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寇卜心: 作品数：19 被引量：40H指数：3; 供职机构：首都医科大学附属北京佑安医院更多>>; 发文基金：国家自然科学基金北京市自然科学基金北京市卫生系统高层次卫生技术人才培养项目更多>>; 相关领域：医药卫生文化科学更多>>

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角蛋白18在33和52位丝氨酸磷酸化水平的变化及与肝纤维化的关系被引量：1: 2015年; 目的探讨角蛋白18(keratin18,K18)在33和52位丝氨酸(Ser)磷酸化水平变化的作用及其与肝纤维化的关系。方法 6周龄Balb/C小鼠30只,分为3组(对照组和2个实验组),每组10只。对照组腹腔内注射橄榄油;实验组腹腔内注射四氯化碳(CCl4)和橄榄油的混合液(1∶9),10 ml/kg,每周2次,连续4周,分别在2周和4周处死小鼠。应用组织化学免疫荧光法检测正常对照小鼠和肝纤维化小鼠肝组织中K18及其磷酸化Ser33和Ser52的表达及其相对亚细胞定位;免疫印迹法(Western blotting)检测正常对照小鼠和肝纤维化小鼠肝组织的K18及其磷酸化Ser33和Ser52水平。结果组织化学免疫荧光结果显示,K18在正常对照小鼠和肝纤维化小鼠肝组织中均有表达,但在小鼠肝纤维化不同阶段无明显差异;在正常对照小鼠肝组织中表达比较弱,而随着肝纤维化的进展表达增强。West-ern blotting结果,肝纤维化小鼠肝组织中的Ser33和Ser52磷酸化的K18表达水平显著增加,尤其是Ser33表达增加更为明显。; 常远王珊珊欧阳雅博寇卜心陈德喜林明华; 关键词：肝纤维化

中国健康人趋化性细胞因子CCL3L1的基因拷贝数及其与HIV-1易感性关系的初步研究被引量：2: 2010年; 目的研究中国健康人群趋化性细胞因子配体蛋白CCL3L1(CC chemokine ligand 3-like-1)的拷贝数及其与HIV易感性的关系。方法收集全血标本,提取基因组DNA,应用Realtime PCR法分析其CCL3L1的相对拷贝数。首先选取22例健康人和23例HIV慢性感染者计算其CCL3L1拷贝数,分析我国健康人群CCL3L1平均拷贝数情况,并分析HIV感染和CCL3L1拷贝数的关系;选取男性同性恋早期感染HIV阳性者29例和HIV阴性者57例,分析CCL3L1基因拷贝数与HIV易感性的关系。结果我国人群CCL3L1平均拷贝数约为3;HIV慢性感染者与健康人无显著性差异(P=0.880);同性恋HIV阴性者CCL3L1拷贝数显著高于同性恋HIV阳性者(P=0.000)。结论我国健康人CCL3L1平均拷贝数为3,CCL3L1拷贝数与HIV易感性关系密切。; 柳雅立石英徐斌南萍计云霞魏飞力寇卜心陈德喜; 关键词：CCL3L1 基因拷贝数 HIV-1 易感性

Alu-LTR PCR方法检测HAART治疗系列各细胞亚群的整合型HIV-1 DNA被引量：1: 2011年; 目的应用Alu-LTR PCR方法对高效抗反转录病毒治疗(highly active antiretroviral therapy,HAART)系列的CD4+T,CD8+T及B细胞进行检测,明确不同细胞亚群及HAART治疗的不同阶段是否存在整合的HIV-1 DNA。方法收集20例HIV-1感染患者HAART治疗过程中0、4、12周及10例健康对照的抗凝血标本,纯化CD4+T,CD8+T及B细胞并提取DNA,应用Alu-LTR PCR方法进行检测。结果 20例HIV-1感染者HAART治疗系列中CD4+T细胞及CD8+T细胞成功扩出目的片段,CD8+T细胞所扩条带亮度均低于CD4+T细胞,HAART治疗系列0、4、12周标本所扩条带亮度没有明显差异。B细胞及10例健康者均为阴性。结论 CD4+T及CD8+T细胞存在整合型HIV-1 DNA,HIV储藏库主要存在于CD4+T细胞内。B细胞内不存在整合型HIV-1 DNA。随着HAART治疗的进程,整合型HIV-1 DNA仍然存在,进一步证明HAART不能根除HIV储藏库。; 李娟焦艳梅高艳青寇卜心张彤吴昊; 关键词：CD4+T细胞 CD8+T细胞

