唐小波
- 作品数：3 被引量：4H指数：2
- 供职机构：哈尔滨医科大学药学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 抗PLA2G13多克隆和单克隆抗体的制备与鉴定被引量：2
- 2008年
- 目的:制备分泌型的磷脂酶A2 G13(group XIII se-cretedphos pholipaseA2,PLA2G13)的多克隆抗体(pAb)和单克隆抗体(mAb),并对抗体进行特性鉴定。方法:以人正常肝cDNA文库为模板,构建重组表达质粒pGEX-4T-1-PLA2G13(即PLA2G13-GST)和pET-32a-PLA2G13(即PLA2G13-His)。PLA2G13-GST融合蛋白作为免疫原制备兔pAb和鼠mAb。采用Western blot鉴定兔抗人PLA2G13 pAb的特异性。采用Western blot和Immunohistochemistry鉴定鼠抗人PLA2G13 mAb的特异性。结果:PLA2G13-GST和PLA2G13-His融合蛋白在均大肠杆菌中以包涵体形式大量表达。Western blot鉴定表明,兔抗人PLA2G13 pAb可特异地识别HepG2细胞系中相对分子质量(Mr)约19700的蛋白,与文献报道中PLA2G13的实际Mr相符。通过筛选共获得8株可稳定分泌抗PLA2G13的杂交瘤细胞株,Western blot鉴定表明6株可识别重组人PLA2G13蛋白,免疫组织化学鉴定显示2株可特异性识别正常肝组织中的PLA2G13蛋白。结论:成功地制备了抗人PLA2G13兔pAb和鼠mAb,为进一步研究PLA2G13的功能提供了特异性检测工具。
- 李淑珍刘莹陈苗柳晓兰唐小波高建恩朱大岭孙启鸿
- 关键词：原核表达融合蛋白抗体制备
- T-2毒素抗原的研制被引量：2
- 1998年
- 酶联免疫吸附测定（ＥＬＩＳＡ）是检测Ｔ－２毒素的简便、灵敏、快速、特异、便宜的方法。按照ＣｈｕＦＳ的方法，将Ｔ－２毒素与琥珀酸酐（ＨＳ）连接，再以碳二亚胺（ＥＤＰＣ）催化与蛋白质结合，获得Ｔ－２毒素抗原。通过薄层层析法和酶联免疫法鉴定。
- 唐小波孙殿军冯杰冯杰
- 关键词：T-2毒素抗原薄层层析法ELISA
- 单株抗人肝脏微粒体蛋白及细胞色素P450单克隆抗体的制备及初步鉴定
- 2007年
- 目的:制备抗正常人肝脏微粒体(HLM)及细胞色素P450蛋白的单克隆抗体。方法:采用人肝脏微粒体蛋白作为免疫原免疫Balb/C小鼠,按常规方法融合、克隆,经间接ELISA法筛选抗体阳性杂交瘤细胞株,通过单抗亚类、Western blot对抗体进行初步鉴定。结果:成功地制备了一株抗肝微粒体蛋白的单克隆抗体(MAb),命名为MAb 10C7。用鼠单抗亚类快速鉴定纸条鉴定10C7为IgG2b。Western blot分析显示,MAb 10C7可特异识别相对分子量为46kD的人肝脏微粒体蛋白。结论:MAb 10C7抗正常人肝脏微粒或细胞色素P450蛋白的特异性强,对相关蛋白质的功能研究有较好的应用前景。
- 纪宏宇王智勇于磊武正华唐小波朱大岭
- 关键词：细胞色素P450单克隆抗体
