吴雪琼
- 作品数：354 被引量：1,355H指数：18
- 供职机构：中国人民解放军总医院更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项国家自然科学基金北京市科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学自动化与计算机技术机械工程更多>>
- ag85a-卡介苗重组疫苗的构建、免疫原性及抗结核作用的初步研究
- 2009年
- 目的构建结核分枝杆菌ag85a-卡介苗重组疫苗,研究其免疫原性及抗结核作用,以期获得结核病预防性或治疗性疫苗。方法通过基因工程重组技术将结核分枝杆菌保护性抗原Ag85A的编码基因与穿梭质粒载体pYUB295重组,采用电穿孔技术导入卡介苗中,应用PCR扩增、PAGE电泳鉴定重组卡介苗。通过ELISA法检测其免疫小鼠血清中特异性抗体,用MTS法分析其脾淋巴细胞增殖指数。通过观察ag85a-卡介苗重组疫苗对结核分枝杆菌感染实验动物半数死亡时间、一定时间内的死亡率、大体病变、T细胞及B细胞免疫功能等指标评价ag85a-卡介苗重组疫苗对结核分枝杆菌感染的预防效果。结果PCR扩增、限制性内切酶酶切、DNA测序鉴定、PAGE电泳表明成功地构建了ag85a基因pYUB295重组质粒,Ag85A蛋白在卡介苗中分泌表达。重组卡介苗免疫原性试验表明:ag85a-卡介苗重组疫苗免疫组小鼠有Ag85A特异性抗体产生,45天时达到最高水平。脾淋巴细胞增殖试验表明刺激指数均达2.0以上,ag85a-卡介苗重组疫苗免疫组小鼠脾淋巴细胞的刺激指数与对照组无明显区别。预防试验表明:ag85a-卡介苗重组疫苗组、卡介苗组与生理盐水对照组比都能延长结核分枝杆菌感染小鼠的半数死亡时间,降低2个月内的死亡率。结核分支杆菌攻击后2个月,处死小鼠时,小鼠脏器大体病变、脏器培养、抗体检测结果及淋巴细胞增殖实验表明:各组间无显著差别。结论正确构建了ag85a-卡介苗重组疫苗,ag85a-卡介苗重组疫苗与卡介苗对结核分枝杆菌感染的预防作用基本相同。
- 张灵霞董恩军吴雪琼
- 关键词：结核分枝杆菌
- 结核分支杆菌分泌蛋白Mtb81在大肠杆菌中的高效表达被引量：4
- 2005年
- 目的通过结核分支杆菌Mtb81基因在大肠杆菌中的表达 ,获得大量纯化的重组Mtb81蛋白。方法应用聚合酶链反应 (polymerasechainreaction ,PCR)技术扩增结核分支杆菌H37RvMtb81DNA序列 ;将目的基因与pGEM T连接 ,转入E .coli DH5a大量繁殖后 ,提取质粒DNA ,酶切鉴定、测序 ;构建pET2 4b Mtb81重组质粒 ,然后转化入表达宿主大肠杆菌BL2 1(DE3) ;诱导转化菌株 ,通过SDS PAGE电泳鉴定Mtb81表达水平 ,采用His.band纯化Mtb81蛋白。结果pGEM T/Mtb81内插入序列测序表明与报道的序列相同 ;pET2 4b Mtb81在大肠杆菌BL2 1(DE3)细胞内以包涵体形式存在 ,表达量占菌体总蛋白的 30 %左右 ,相对分子质量约 88ku ;纯化后的Mtb81样品经SDS PAGE和光密度扫描分析表明其纯度为 95 %左右 ,从培养菌中可获得 2 0 0mg/L左右纯化的蛋白。结论pET2 4b Mtb81大肠杆菌工程菌株能高效表达Mtb81蛋白 ,大量纯化的Mtb81为进一步的研究。
- 李香兰吴雪琼张广宇李娟张灵霞梁建琴
- 关键词：大肠杆菌基因表达聚合酶链反应
- Rv2657c蛋白在诊断或辅助诊断结核潜伏感染中的应用
- 本发明公开了Rv2657c蛋白在诊断或辅助诊断结核潜伏感染中的应用。Rv2657c蛋白为b1)至b3)中的任一种：b1)氨基酸序列是序列表中序列2所示的蛋白质；b2)在序列表中序列2所示的蛋白质的N端或/和C端连接标签得...