超声造影观察小鼠两种皮下移植瘤的血管生成被引量：2: 2020年; 目的应用高频小动物超声观察人BT-B膀胱癌和人Huh7肝癌两种皮下移植瘤的血管生成情况,探讨超声造影评价肿瘤血管生成情况的价值。方法采用皮下注射建立人BT-B膀胱癌和人Huh7肝癌两种皮下移植瘤模型,采用高频小动物超声成像系统的多种超声模式观察两种肿瘤内部结构和血管特性;采用探头式活体激光共聚焦观察肿瘤的小血管数量和大小;采用免疫组化法观察肿瘤的血管标志物CD31表达,计算微血管密度。结果两组裸鼠均成功荷瘤。B超模式显示Huh7与BT-B皮下瘤均为不均质低回声结节;彩色多普勒模式及频谱多普勒模式显示BT-B皮下瘤血流信号和血流速度多于Huh7皮下瘤;超声造影显示Huh7肝癌组血管分布紊乱,BT-B膀胱癌组血管分布呈“分支状”,与探头式活体激光共聚焦结果及病理结果一致。超声造影参数峰值强度(PI)与MVD呈正相关(r=0.844,P<0.05)。结论超声造影可以更好地显示肿瘤血管的分布情况,且PI与病理MVD呈正相关,可提示肿瘤血管的增殖情况,可以作为无创评价肿瘤血管生成的可靠方法。; 李爱静林雪君尹玲寇卜心柴梦音柴梦音刘晓霓陈德喜; 关键词：裸鼠皮下移植瘤超声微泡肿瘤血管

ASPP2重组腺病毒通过调控NF-κB信号通路抑制DEN诱导的小鼠肝细胞癌发生: 2024年; 目的研究ASPP2重组腺病毒(ASPP2-ad)对二乙基亚硝胺(DEN)诱导的小鼠肝细胞癌(HCC)发生的抑制作用及其可能的作用机制。方法采用DEN腹腔注射联合0.005%DEN饮水方法构建小鼠HCC模型。将动物分为DEN处理组和DEN-ASPP2-ad处理组,每组10只。使用小动物超声成像系统动态观察小鼠HCC形成情况,大体记数肝脏肿瘤数量,采用免疫组化法检测肿瘤组织Ki67表达,采用流式多重蛋白定量技术检测小鼠血清IL-1β、IL-6、KC、IL-2和TNFα水平,采用Western blot法检测组织AFP、caspase3、cyclinD1、PCNA、p-IKK、IKK、p-IκB、IκB、p-p65和p65蛋白表达,采用实时定量PCR法检测Nfatc1 mRNA水平。结果DEN诱导24周后,DEN组小鼠肝脏肿瘤数为(9.9±1.9)个,显著多于DEN联合ASPP2-ad组[(3.9±1.2)个,P<0.05];DEN组小鼠Ki67阳性细胞数为(91.4±9.1)个,显著多于DEN联合ASPP2-ad组[(56.6±10.5)个,P<0.05];在实验40周末,DEN组小鼠生存率为65.2%,显著低于DEN联合ASPP2-ad组的90.0%(P<0.05);DEN组小鼠血清ALT和AST水平分别为(271.5±143.8)U/L和(299.3±221.4)U/L,均显著高于DEN-ASPP2-ad干预组[分别为(101.7±44.6)U/L和(124.1±75.0)U/L,P<0.05];DEN联合ASPP2-ad组血清IL-6和TNFα水平分别为(8.1±1.6)MFI和(8.1±1.0)MFI,均显著低于DEN组[分别为(16.3±0.4)MFI和(26.3±5.3)MFI,P<0.05];DEN/ASPP2-ad处理组AFP、Cyclin D1和PCNA表达减弱,而caspase-3表达增强,NF-κB信号通路蛋白(p-IKK、p-IκB和p-p65)表达减弱,p-IKK/IKKα、p-IκB/IκB和p-p65/p65比值也降低,NF-κB下游癌基因Nfatc1表达减弱(P<0.05)。结论ASPP2-ad可能通过调控NF-κB通路显著抑制DEN诱导的炎性增殖反应,阻抑HCC的发生,值得深入研究。; 高明慧柴梦音寇卜心豆双双刘晓霓; 关键词：二乙基亚硝胺核因子ΚB 小鼠

北京市男男性行为人群庚型肝炎病毒感染率和流行亚型分析: 2013年; 庚型肝炎病毒（HGV，GBv-c）与丙型肝炎病毒同属黄病毒科，两者核苷酸有30％的同源性。GBV-C不引起感染人群肝病或其他疾病，感染数年后能自动清除。GBV-C与HIV具有相似的感染途径，大部分经血液、性接触或者母婴传播，所以在高危人群中存在很高的重叠感染。在HIV感染人群中GBV-C感染率明显高于正常人群，40％HIV感染者显示有活跃的GBV-C共同感染，; 徐萌绳波寇卜心宋凤丽袁霖吴昊陈德喜刘志英; 关键词：庚型肝炎病毒男男性行为者亚型分析

