吴同垒
- 作品数:220 被引量:638H指数:12
- 供职机构:河北科技师范学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家现代农业产业技术体系建设项目博士科研启动基金更多>>
- 相关领域:农业科学医药卫生文化科学生物学更多>>
- 迟缓爱德华菌外膜蛋白OmpA原核表达及其免疫原性研究被引量:9
- 2018年
- 为研究迟缓爱德华菌外膜蛋白OmpA免疫保护性,本研究利用PCR方法扩增迟缓爱德华菌ompA基因,构建重组载体pET-32a-ompA,将其转化大肠杆菌BL21后诱导表达,表达产物经SDS-PAGE和western blot分析显示,重组蛋白大小约58 ku;将纯化的重组蛋白免疫小鼠后,以迟缓爱德华菌强毒株ET-13攻毒,结果显示该重组蛋白对免疫组小鼠具有保护力,保护率为55%。本研究克隆了迟缓爱德华菌ompA基因并表达了相应重组蛋白,免疫小鼠后能够提供一定保护,为重组OmpA蛋白亚单位疫苗的研制奠定基础。
- 张志强杨楠李永慧王洪彬冯东青吴同垒史秋梅朱国强
- 关键词:迟缓爱德华菌外膜蛋白OMPA免疫保护力
- 纳米金联合荧光PCR在制备检测魁蚶牡蛎疱疹病毒的试剂盒中的应用
- 本发明公开了纳米金联合荧光PCR在制备检测魁蚶牡蛎疱疹病毒的试剂盒中的应用,涉及魁蚶牡蛎疱疹病毒检测技术领域。本发明建立的纳米SYBR Green I qPCR检测方法为今后OSHV‑1的进一步研究提供了一项先进的技术。...
- 张艳英吴同垒苏蒙蒙王璐赵允清韩平桑桑张嘉倩
- 多杀性巴氏杆菌的分离鉴定和全基因组测序分析
- 2024年
- 多杀性巴氏杆菌(Pm)可感染多种动物,引起肺炎或全身性败血症,造成严重的经济损失。为鉴定河北昌黎县某肉牛养殖场导致牛大批病死的病原,本研究从病牛肺脏中分离到疑似Pm的菌株,对其进行革兰氏染色观察,16S rDNA基因的PCR扩增与序列分析,并对其荚膜和脂多糖进行PCR分型,PCR扩增其7个管家基因后分析分离菌的多位点序列分型(MLST)。结果显示,分离株为革兰氏阴性菌,与Pm的16S rDNA基因序列同源性达99.87%,表明分离到一株Pm。PCR分型鉴定结果显示其为血清B型和脂多糖L2型,MLST分型为ST44型,将该Pm分离株命名为PmB-1。将PmB-1以4.88 cfu/只经腹腔注射感染小鼠,进行致病性试验,结果显示PmB-1能引起小鼠内脏出血病变。采用IlluminaHiseq二代结合PacBio三代测序平台对PmB-1进行全基因组测序及生物信息学分析。结果显示,PmB-1基因组含1条染色质,长2 331 836 bp,编码2 141个基因,并含19个rRNA,58个tRNA和42个sRNA;含有3个前噬菌体、5个基因组岛,5个获得性免疫(CRISPR-Cas)系统、3个插入序列以及1个转座子元件。致病性预测分析结果显示,PmB-1含244个毒力相关基因,224个耐药基因,495个基因参与病原与宿主的互作,14个基因编码分泌系统蛋白,535个基因编码转运蛋白,190个基因编码分泌蛋白,499个基因编码跨膜蛋白,17个基因编码双组分调控系统。本研究分离到一株Pm,并对其进行小鼠致病性试验,全基因组测序和生物信息学分析,为预防Pm的感染、流行和研究其致病机制提供了参考依据。
- 王凤杰刘万段文龙李娜兰天龙张晓禹张志强史秋梅吴同垒
- 关键词:多杀性巴氏杆菌全基因组测序生物信息学分析
- 中药对鸡致病性大肠埃希菌的体外抑菌试验被引量:43
- 2017年
- 为研究25种中药对秦皇岛地区鸡致病性大肠埃希菌(Escherichia coli)地方流行株QH1(O78)、QH2(O89)、QH4(O1)的体外抑菌效果,以E.coli标准株ATCC25922作为质控菌株。利用水提法制备中药药液,使终浓度为1g/mL;用平板琼脂打孔法和改良微量二倍稀释-平板法分别测定25种中药的抑菌圈直径和最小抑菌浓度(MIC)。结果表明,金银花、黄连、乌梅、五味子4种中药对鸡致病性E.coli地方株极度敏感,抑菌圈直径在20.3mm^22.7mm之间,其MIC在15.65mg/mL^31.25mg/mL之间;其他药物对鸡致病性E.coli地方株有不同程度的敏感性,为鸡致病性E.coli地方株中药防治提供理论基础。
- 张召兴李蕴玉常超越张香斋史秋梅张艳英吴同垒张志强贾青辉李佩国
- 关键词:致病性大肠埃希菌中药体外抑菌试验
- 框镜鲤维氏气单胞菌CY0806株OMPAⅠ基因的克隆及生物信息学分析被引量:7
- 2011年
