周长军
- 作品数：15 被引量：18H指数：2
- 供职机构：长春生物制品研究所有限责任公司更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生化学工程更多>>
- 制备重组CHO细胞乙型肝炎疫苗的新方法
- 本发明涉及将含有乙型肝炎病毒表面抗原的溶液，通过疏水层析、硫酸纤维素层析以及凝胶过滤层析等多步处理，获得纯化或部分纯化的乙型肝炎病毒表面抗原的方法，实施所述方法的装置系统，使用所述系统通过所述方法获得的乙肝病毒表面抗原纯...
- 盛军陈万革金立杰李德娟阎昆明乔宏雷孙俊业周长军刘延明谷铁军罗璇赵睿王佳凤
- 文献传递
- 不同时间采集的小牛血清对CHO-C_(28)细胞培养及表达的影响被引量：2
- 2005年
- 通过研究小牛血清对CHO-C28细胞培养及HBsAg表达的影响,探讨小牛血清的不同采集时间对血清质量的影响。采集出生后4、8、12h(未进食)小牛的血清,对CHO-C28细胞进行传代、换液培养,并检测乙肝表面抗原(HBsAg)表达量。结果可见:①在细胞传代4次时,4h采集的血清细胞生长状态良好,8h采集的血清细胞出现明显的衰老,12h采集的血清细胞大面积死亡;②在细胞维持换液方面,4h采集的血清可维持细胞换液25次以上,8h采集的血清可勉强维持20次,12h采集的血清维持细胞换液10次时已大部分死亡;③乙肝表面抗原(HBsAg)表达量的检测结果,同批培养上清,4h采集的血清培养细胞表达量最高。可见,小牛出生后采集血清时间越早越好。
- 周长军戴长河何巍乔宏雷宋泽民赵小琳
- 关键词：小牛血清细胞培养
- 皮内注射用重组乙型肝炎卡介苗联合疫苗及制备方法
- 本发明提供了一种皮内注射用重组乙型肝炎卡介苗联合疫苗，特别提供了重组乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)与卡介苗(BCG)菌液的配比处方、冷冻干燥工艺，同时还提供了涉及该联合疫苗的保护剂、接种剂量、接种途径，属于疫苗生产制...
- 金立杰杨丽华陈万革王志赵小琳郑晓丽王洪飞于爱东孙俊业邹福学刘延明王玉武周长军李德娟杨彤乔宏雷刘艾红于漫轮罗璇蔡岩李利袁丽
- 文献传递
- 重组CHO-C_(28)细胞生长动态的研究
- 2004年
- 观察CHO C2 8细胞在大生产过程中 ,生长状态曲线 ,为细胞培养过程中换液及培养条件提供依据。人为控制培养液中血清含量、加液量、pH值等条件。从生产种子 2 2代左右开始传代 ,经 5～ 6 d形成致密细胞单层 ,一般维持换液次数为 30次左右。如果生产种子代次高 ,其维持换液次数也相应减少 ,根据不同换液次数细胞增殖数量不同 ,总结出重组CHO C2 8细胞生长动态曲线。并根据换收液的HBsAg滴度 ,绘出换液次数和HB sAg相关曲线。结论 :7～ 2 3次换液期间 (缓慢生长期 )HBsAg收获最高。
- 周长军陈万革董雪林赵丽剑杨文冲周安广赵小琳
- 关键词：CHO-C28细胞HBSAG
- 甲型肝炎病毒与水痘病毒感染2BS细胞的超微结构变化
- 2012年
- 目的观察甲型肝炎病毒(Hepatitis A virus,HAV)、水痘带状孢疹病毒(Varicella zoster virus,VZV)分别感染与共同感染二倍体细胞2BS株时细胞超微结构的变化。方法电镜观察HAV单独感染21、23、25 d,VZV单独感染1、3、5 d及HAV感染21 d后再以VZV感染1、3、5、7 d的2BS细胞的超微结构。结果与正常对照2BS细胞相比,单独感染HAV的2BS细胞超微结构无明显变化;单独感染VZV的2BS细胞的超微结构主要出现核膜破坏;HAV与VZV共同感染的2BS细胞核内出现VZV包涵体,核膜缺失,胞浆中可见HAV与VZV形态,且细胞粗面内质网和滑面内质网膨胀,内质网小池内有致密颗粒。结论HAV与VZV共同感染的2BS细胞的超微结构与两种病毒单独感染的细胞的超微结构存在不同的变化规律和形态特征,先感染HAV后感染VZV的2BS细胞比单独感染VZV的2BS细胞受到的破坏程度轻。
- 蔡岩赵晓青何巍姜崴周长军张金岩付博刘建华
- 关键词：超微结构