ASPP2在人肝星状细胞活化中的作用被引量：1: 2015年; 目的探讨p53凋亡刺激蛋白2(apoptosis-stimulating protein of p53-2,ASPP2)对人肝星状细胞活化的调节作用及机制。方法人永生的肝星状细胞系LX-2在孵箱中培养,转染ASPP2腺病毒和单荧光自噬指示体系(GFP-LC3)质粒,免疫印迹法检测ASPP2、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、自噬基因表达相关蛋白(Beclin-1)的表达水平。免疫荧光检测,LX-2细胞共转染ASPP2腺病毒和GFP-LC3质粒后,ASPP2过表达对LX-2细胞自噬的影响,M30染色检测ASPP2过表达对LX-2细胞凋亡的影响。结果转染ASPP2腺病毒后LX-2细胞内ASPP2蛋白表达明显增加;与转染对照空载腺病毒的LX-2细胞相比,转染ASPP2腺病毒的LX-2细胞自噬和α-SMA的表达明显减少,肝星状细胞的活化受到抑制;转染ASPP2腺病毒后LX-2细胞的凋亡水平增加明显。结论 ASPP2过表达在体外具有抑制肝星状细胞活化的作用。; 常远林明华欧阳雅博王珊珊寇卜心刘芳陈德喜; 关键词：肝星状细胞自噬

癌基因Ras及其常见突变与P53协同作用对结肠癌细胞化疗药物敏感性的研究被引量：2: 2015年; 目的探讨P53与Ras及常见Ras突变协同作用对结肠癌细胞化疗药物敏感性的影响。方法 P53-/-的结肠癌细胞(HCT116 P53-/-)中分别单转染Ras野生型、Ras V12、Ras N17质粒,另外3组细胞分别转染以上质粒后感染P53腺病毒。用奥沙利铂处理12 h后分别用钙黄绿素-AM(Calcein-AM)和碘化丙啶(PI)染色、实时荧光定量PCR(Real-time PCR)、免疫印迹(WB)检测各组凋亡水平。结果 Calcein-AM/PI染色显示,Ras V12转染组凋亡率[(16.8±1.7)%]显著高于Ras[(8.3±1.5)%,P<0.01]和Ras N17转染组[(4.4±1.6)%,P<0.01],Ras N17转染组凋亡率最低(P=0.016);P53腺病毒处理3组凋亡率均显著增高,仍以Ras V12转染组凋亡率[(25.9±2.2)%]为最高,Ras N17转染组最低[(7.6±1.2)%]。Real-time PCR和WB显示,P53存在与不存在条件下,Ras V12转染组Bax m RNA和蛋白表达均显著高于Ras和Ras N17转染组;Bcl-2水平则与Bax水平相反(P均<0.05)。结论 Ras突变体Ras V12过表达能够引起奥沙利铂作用下细胞凋亡的增加,而突变体RAS N17能够降低细胞凋亡;P53与Ras有协同作用,能够提高Ras的促细胞凋亡作用,提高细胞对奥沙利铂化疗药的敏感性。; 王俊伟石英乔录新寇卜心陈德喜郭洪亮; 关键词：结肠癌 RAS P53 基因

一例HIV-1急性感染者奠基病毒的gp160基因序列特征及其假病毒构建: 2014年; 目的观察急性感染期艾滋病病毒I型（HIV-1）gp160的全长基因序列及感染特征。方法从一例处于Feibig I期HIV-1感染者血浆中提取RNA,扩增gp160全长基因并测序,分析其生物学信息;将gp160全长基因与pcDNA3.1His/V5真核表达载体连接,构建Env-pcDNA3.1真核表达质粒,与骨架质粒pNL4-3.Luc.R-E-共转染293细胞,包装出假病毒。用包装的假病毒感染ghost细胞,测定感染细胞的荧光素酶活性（RLU）,鉴定假病毒的感染活性。结果成功扩增出gp160全长基因,嗜性预测为CCR5,N-糖基化位点数与标准株HXB2相同,但gp120糖基化程度更高,氨基酸变异主要集中在V1-V5区。假病毒感染试验显示,RLU值达到7log。结论获得了处于急性感染期的HIV-1gp160基因序列和高感染活性的假病毒。; 刘志英李甜寇卜心徐萌徐树莹陆小凡焦艳梅张彤陈德喜吴昊; 关键词：艾滋病病毒I型假病毒

科研技术平台在医学研究生培养中的作用: 2016年; 科研平台是医学研究生从事科学实践的重要基地。科研技术平台在医学研究生基本科研技术能力、科研创新思维培养、自我统筹管理能力提升以及课题完成方面发挥着重要作用。; 刘晓霓王爽刘秀红许坚吉寇卜心陈德喜; 关键词：研究生培养创新思维管理能力

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