脱氨酶∷尿嘧啶磷酸核糖转移酶(CD∷UPP)融合基因系统对人卵巢癌紫杉醇耐药细胞的靶向杀伤作用。方法2004年10月至2005年5月于华中科技大学附属协和医院,将重组腺病毒(Admdr1-CD∷UPP)转染卵巢癌紫杉醇耐药细胞(SKOV3/Taxol)及非耐药细胞(SKOV3),荧光显微镜下观察转染效率,用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测目的基因CD∷UPP的表达,并给予不同浓度的5-氟胞嘧啶(5-FC),用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测二组的细胞存活率及旁观者效应。结果重组腺病毒对SKOV3/Taxol的转染率随腺病毒滴度的递增而增加,感染复数(MOI)为50时,感染率约100%;CD∷UPP基因仅在SKOV3/Taxol中稳定表达;5-FC对耐药细胞转基因组的杀伤作用显著高于非耐药细胞转基因组,前者表现出明显的旁观者效应。结论mdr1启动子调控的CD∷UPP融合自杀基因系统对人卵巢癌紫杉醇耐药细胞有靶向杀伤作用。
- 卢实王晓翊肖蓝蔡俐琼王泽华
- 关键词：胞嘧啶脱氨酶卵巢癌
- 人类多药耐药mdr1基因启动子的克隆及其转录活性的研究
- 2005年
- 目的克隆编码多药耐药基因(mdr1)的启动子片段并探讨其在上皮性卵巢癌中的转录活性。方法2002年9月至2003年4月华中科技大学同济医学院附属协和医院以人类基因组为模板扩增人类mdr1基因的启动子片断,并将启动子分别插入到pGEMT载体和荧光素酶报告基因载体中。将重组荧光素酶报告基因系统分别转染紫杉醇耐药(A2780/Taxol)和紫杉醇敏感细胞(A2780),比较启动子在两种细胞中的活性;同时将转染后的A2780/Taxol用曲古霉素A(TSA)处理,观察TSA对启动子转录活性的影响。结果mdr1启动子在耐药细胞A2780/Taxol中表现出比A2780强的启动子活性,这种活性在TSA诱导后能够提高。结论成功克隆了mdr1启动子片段,在A2780/Taxol细胞中mdr1启动子的功能活性的研究为下一步对多耐药性卵巢癌进行靶向基因治疗提供了重要依据。
- 蔡春芳蔡俐琼李敏卢实王泽华
- 关键词：转录活性克隆A2780MDR1基因靶向基因治疗敏感细胞
- nm23-H1基因表达对人宫颈癌细胞增殖的影响及与临床病理关系的研究被引量：3
- 2009年
- 目的:探讨nm23-H1基因稳定表达对人宫颈细胞增殖能力的影响,及其表达与临床特点的关系。方法:用免疫组织化学法检测nm23-H1基因在宫颈癌组织的表达。将真核表达载体pcDNA3.1-nm23-H1转染入宫颈癌细胞系HeLa、SiHa,G418稳定筛选,用Western印迹法、免疫组化法鉴定转染前后细胞中nm23-H1基因的蛋白表达,噻唑蓝(MTT)法检测转染前后细胞体外增殖能力的变化。结果:在宫颈鳞癌组织中,nm23-H1基因阳性表达率随FIGO临床分期的升高有下降趋势,Ⅲ期nm23-H1阳性表达率明显低于Ⅱ期,Ⅱ期阳性表达率明显低于I期(P<0.01);分化程度高的组织阳性表达率显著高于分化程度低的组织(P<0.01);有淋巴结转移者其原发灶阳性表达率明显低于无淋巴结转移者(P<0.01)。宫颈腺癌组织中nm23-H1基因阳性表达率与FIGO临床分期,分化程度,淋巴结转移均无明显的相关性(P>0.05)。在pcDNA3.1-nm23-H1转染组中,Si-Ha、HeLa细胞nm23-H1蛋白表达水平明显增加,未转染组和空载体对照组未见nm23-H1高表达。MTT法所绘生长曲线显示,SiHa-nm23(转染组)细胞与SiHa-3.1(空载体组)、SiHa(空白组)细胞比较,生长速度明显抑制,差异均有统计学意义(P<0.01),而HeLa(空白组)、HeLa-nm23(转染组)、HeLa-3.1(空载体组)三组细胞生长速度均无明显变化(P>0.05)。结论:nm23-H1参与了宫颈鳞癌的发生、发展过程,是判断宫颈鳞癌淋巴结转移和预后的重要标志物,而nm23-H1基因对不同宫颈癌细胞体外增殖能力的影响有明显差异。
- 杨琰卢实李茗王泽华
- 关键词：宫颈肿瘤基因转染细胞增殖
- 人脐血内皮祖细胞对脐动脉内膜损伤的修复作用被引量：1
- 2008年
- 目的体外分离培养人脐带静脉血内皮祖细胞（EPCs），观察EPCs对损伤脐动脉的修复作用。方法采用磁珠分选法（MACS）从人脐血中分离培养EPCs，用流式细胞术、免疫细胞化学和免疫荧光检测进行鉴定；牵拉钳夹损伤法制备去内膜脐动脉段，与EPCs共孵育7d后，通过病理切片、免疫组织化学和图像分析技术评价EPCs对动脉损伤的修复效果。结果成功从人脐血中分离培养EPCs，流式细胞术分析结果为培养7d后CD133^＋细胞〉90％；CD34、vWF因子相关抗原免疫染色均为阳性。EPCs移植组新生内膜厚度（43．5±5．5）μm显著低于对照组内膜厚度（90．7±12．7）μm，（t=-28．88，P〈0．01）；EPCs移植组的再内皮化程度（77．8±0．1）％明显高于对照组（52．2±0．1）％，（t=21．86，P〈0．01）。结论成功从人脐血中培养出EPCs，人脐血EPCs可修复内皮损伤血管。
- 张红菱黄畦代怡然肖坚吴超英卢实
- 关键词：内皮细胞动脉内膜损伤脐血
