孔亮
- 作品数：50 被引量：138H指数：7
- 供职机构：辽宁中医药大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金教育部重点实验室开放基金中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学更多>>
- 混合式教学在中药制药工艺学中的探索
- 2023年
- 中药制药工艺学课程是中药制药专业的一门重要的专业基础课,注重理论知识的实际运用。利用网上教学平台提供课程学习资料,通过线上教学与线下教学相结合的方式进行教学,可以有效地调动学生的学习热情,提高教学质量。本文阐述了中药制药工艺学课程线上线下混合式教学的优势、线上课程的构建、线上与线下混合式教学的实施、教学效果的评价等方面内容,就如何运用线上与线下结合,最大限度地发挥优势互补的教学方法进行了讨论。
- 孔亮程岚李学涛袁子民赵琳
- 关键词：混合式教学教学改革
- 一种促进Aβ损伤的星形胶质细胞去分化为神经干细胞的中药单体纳米制剂及其应用
- 本发明属于干细胞技术领域，具体涉及一种转铁蛋白修饰蛇床子素长循环脂质体的中药单体纳米制剂及其在体外促进Aβ损伤的星形胶质细胞去分化为神经干细胞的用途。一种促进Aβ损伤的星形胶质细胞去分化成为NSCs的中药单体纳米制剂，所...
- 程岚孔亮杨静娴李学涛
- 文献传递
- 蛇床子素长循环脂质体对APP/PS1小鼠神经保护作用
- 2020年
- 目的探究蛇床子素长循环脂质体(Ost-Lips)对APP/PS1小鼠的神经保护作用。方法利用薄膜分散法制备Ost-Lips;将6月龄APP/PS1双转基因小鼠随机分为模型组、蛇床子素游离药组(Ost,10 mg/kg)、Ost-Lips组(10 mg/kg),以同龄C57BL/6小鼠为对照组,每日1次腹腔注射相应药物,模型组和对照组注射相同体积的生理盐水,连续6周。免疫荧光染色检测皮层及海马区β-淀粉样蛋白1-42(Aβ1-42)、小胶质细胞特异性标志物离子钙结合衔接分子1(Iba-1)的表达;酶联免疫吸附测定法(ELISA)评价神经组织炎症因子白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的水平;超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)试剂盒法验证药物对神经组织的保护作用;6周给药后进行Morris水迷宫实验,训练5 d记录逃避潜伏期及游泳距离,最后1 d记录穿越原平台次数以及停留原平台所在象限的时间。结果给药6周后,Ost-Lips明显较Ost更有效的减少APP/PS1双转基因小鼠脑Aβ1-42的沉积,减少胶质细胞过度活化,抑制炎症因子的释放,降低脑内SOD、MDA的水平,并能更好的提高APP/PS1双转基因小鼠的学习与记忆能力。上述结果与模型组相比,差异均具有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。结论初步证明Ost-Lips对APP/PS1小鼠具有比Ost更有效的神经保护作用。
- 李婉嫕孔亮蔺莹梁喜才姚璎珈陈吉聪杨静娴
- 关键词：蛇床子素长循环脂质体阿尔茨海默病神经保护作用
- 蛇床子素延缓叔丁基过氧化氢诱导的神经干细胞衰老被引量：6
- 2015年
- 目的通过建立神经干细胞(NSC)体外衰老模型,探讨蛇床子素(Ost)延缓NSC衰老的作用,并探讨其可能调控机制。方法体外培养NSC,在增殖培养基中传代纯化培养至第3代,用于细胞实验。利用叔丁基过氧化氢(t-BHP)50,100和150μmol·L-1分别与NSC孵育1,2和3 h,CCK-8法检测细胞存活率,确定t-BHP 100μmol·L-1与NSC孵育2 h为制备细胞衰老模型的最佳条件。再加入Ost 50,100和150μmol·L-1作用1,2和3 h,CCK-8法检测细胞存活率,选择Ost促进细胞存活的最佳作用浓度和作用时间。实验分为细胞对照组、衰老模型组(NSC与t-BHP 100μmol·L-1作用2 h)和模型+Ost组(NSC与t-BHP 100μmol·L-1作用2 h后,再与Ost 100μmol·L-1作用2 h),用Ki67染色法检测NSC细胞增殖能力,免疫组化法检测NSC分化能力,衰老β-半乳糖苷酶(Sa-β-gal)法检测衰老细胞百分率,RT-PCR法检测p53,p21,p19和p16基因表达,Western蛋白印迹法检测P16、细胞周期蛋白依赖性激酶D1(CDKD1)和磷酸化成视网膜细胞瘤蛋白(p Rb)蛋白表达。