- 乙型脑炎病毒在Vero细胞上的传代适应性及毒种库的建立
- 2014年
- 目的分析乙型脑炎病毒（Japanese encephalitis virus,JEV）在Vero细胞上的传代适应性,进行培养条件及接种方式的优化,并建立毒种库。方法将JEV P3株在Vero细胞上连续适应性传至20代（P3V1-P3V20）,采用小鼠法检测P3V2、P3V3、P3V4的病毒滴度。优化JEV静置培养条件（维持液p H值、培养温度、MOI）及接种方式（单层接种法、混合接种法）,并进行培养规模的放大。采用RT-PCR法扩增P3V0、P3V1、P3V5、P3V10、P3V15及P3V20代病毒的E基因片段,并进行测序分析。建立JEV毒种库,并进行全面检定。结果 JEV在Vero细胞上传代适应性良好,各代次病毒滴度均大于8.5 lg LD50/ml。最适培养条件为：病毒维持液p H值为7.6,培养温度为34℃,病毒MOI为0.1;最佳接种方式为：单层接种法。在不同培养规模时,病毒滴度变化较小,且均维持在较高水平。P3V0、P3V1、P3V5、P3V10、P3V15及P3V20各代次间E基因片段同源性为100%,传代稳定性良好。建立的毒种库的鉴别试验、无菌检查、支原体检查、病毒滴定、病毒外源因子检查及免疫原性检查结果均符合《中国药典》三部（2010版）相关要求。结论已完成JEV在Vero细胞上的适应性传代培养,并成功建立毒种库,为实现以Vero细胞为基质的JEV疫苗的研发奠定了基础。
- 刘岩苑志刚韩轼奇谢伟周长军李春艳闫峰杨屹
- 关键词：乙型脑炎病毒VERO细胞传代适应性
- 国产与进口DMEM培养基培养CHO-C28细胞效果比较被引量：6
- 2007年
- 目的比较国产与进口DMEM培养基培养CHO-C28细胞的效果。方法采用国产DMEM培养基与进口DMEM培养基培养同批CHO-C28细胞,收集培养上清,检测HBsAg表达水平。采用相同条件纯化培养上清中的HBsAg,比较二者的层析图谱及纯化抗原的电泳图谱。并用其抗原制备疫苗,进行异常毒性和效力试验。结果培养上清中HBsAg表达水平,国产培养基略好于进口培养基,二者纯化图谱和抗原电泳图谱一致。两种培养基制备的疫苗异常毒性试验均合格,小鼠效力试验结果差异无显著意义。结论国产培养基在细胞培养中安全、有效,达到进口培养基水平,可用于规模化生产。
- 李建平周长军王宇田静刘成赵小琳李宏涛
- 关键词：DMEMCHO细胞乙型肝炎疫苗
- 重组乙型肝炎卡介苗联合疫苗及制备方法
- 本发明提供了一种重组乙型肝炎卡介苗联合疫苗，特别提供了重组乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)与卡介苗(BCG)菌液的配比处方、冷冻干燥工艺，同时还提供了涉及该联合疫苗的保护剂、接种剂量、接种途径，属于疫苗生产制备工艺技术...
- 金立杰杨丽华陈万革王志赵小琳郑晓丽王洪飞于爱东孙俊业邹福学刘延明王玉武周长军李德娟杨彤乔宏雷刘艾红于漫轮罗璇蔡岩李利袁丽
- 文献传递
- 制备重组CHO细胞乙型肝炎疫苗的新方法
- 本发明涉及将含有乙型肝炎病毒表面抗原的溶液，通过疏水层析、硫酸纤维素层析以及凝胶过滤层析等多步处理，获得纯化或部分纯化的乙型肝炎病毒表面抗原的方法，实施所述方法的装置系统，使用所述系统通过所述方法获得的乙肝病毒表面抗原纯...
- 盛军陈万革金立杰李德娟闫昆明乔宏雷孙俊业周长军刘延明谷铁军罗璇赵睿王佳凤
- 文献传递
- 在CHO-C28细胞大规模培养中提高收获次数及HBsAg的表达
- 2003年
- 目的 :在CHO -C2 8细胞大规模培养过程中增加收获次数 ,延长细胞收获周期 ,提高HBsAg收获量。方法 :采用 15L转瓶培养CHO -C2 8细胞 ,分 3组 ,对比观察不同小牛血清含量及pH值对细胞生长及HBsAg表达的影响 ,优化最佳培养条件。结果 :三组比较 ,实验 1组的收获次数最多 ,达 2 5次以上 ,HBsAg的表达量最高 ,收液量最多。结论 :优化了CHO -C2 8细胞的培养条件。
- 周长军金立杰赵小琳陈万革何巍乔宏雷杨文冲
- 关键词：细胞HBSAG
