周宏伟
- 作品数：3 被引量：13H指数：2
- 供职机构：清华大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人血小板生成素基因cDNA和基因组DNA的克隆和序列测定被引量：2
- 2001年
- 目的研究内含子和5＇非翻译区对血小板生成素(TPO)基因表达的影响.方法以中国人胎肝mRNA为模板,应用RT-PCR和长距离PCR(LD-PCR)技术扩增了约1.1kb的全长人TPO cDNA.6.2 kb的TPO基因组DNA和TPO基因组中的内含子I,内含子Ⅱ～Ⅳ和内含子Ⅴ.结果全序列分析表明,全部的编码序列、所有的内含子/外显子剪切部位序列同已知一致,个别差异发生在内含子中.结论通过PCR扩增技术,成功地从中国人胎肝组织中克隆了全长人TPO cDNA、TPO基因组DNA及其全部的内含子.
- 宁云山周宏伟周明乾陈泽洪方向东富宁王小宁
- 关键词：血小板生成素基因组DNA内含子克隆
- 非放射性杂交标记系统被引量：6
- 2001年
- 非放射性杂交标记分子的出现极大地促进了杂交技术的推广应用，对整个分子生物学都有深远的影响。本文介 绍非放标记系统种类（半抗原类、荧光色素类及酶类）各自的原理及优缺点，并比较对其在原位杂交中的应用。
- 吴锦雅周宏伟
- 关键词：生物素地高辛荧光素
- hIL-2/mGM-CSF融合蛋白的构建及表达被引量：5
- 2001年
- 目的 :构建hIL 2 /mGM CSF原核表达载体 ,获得具有hIL 2和mGM CSF活性的hIL 2 /mGM CSF融合蛋白。方法 :利用PCR重叠延伸术 ,将人白细胞介素 2 (hIL 2 )和鼠粒细胞、巨噬细胞集落刺激因子 (mGM CSF)基因 ,通过 2个脯氨酸 (Pro)基因的中间接头连接起来 ,扩增出hIL 2 /mGM CSF融合基因 ,并克隆于表达载体pBV2 2 0和pLY4中。结果 :获得序列正确的hIL 2 /mGM CSF融合基因 ,并在大肠杆菌中成功表达 ,表达率在 2 0 %左右。活性测定其hIL 2活性为 4 5×10 5U/mg ,mGM CSF活性为 3 85× 10 6U/mg。结论 :获得了具有hIL 2和mGM CSF活性的hIL 2 /mGM CSF融合蛋白 ,为研究hIL 2 /mGM CSF融合蛋白的新生物学功能奠定基础。
- 夏荣林来兴妹周宏伟周明乾陈泽洪胡志明王小宁
- 关键词：白细胞介素-2细胞因子融合蛋白大肠杆菌