结果 Ost 100μmol·L-1作用2 h可明显促进NSC存活(P<0.01)。与细胞对照组相比,模型组NSC增殖能力明显下降(P<0.05),分化为星形胶质细胞、神经元和少突胶质细胞的能力亦明显下降(P<0.05),Sa-β-gal阳性衰老细胞百分率升高(P<0.01)。与模型组相比,模型+Ost 100μmol·L-1组NSC增殖能力升高(P<0.05),分化为星形胶质细胞、神经元和少突胶质细胞的能力亦明显提高(P<0.05),Sa-β-gal阳性衰老细胞百分率下降(P<0.01)。RT-PCR结果显示,与模型组相比,模型+Ost100μmol·L-1组p16和p53 m RNA表达水平降低(P<0.05),p19和p21 m RNA表达无显著性变化;与模型组相比,模型+Ost 100μmol·L-1组P16蛋白表达降低,同时CDKD1和p Rb蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。结论 Ost具有延缓t-BHP造成NSC衰老的作用,其延缓NSC衰老作用机制可能与调控P16-p Rb信号通路有关。
- 姚璎珈孔亮教亚男李少恒陶震宇闫宇辉杨静娴
- 关键词：神经干细胞蛇床子素
- 星点设计-效应面法优化PFV修饰紫杉醇和青蒿琥酯胶束处方研究被引量：3
- 2020年
- 目的制备细胞穿膜肽(PFVYLI,PFV)修饰紫杉醇和青蒿琥酯胶束,采用星点设计-效应面法优化胶束处方,提高难溶性药物紫杉醇的包封率。方法薄膜水化法制备不同处方胶束,高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography,HPLC)测定胶束中紫杉醇含量,并计算包封率。用星点设计-效应面法对Soluplus/紫杉醇(质量比)、水化时间、水化温度进行处方优选。结果制备胶束的最佳处方为Soluplus/紫杉醇=120∶1(质量比);水化时间:11 min;水化温度:35℃。胶束的平均包封率为91.32%±1.27%(n=3)。结论建立的HPLC法对紫杉醇的含量测定准确,简便,可用于计算胶束中紫杉醇的包封率。星点设计-效应面法优化出最佳胶束处方,紫杉醇的包封率符合要求,所建模型具有较高的显著性,适合制备PFV修饰紫杉醇和青蒿琥酯胶束。为开发新的抗肿瘤靶向制剂奠定基础。
- 王为李学涛孔亮姜爽罗一夫王晓波
- 关键词：星点设计-效应面法胶束紫杉醇青蒿琥酯处方优化
- 人参蛋白对过氧化氢致神经元损伤的保护作用被引量：2
- 2015年
- 目的:采用H2O2诱导小鼠神经元损伤,研究人参蛋白(GP)对神经元的保护作用。方法:从新生乳鼠大脑皮层中分离纯化神经元,通过倒置荧光显微镜观察细胞形态,β-半乳糖苷酶试剂盒检测细胞衰老,MTT法检测细胞存活,Hoechst 33342/PI双染色法检测细胞凋亡与坏死,荧光定量RT-PCR实验检测凋亡基因Bcl-2、Bax mRNA表达。结果:H2O2致细胞出现轴突缩短或消失,胞体变圆缩小,大小不等,核固缩,核染色质聚集等形态学变化,细胞存活率降低,Hoechst33342及β-半乳糖苷酶染色阳性;人参蛋白可改善细胞形态,增加细胞存活率,减少细胞凋亡与坏死,降低细胞衰老率。结论:人参蛋白对H2O2致神经元损伤具有保护作用,其机制与促进Bcl-2 mRNA表达,抑制Bax mRNA表达有关。
- 李红艳代永霞张江华孔亮康廷国杨静娴
- 关键词：人参蛋白H2O2细胞衰老存活坏死
- 蛇床子素对阿尔茨海默病小鼠脑内tau蛋白过度磷酸化及PI3K/Akt/Gsk3β信号通路的影响被引量：20
- 2019年