- 为鉴定维氏气单胞菌(Aeromonas veronii,AV)吉林分离株合适的诊断或免疫用抗原,研究依据GenBank维氏气单胞菌外膜蛋白AⅠ基因(OMPAⅠ)设计引物,通过PCR成功扩增出长度为1 026 bp的基因片段,通过序列分析表明:该基因与维氏气单胞菌AB2902300 OMPAⅠ的同源性为93%,与其他气单胞菌同源性大于80%;同时通过生物信息学软件对其蛋白的分子特征进行了预测,为OMPAⅠ可能做为诊断或免疫用抗原提供了理论依据。
- 单晓枫吴同垒孟庆峰王伟利钱爱东
- 关键词:维氏气单胞菌生物信息学
- 维氏气单胞菌OmpAⅠ基因重组植物乳杆菌的构建及其表达产物的免疫原性分析被引量:3
- 2017年
- 为构建维氏气单胞菌OmpAⅠ基因重组植物乳杆菌并检测其表达产物的免疫原性,将目的基因克隆至大肠杆菌-乳杆菌穿梭表达载体p SIP409中,并电转至植物乳杆菌中,经诱导后对表达产物进行Western-blot分析。结果显示,LP/p SIP409-OmpAⅠ重组植物乳杆菌出现一条约42 ku的印迹,与预期大小相符,表明重组蛋白具有反应原性。LP/p SIP409-OmpAⅠ重组植物乳杆菌免疫鲫鱼后,在第25天血清中Ig M水平达到高峰;RT-PCR检测发现免疫后鲫鱼肝、脾、肾及心组织中的细胞因子IL-8、IFN-γ与IL-1β表达水平均有不同程度提升;攻毒后LP/p SIP409-OmpAⅠ免疫组的保护率在65%以上,高于对照组的存活率。结果表明,应用重组植物乳杆菌LP/p SIP409-OmpAⅠ免疫鲫鱼能刺激机体产生免疫应答反应,为预防鱼类维氏气单胞菌感染的重组植物乳杆菌口服制剂的研发奠定了基础。
- 张冬星康元环田佳鑫安鼎杰贾俊鹏孙武文吴同垒单晓枫钱爱东
- 关键词:维氏气单胞菌免疫原性
- 一种规模化牛养殖免疫装置
- 本实用新型公开了一种规模化牛养殖免疫装置,包括免疫房、输送带、测速雷达、控制器和气雾免疫装置;免疫房两侧内壁上设置有风扇,风扇的吹风方向倾斜向上设置;风扇、变速电机和测速雷达分别与控制器电性连接;气雾免疫装置包括无油静音...
- 史秋梅张召兴刘勃兴于秀剑柳翠翠杜万年高桂生吴同垒张志强高光平张清波冯岭
- 文献传递
- 细菌生物被膜研究进展被引量:14
- 2019年
- 生物被膜指细菌黏附在惰性或活性实体表面繁殖分化,分泌一些物质将菌群包裹在内形成的微生物聚集体,具有多重耐药性及免疫逃逸能力,因此具有高致病性、难治愈的特性。论文主要对细菌生物被膜、形成过程、耐药性及耐药机制、生物被膜引起的感染、检测方法及防控等方面进行综述,以期为细菌生物被膜的控制提供参考。
- 王洪彬朱利霞于秀剑高桂生史秋梅吴同垒
- 关键词:细菌生物被膜控制方法
- 鸡白痢沙门菌htrA基因缺失株的构建及其相关生物学特性研究被引量:7
- 2018年
- 为研究丝氨酸蛋白酶HtrA对鸡白痢沙门菌在巨噬细胞内生存的影响,本研究利用λ-Red同源重组系统构建了鸡白痢沙门菌(ATCC19945) htra基因缺失突变株(ATCC19945Δhtra),通过测定其巨噬细胞内存活能力、应激条件实验,探究Htr A蛋白在鸡白痢沙门菌致病过程中的作用。结果显示,缺失株ATCC19945Δhtra与野生型菌株和回复菌株相比,其生长速度、生化特性无明显差异,但其巨噬细胞内存活能力显著降低。应激环境试验结果表明,htra基因缺失后鸡白痢沙门菌对pH、热和H_2O_2氧化应激的敏感性增加,在蛋清中生存能力下降,生物被膜形成能力显著下降。本研究为进一步阐释鸡白痢沙门菌的胞内存活机制、疫苗开发奠定基础。
- 张志强张志强苏硕青李永慧黄翠琴段滇宁吴同垒吴同垒李佩国
- 关键词:鸡白痢沙门菌基因缺失HTRA生物学特性
- 哈维氏弧菌Bfr蛋白的原核表达及免疫特性研究被引量:2
- 2021年
- Bfr(Bacterioferritin)是细菌主要的储铁蛋白和重要的免疫相关蛋白。为探索哈维氏弧菌Vibrio harveyi Bfr蛋白的免疫特性,本研究利用大肠杆菌Escherichia coli表达系统表达哈维氏弧菌Bfr重组蛋白(rBfr),并进行纯化,进一步通过动物模型评估rBfr的免疫特性。结果显示,成功表达了哈维氏弧菌Bfr蛋白,Bfr蛋白分子量大小约为25 ku;表达的重组蛋白主要以可溶性形式存在;免疫小鼠结果显示,rBfr蛋白能激发小鼠产生高水平的特异性抗体,rBfr具有较好的免疫原性;利用斑马鱼Danio rerio建立哈维氏弧菌感染模型,表明哈维氏弧菌对斑马鱼无致病性。本研究证实了哈维氏弧菌Bfr具有免疫原性,为进一步研制哈维氏弧菌亚单位疫苗和核酸疫苗提供了参考和借鉴。
- 张志强王苗杜万年刘勃兴康元环单晓枫吴同垒朱国强史秋梅
- 关键词:哈维氏弧菌BFR免疫特性