吴崇超
- 作品数：4 被引量：1H指数：1
- 供职机构：暨南大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中央高校基本科研业务费专项资金“重大新药创制”科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学化学工程更多>>
- 蓝藻抗病毒蛋白CVN及衍生物抗甲型流感体内外活性的研究
- 甲型流感严重影响着人类的生活生产，每年可引起几十万人死亡。目前，临床使用的抗流感专一性药物匮乏，并且病毒表面抗原极易漂变和转变，容易引起病毒的耐药性，因此对抗流感病毒新药的研发迫在眉睫。 蓝藻抗病毒蛋白N(CVN)是19...
- 吴崇超
- 关键词：甲型流感病毒聚乙二醇修饰连接肽血凝素
- 文献传递
- 蓝藻抗病毒蛋白-N衍生物的克隆、发酵与纯化被引量：1
- 2012年
- 蓝藻抗病毒蛋白-N(Cyanovirin-N,CVN)能特异性与病毒表面糖蛋白结合,抑制病毒进入宿主细胞及抑制病毒感染细胞与未感染细胞的融合。通过分子设计及优化,在CVN的N-末端连接了5个氨基酸的柔性多肽(GGGGS),构建了SUMO-L5-CVN融合表达系统。SUMO-L5-CVN在大肠杆菌BL21中呈可溶性表达;通过表达条件优化,以0.5 mmol/L IPTG在20℃诱导24 h是最佳的诱导表达条件;SUMO-L5-CVN表达量占菌体总蛋白的30%;经Ni-NTA亲和层析获得融合蛋白SUMO-L5-CVN,SUMO蛋白酶酶切,以及进一步从Ni-NTA亲和层析获得的目的蛋白L5-CVN蛋白纯度>98%。结果表明,低浓度的L5-CVN与流感病毒表面糖蛋白gp120就有较高的亲和力。
- 杨辉吴崇超陈佳陈伟杨依丽罗勇姚冬生熊盛
- 关键词：连接肽发酵纯化
- 甲型流感病毒H1N1亚型HA基因的克隆及序列分析
- 2013年
- 目的克隆甲型流感病毒H1N1亚型血凝素HA基因,并对其进行序列分析。方法利用TRIzol Rea-gent法提取甲型流感病毒H1N1亚型的总RNA,RT-PCR后以其cDNA为模板PCR扩增HA基因,经酶切、连接后,构建pET 28a(+)-HA重组质粒。利用生物信息学工具对HA的核酸序列和蛋白功能结构进行分析。结果成功构建了pET 28a(+)-HA重组质粒,经序列比对,与GenBank上公布的HA基因序列同源性达到99%。结论对HA基因进行克隆及生物信息学的分析,为深入研究HA在病毒侵入细胞及抗原变异中的作用机制及后续HA抑制剂的体外筛选奠定基础。
- 钟媚共邱贤秀向阳飞吴崇超王一飞
- 关键词：流感病毒H1N1亚型血凝素
- 蓝藻抗病毒蛋白N衍生物的细胞毒性及抗病毒活性检测被引量：1
- 2013年
- [目的]研究蓝藻抗病毒蛋白N(CVN)衍生物(LCVN)对永生化上皮角质形成细胞(HaCaT)的毒性及LCVN凝胶的制备和体外活性检测。[方法]用MTT法测定LCVN对HaCaT细胞株的半数毒性浓度(CC50)以及LCVN对流感病毒毒株A/HK/8/68(H3N2)的半数抑制浓度(IC50);用流式细胞检测法检测LCVN对HaCaT细胞周期与细胞凋亡的影响;用酶联免疫吸附法(ELISA)检测LCVN凝胶与HIV包膜蛋白GP120的相互作用。[结果]培养24和48 h后,LCVN对HaCaT的CC50分别为(9.25±1.21)与(1.94±0.12)μmol/L,将LCVN做成凝胶后,与HIV外膜蛋白GP120的结合在一定浓度范围内具有剂量关系,LCVN凝胶对A/HK/8/68(H3N2)毒株的IC50为(98.20±0.03)nmol/L。[结论]LCVN对HaCaT细胞的毒性明显小于CVN,当做成凝胶以后LCVN对流感病毒A/HK/8/68(H3N2)具明显抑制作用,并能与HIV包膜蛋白GP120相互作用。
- 陈佳吕芬吴崇超彭舟魏博杨辉陈伟熊盛
- 关键词：流感病毒GP120