- 白雪娟吴雪琼阳幼荣杨丹
- Ag85b-卡介苗重组疫苗的构建及鉴定被引量：1
- 2007年
- 目的构建结核分枝杆菌Ag85b-卡介苗重组疫苗,研究其免疫原性及抗结核作用,以期获得结核病预防性和治疗性疫苗。方法通过基因工程重组技术将结核分枝杆菌保护性抗原Ag85b的编码基因与穿梭质粒载体pYUB295重组,通过电穿孔技术导入卡介苗中,应用PCR扩增、PAGE电泳鉴定重组卡介苗。结果通过PCR扩增获得Ag85b基因,与穿梭表达载体pYUB295重组后,通过PCR扩增、限制性内切酶酶切、DNA测序鉴定表明成功地构建了Ag85b基因pYU295重组质粒。将重组质粒通过电穿孔导入卡介苗,重组卡介苗在抗性培养基上生长良好。pYUB295-Ag85b重组卡介苗基因组DNA的PCR扩增以及培养上清液的PAGE电泳表明:Ag85b-卡介苗重组疫苗构建正确,Ag85b蛋白在卡介苗中分泌表达。结论成功构建了Ag85b-卡介苗重组疫苗。
- 张灵霞吴雪琼董恩军
- 关键词：结核分枝杆菌卡介苗重组疫苗
- 三种结核分枝杆菌耐药基因检测的临床应用和评价被引量：2
- 2002年
- 采用聚合酶链反应 单链构像多态性分析 (PCR SSCP)检测结核分枝杆菌耐药基因 (rPOB、katG和rPSL) ,评估它的临床应用价值。通过Bactec 96 0快速培养、PCR SSCP和药物敏感试验了解 12 3例肺结核病人结核分枝杆菌耐药情况 ,分析了临床治疗效果。近1/ 3的初治肺结核病人至少耐一种抗结核药物 ,RFP、INH和SM敏感株rPOB、katG和rPSL基因突变率分别为 6 2 %、10 8%和 2 5 4 % ,耐药株基因突变率分别为 6 0 2 %、4 8 0 %和 6 1 5 % ,耐药基因突变率随着耐药浓度增高而增高。药敏试验联合耐药基因检测指导治疗效果满意。耐药基因检测指导治疗是一种新探索 ,与药敏试验联合应用可互相弥补 ,有可能成为临床指导用药的较好方法。
- 王巍李洪敏吴雪琼叶一秀王安生陈红兵林明贵王金河李素梅
- 关键词：结核分枝杆菌抗结核药药物耐受性耐药基因PCR-SSCP
- LTA基因单核苷酸多态性rs2009658在检测结核易感性中的应用
- 本发明公开了LTA基因单核苷酸多态性rs2009658在检测结核易感性中的应用。本发明所提供的应用为用于检测rs2009658位点的单核苷酸多态性的物质在制备评价或辅助评价待测人患结核病的风险性的产品，或在制备诊断或辅助...
- 吴雪琼龚文平张俊仙安慧茹梁艳阳幼荣
- BACTEC MGIT 960全自动分枝杆菌培养鉴定药敏仪的动物实验模型分析
- 2001年
- 利用BACTEC 96 0全自动分枝杆菌培养鉴定药敏仪建立动物试验模型 ,以观察结核分枝杆菌 (M .tuber culosis.MT)MPT6 4质粒DNA疫苗预防结核病的效力。第一组小鼠接受H37RV攻击一个月后的肺、肝、脾培养结果 :90 %阳性标本培养时间为 7～ 13天。肝脏仅 75 %出现阳性结果。第二组小鼠接受H37RV攻击两个月后 ,其肺、肝、脾培养结果 :90 %阳性标本培养时间为 10～ 15天 ,肝脏仅 6 0 %出现阳性结果。第二组比第一组生长天数总体向后推迟 ,生长时间明显集中 ,生长曲峰强度比第一组明显减弱 ,第二组在肝脏中的感染率比第一组有所下降。可能是因为小鼠经DNA疫苗刺激后 ,免疫力增强 。
- 李洪敏吴雪琼金光莆郑忠国阿布杜
- 关键词：动物实验模型
- 具有抗结核作用中药及其成分研究进展被引量：16
- 2015年
- 肺结核(TB)是全球重大公共卫生和社会问题,近年来耐多药率、广泛耐药率不断上升,抗结核化疗药物的毒副作用越来越严重,肺结核患者免疫力低下,使得肺结核疫情进一步加剧,研发出抗结核有效、副作用少的药物迫在眉睫。鉴于中药在防治肺结核中发挥着重要的作用,该文就近年来抗结核中药及其主要成分做一综述。
- 陈丹刘光陵吴雪琼
- 关键词：肺结核结核分枝杆菌中药
- 结核病患者外周血淋巴细胞亚群检测及临床应用专家共识被引量：15
- 2020年
- 结核病(TB)的发生、发展及转归取决于入侵结核分枝杆菌(MTB)的数量、毒力及机体免疫抵抗力。通过流式细胞术分析TB患者外周血淋巴细胞亚群有助于评估患者的免疫状况、免疫功能和免疫平衡,为临床制定免疫干预措施、观察疗效及判断预后等方面提供实验室检测依据。本专家共识简要地介绍了我国临床常用的淋巴细胞亚群分析项目(包括百分比和绝对计数);提出了TB患者淋巴细胞亚群检测及结果正确判读的建议;简介了淋巴细胞亚群分析在TB患者临床诊疗中的用途,并对未来淋巴细胞亚群检测的发展前景进行了展望。
- 无吴雪琼初乃惠
- 关键词：结核淋巴细胞亚群流式细胞术
- 结核病易感基因的研究进展
- 结核病（tuberculosis,TB）是由结核分枝杆菌引起的呼吸道传染病。环境因素和遗传因素共同影响TB的发生、发展。它的易感基因研究给临床的诊断、治疗提供了理论基础。近年来,结核感染和发病的易感性机制的研究取得很多新...
- 吴雪琼
- 文献传递
