吴根鹏
- 作品数：6 被引量：25H指数：2
- 供职机构：上海生物制品研究所有限责任公司更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- B群脑膜炎球菌疫苗开发与临床前评价（待续）被引量：1
- 2013年
- 脑膜炎球菌（Neisseria meningitidis,Nm）感染可导致流行性脑脊髓膜炎和败血症,有较高的病死率.荚膜多糖及多糖结合疫苗能有效控制A、C、W135和Y群Nm感染,而对B群Nm （MenB）感染的预防,只有外膜囊泡疫苗在局部地区取得成功.目前,针对MenB疫苗的研究以外膜蛋白为基础.此文对MenB疫苗的研发进展及临床前研究中的几个关键评价指标进行综述.
- 吴根鹏朱为
- 关键词：疫苗细菌外膜蛋白质类
- 脑膜炎球菌表面蛋白fHBP与PorA的融合表达及其免疫原性被引量：2
- 2016年
- 目的构建脑膜炎球菌（Neisseria meningitidis,Nm）表面蛋白fHBP重组表达质粒,并与PorA蛋白融合表达,对单抗原fHBP和融合抗原fHBP-PorA的免疫原性进行检测。方法筛选并优化fHBP和PorA基因序列,设计连接片段将PorA连接至fHBPC-端,构建重组表达质粒pET-24b-fHBP和pET-24b-fHBP-PorA,分别转化E.coli BL21（DE3）感受态细胞,IPTG诱导表达。表达的重组蛋白经镍柱亲和层析和凝胶过滤层析后免疫家兔,制备抗血清,采用间接ELISA、流式细胞术和微量血清杀菌力试验（serum bactericidal assay,SBA）评价抗原的免疫原性。结果经双酶切和测序鉴定,两个蛋白的重组表达质粒构建正确。重组蛋白fHBP以可溶形式表达,fHBP-PorA以包涵体形式表达,纯化后纯度均在90%以上。抗血清滴度均在1.0×10~5以上。流式细胞术检测显示,抗血清与Nm可发生特异性结合,且fHBP-Por A抗血清显示出一定的交叉反应。fHBP和fHBP-PorA抗血清对Nm29019的杀菌滴度为1∶128。结论 fHBP具有较好的抗原性和免疫原性,具备B群脑膜炎疫苗开发前景。多抗原融合策略需更多的优化考虑。
- 吴根鹏袁萍王月红王晓毕慧黄帼英徐帆洪朱为
- 关键词：脑膜炎球菌免疫原性
- 水痘-带状疱疹疫苗的使用现状及研究进展被引量：20
- 2016年
- 水痘-带状疱疹病毒(varicella-zoster virus,VZV)可引起水痘和带状疱疹(herpes zoster,HZ),具有较高的传染性和发病率。目前V-Oka减毒株是WHO推荐的唯一可用于疫苗生产的毒株。自上市以来,水痘疫苗证实了其良好的有效性和安全性。水痘-带状疱疹疫苗的开发及应用受到国内外生物制药企业的广泛重视。本文现就水痘和HZ的流行病学、疫苗的发展和现状作一综述。
- 吴根鹏朱为
- 关键词：水痘-带状疱疹病毒疫苗
- 一种奈瑟菌黏附素A的突变基因序列被引量：1
- 2014年
- 脑膜炎球菌（Neisseria meningitidis,Nm）能导致流行性脑膜炎和暴发性败血症.全球每年流行性脑膜炎发病人数达30万～50万,成为重要的公共卫生问题之一.Nm可以分为13个血清群,主要致病群是A、C、Y、W135和B群.在欧美国家、新西兰等地,B群脑膜炎球菌已成为主要的致病菌群,占病例数的1/3 ～2/3以上.在我国,据中国疾病预防控制中心报告,2005-2009年在31个省、市、自治区中,已有25个分离到B群菌株.由于B群荚膜多糖与人体抗原之间存在交叉反应表位,其表面的优势蛋白具有复杂的表型,因此,疫苗开发难度很大,仅有少数几个外膜囊泡疫苗用于预防特定的疫苗特异性亚型菌株感染.
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- 关键词：聚合酶链反应
- 金黄色葡萄球菌α-溶血素及其突变体的原核表达和免疫学活性被引量：2
- 2014年
- 目的原核表达金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,S.aureus)α-溶血素(α-hemolysin,Hla)及其突变体,并检测其免疫学活性。方法采用PCR法从S.aureus中扩增hla基因,将该基因克隆至原核表达载体p ET28a中,构建重组表达质粒p ET28a-hla,并利用点突变试剂盒进行突变,获得重组质粒p ET28a-hlaH35L。将两种重组表达质粒转化大肠埃希菌BL21(DE3),IPTG诱导表达;表达的重组蛋白经Ni-NTA亲和层析和CM离子交换层析纯化后,检测其溶血活性、免疫血清的抑制溶血活性及HlaH35L蛋白的免疫保护作用。结果重组表达质粒p ET28a-hla经双酶切和测序证明构建正确;重组质粒p ET28a-hlaH35L的测序结果显示,第35位氨基酸突变位点与设计相符。表达的Hla和HlaH35L蛋白相对分子质量约为36 000,均为可溶性表达,表达量约占菌体总蛋白的50%,纯化后纯度均在90%以上。Hla具有溶血活性,溶血比活为152 HU/mg;HlaH35L无溶血活性;抗Hla和抗HlaH35L血清均具有抑制Hla溶血的活性;在小鼠滴鼻攻击模型中,HlaH35L具有一定的保护作用。结论成功在大肠埃希菌中表达了具有良好免疫学活性的Hla及其突变体HlaH35L,为筛选S.aureus候选疫苗组分奠定了实验基础。
- 袁萍王晓吴根鹏王月红徐帆洪朱为
- 关键词：原核细胞溶血活性免疫保护
- B群脑膜炎球菌疫苗开发与临床前评价（续）
- 2013年
- 脑膜炎球菌（Neisseria meningitidis,Nm）感染可导致流行性脑脊髓膜炎和败血症,有较高的病死率.荚膜多糖及多糖结合疫苗能有效控制A、C、W135和Y群Nm感染,而对B群Nm （MenB）感染的预防,只有外膜囊泡疫苗在局部地区取得成功.目前,针对MenB疫苗的研究以外膜蛋白为基础.此文对MenB疫苗的研发进展及临床前研究中的几个关键评价指标进行综述.
- 吴根鹏朱为
- 关键词：疫苗细菌外膜蛋白质类
