廖晓梅 作品数:7 被引量:13 H指数:3 供职机构: 华中科技大学同济医学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家杰出青年科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
不同培养条件对海马器官型脑片培养中tau蛋白表达特性的影响 [目的]:探讨长时程海马器官型脑片培养过程中不同温度、不同培养基及不同鼠龄对细胞骨架蛋白tau的表达影响,并根据tau的表达特性,建立一种较好的老年性痴呆的组织模型。[方法]:研究选用出生后1周、2周、4周和8周的Wis... 廖晓梅 张迎春 王建枝文献传递 cdk-5过度表达对大鼠tau蛋白磷酸化及空间记忆的影响 被引量:4 2003年 Alzheimer病(AD)中,异常过度磷酸化的tau蛋白会导致细胞骨架的异常并与神经元的死亡有关.在体外,细胞周期蛋白依赖性蛋白激酶5(cdk-5)能在大多数AD相关位点磷酸化tau蛋白.旨在整体水平研究cdk-5过度表达对大鼠微管相关蛋白tau的磷酸化及空间记忆的影响.结果显示,在大鼠海马区转染 cdk-5基因,24h后其局部表达增加,并使得抗体tau-1显色减弱,PHF-1和12e8显色增强,提示tau蛋白在Ser199/202,Ser396/404和Ser262/356位点过度磷酸化.此外,在水迷宫测试中,cdk-5转染鼠寻找安全平台所需时间比对照鼠明显延长,而转染后48 h cdk-5的表达较 24h时下降,同时伴有tau蛋白磷酸化程度的下降和空间记忆能力的改善.这些结果提示整体水平的cdk-5的过度表达会导致大鼠的空间记忆损伤,而过度磷酸化的tau蛋白可能参与了该病理过程. 廖晓梅 张迎春 汪义朋 王建枝关键词:TAU蛋白 空间记忆 ALZHEIMER病 磷酸化 神经原纤维缠结 温度对不同年龄大鼠海马器官型脑片长期培养中细胞活性和tau蛋白表达的影响 被引量:3 2005年 探讨在海马器官型脑片的长期培养过程中,温度对不同年龄大鼠的海马脑片细胞活性和tau蛋白表达的影响,并以此为依据建立一种研究tau相关疾病的模型.选用出生后1周、2周、4周和8周的Wistar大鼠制备海马器官型脑片,培养温度分别为34℃和37℃,培养时间为21d,在培养过程中,检测培养基中的乳酸脱氢酶的含量以判断脑片的活性,采用免疫印迹技术检测细胞骨架蛋白tau的含量的变化.结果如下:(1)温度对海马脑片的细胞活性影响:34℃较37℃能在较长的时间内保持细胞活性,而在同一培养温度时,不同年龄鼠的脑片的细胞活性变化趋势一致;(2)温度对海马脑片的tau蛋白表达的影响:成年鼠(4周和8周)的海马脑片tau蛋白在34℃时能维持较长时间的稳定表达,而在37℃时tau的表达量随培养时间的延长而显著下降,且随鼠龄的增加,这种影响越明显.温度对1周和2周龄乳鼠的海马脑片tau蛋白的表达无影响.结论为:34℃培养条件下,4周和8周龄大鼠制备的海马器官型脑片能更长时间维持脑片的活性和tau蛋白的稳定表达,从而可望成为研究与tau蛋白相关疾病(如老年性痴呆)的理想模型. 廖晓梅 张迎春 王建枝关键词:温度 乳酸脱氢酶 TAU蛋白 在体转染GSK-3β引起tau蛋白在PHF-1位点的过度磷酸化(英文) 被引量:3 2006年 目的:探讨在体转染GSK-3β对tau蛋白在PHF-1位点磷酸化的影响。方法:21只大鼠随机分为GSK-3β转染组、空载体组和空白对照组3组:0.1μg/3μLGSK-3β-HA质粒和空载体分别注射入大鼠大脑,对照组大鼠不作处理,应用免疫印迹和免疫组织化学检测GSK-3β的表达,并应用磷酸化位点特异性抗体PHF-1检测tau蛋白的磷酸化水平。结果:转染48h后,GSK-3β-HA表达在转染组;并且在转染区域的神经元内异常过度磷酸化tau蛋白(在PHF-1表位)聚积;异常过度磷酸化的tau蛋白与GSK-3β共定位。结论:在体转染GSK-3β引起导致神经退行性疾病发生机制相关的tau蛋白异常过度磷酸化,这进一步证明了GSK-3β是tau蛋白异常过度磷酸化的一个关键激酶,并且可作为一个防治与tau相关的神经退行性疾病的靶点。 李宏莲 王少辉 廖晓梅 王小川 王群 王建枝关键词:糖原合成酶激酶3 TAU蛋白质类 磷酸化 褪黑素对IP诱导Tau过度磷酸化的保护作用 2004年 通过对大鼠海马双侧注射异丙肾上腺素 (IP)或同时注射褪黑素 ( 0 .1μg,1μg) ,利用免疫组化、免疫印迹和Morris水迷宫等指标 ,在整体上观察褪黑素对IP诱导的骨架蛋白Tau过度磷酸化和动物保留记忆损伤的保护作用 .结果显示 0 .1μg和 1μg剂量的褪黑素能明显降低IP引起的海马骨架蛋白TauSer396 / 40 4位点的过度磷酸化 ;1μg褪黑素可明显改善IP引起的动物保留记忆损伤 。 凌智群 廖晓梅 王建枝关键词:褪黑素 STAT3信号转导系统介导了CNTF对大鼠尾壳核出血后的神经保护作用 被引量:1 2004年 目的研究睫状神经生长因子(CNTF)在中枢神经元抗损伤中的作用及机制。方法对尾壳核出血大鼠进行CNTF治疗,观察海马信号转导和转录激活蛋白3(STAT3)含量及阳性神经元分布的变化。结果CNTF能显著增加尾壳核出血大鼠海马STAT3阳性神经元数量、海马STAT3含量。结论CNTF能通过促进STAT3的表达增强中枢神经元的抗损伤能力。 张蕲 张迎春 廖晓梅 田青 胡茂琼 王建枝关键词:CNTF STAT3 不同培养基对海马脑片活性及微管相关蛋白tau表达的影响 被引量:5 2005年 目的探讨在不同培养基条件下,不同年龄大鼠的海马脑片在长期培养过程中的活性改变及微管相关蛋白tau表达的动态变化。方法制备1、2、4和8周龄雄性Wistar大鼠海马脑片(400μm),分别使用minimumessentialmedium(MEM)和Dulbecco'smodifiedeaglemedium:nutrientmixture(DMEM/F12)两种不同的培养基进行培养。在培养的21d内以乳酸脱氢酶(LDH)法监测不同培养基条件下海马脑片活性的改变,并在不同时间点选取脑片以免疫印迹法检测tau蛋白含量的改变。结果在海马脑片的长期培养过程中,两种培养基对脑片活性的影响差异无显著性,而培养基DMEM/F12可使脑片中的tau蛋白更持久、更高量地稳定表达,尤其是2和4周龄鼠源海马器官型脑片。结论选取2或4周龄大鼠,应用培养基DMEM/F12更适合于脑片水平tau蛋白的相关研究,在此基础上可望建立阿尔茨海默病理想研究模型。 张迎春 廖晓梅 王建枝关键词:海马 脑片 乳酸脱氢酶