- 目的:研究蛇床子素对阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)小鼠脑内tau蛋白的影响并探讨其作用机制。方法:取6个月龄APP/PS1小鼠20只,随机分为模型组(Tg,0.5%CMC-Na)和蛇床子素组(Tg+Ost,20 mg·kg-1Ost);另取10只同龄C57BL/6小鼠作为阴性对照组(WT,0.5%CMC-Na)。连续灌胃(ig)给药6周,bid。Morris水迷宫检测各组小鼠的学习记忆能力;HE、尼氏(Niss)染色观察小鼠海马CA3区组织学变化和尼氏体变化;Western Blot法检测蛇床子素对AD小鼠脑内tau蛋白的影响及PI3K/Akt/Gsk3β信号通路上相关蛋白表达。结果:与Tg组比较,Tg+Ost组小鼠逃避潜伏期明显缩短(P<0.01),单位时间内目标象限停留时间长(P<0.01),穿台次数增加(P<0.01);Tg+Ost组小鼠海马CA3区细胞排列规则,锥体细胞数以及尼氏体数量增加。Western Blot显示Tg+Ost组小鼠tau(ser202)蛋白的表达量明显降低(P<0.01);同时发现Tg+Ost组中PI3K,p-Akt/Akt及p-Gsk3β/Gsk3β的蛋白表达水平显著增加(P<0.05)。结论:Ost可能通过调控PI3K/AKT/GSK-3β信号通路活性降低磷酸化tau水平。
- 倪颖男王雅萌孔亮姚璎珈时悦吴雨桐杨静娴
- 关键词：阿尔茨海默病蛇床子素APP/PS1TAU蛋白磷酸化
- 冰片修饰多烯紫杉醇/粉防己碱胶束处方优选及体外抗肿瘤作用
- 2023年
- 目的 优化冰片修饰多烯紫杉醇/粉防己碱胶束的处方,考察其对鼠源脑胶质瘤细胞(C6)的体外毒性和对小鼠脑微血管内皮细胞(bEnd.3)体外靶向能力。方法 采用薄膜水化法构建冰片修饰多烯紫杉醇/粉防己碱胶束。Box-Behnken响应面法优化处方中影响包封率的3个因素[聚乙二醇1000维生素E琥珀酸酯(TPGS1000)/总药量、聚乙烯己内酰胺-聚乙酸乙烯酯聚乙二醇接枝共聚物(Soluplus)、水化温度],高效液相色谱法对冰片修饰多烯紫杉醇/粉防己碱胶束中多烯紫杉醇与粉防己碱进行含量测定。体外考察不同胶束对C6细胞存活率的影响。采用荧光显微镜法考察不同胶束对bEnd.3细胞的主动靶向性。结果 优选后的处方为Soluplus 80 mg、TPGS100040 mg、多烯紫杉醇0.8 mg、粉防己碱3.2 mg,处方量为5 mL。冰片修饰多烯紫杉醇/粉防己碱胶束中多烯紫杉醇和粉防己碱的平均包封率为93.20%±0.35%和92.38%±0.08%。空白靶向胶束对C6细胞生长无显著影响;冰片修饰多烯紫杉醇/粉防己碱胶束能明显抑制C6细胞生长。细胞摄取实验显示,经冰片修饰的胶束摄取量显著提高。结论该实验成功优化用于制备冰片修饰多烯紫杉醇/粉防己碱胶束的处方,经冰片修饰的多烯紫杉醇/粉防己碱胶束,细胞毒性强于多烯紫杉醇胶束,对bEnd.3细胞有良好的主动靶向性。
- 刘洋司佳奇蔡佳雨刘婉滢李沣芮孔亮李学涛
- 关键词：冰片多烯紫杉醇粉防己碱处方优选
- 一种肝癌干细胞niche响应型逐级靶向脂质体及其应用
- 本发明公开了一种肝癌干细胞niche响应型逐级靶向脂质体及其应用，属于医药制剂领域。所述脂质体包括基础材料、所述基础材料包载的药物以及靶向肝癌相关成纤维细胞和干细胞的靶向分子，基础材料包括蛋黄卵磷脂、胆固醇、二硬脂酰磷脂...
- 孔亮李学涛于洋刘扬臧娟郭睿博张璐李淑彤
- 蛇床子素通过Wnt/β-catenin信号通路促进转染APP基因的神经干细胞分化为更多神经元且减少神经元凋亡被引量：17
- 2015年
- 目的通过转染APP基因于神经干细胞,研究蛇床子素对其增殖和分化能力的影响,及对神经元凋亡的影响,并研究其机制。方法体外建立阿尔茨海默病的神经干细胞模型,利用免疫组化染色法,研究蛇床子素对转染APP基因的神经干细胞增殖和分化能力的影响;通过CCK-8法检测神经干细胞存活率;Hoechst 33258法检测神经元凋亡情况;RT-PCR法检测GSK-3β和β-catenin mRNA的表达变化情况;Western blot法检测GSK-3β和β-catenin蛋白的表达变化情况。结果与APP组相比,蛇床子素组的神经干细胞增殖能力提高了10.24%;分化为神经元的能力提高了6.74%。与APP组相比,蛇床子素组神经干细胞的存活率明显提高;神经元凋亡明显减少;RT-PCR和Western blot结果显示,蛇床子素可抑制GSK-3β基因和蛋白的表达,促进β-catenin基因和蛋白的表达。结论蛇床子素可促进转染APP基因的神经干细胞的增殖,可促进其分化为更多的神经元,并减少神经元凋亡,可能与通过激活Wnt/β-catenin信号通路有关系。
- 姚璎珈孔亮教亚男李少恒陶震宇闫宇辉杨静娴
- 关键词：神经干细胞分化神经元蛇床子素WNT/Β-CATENIN信号通路
