廖秀云
- 作品数：40 被引量：132H指数：8
- 供职机构：珠海出入境检验检疫局更多>>
- 发文基金：国家质检总局科技计划项目珠海市软科学研究计划项目广东省农业攻关项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学轻工技术与工程医药卫生更多>>
- 禽流感群特异性间接原位RT-PCR检测方法
- 2009年
- 从GenBank下载禽流感病毒(Auian in fluenza virus,AIV)NP基因序列,通过比对选取NP基因中较为保守的片段,设计1对引物,通过RT-PCR方法扩增270 bp的目的片段,经测序确认目的片段序列正确后,用地高辛标记扩增产物制备探针。在BSL-3实验室,用AIV人工感染鸡胚成纤维细胞和SPF鸡后,制作细胞涂片和组织石蜡切片,然后在经前处理后的细胞涂片和石蜡切片上进行原位RT-PCR,再与地高辛标记的探针进行原位杂交,对细胞和组织中的AIV进行检测和定位。研究结果表明,本方法能检测出约1μg/L质粒的DNA,并能特异性地在细胞涂片和石蜡组织切片中检测和定位AIV,且成纤维细胞感染病毒8 h后即可检测到阳性信号,具有良好的特异性和较高的敏感性,为动物组织中AIV的检测定位和致病机理研究提供了敏感、特异和更为直观的方法。
- 杨素陈博文秦爱建廖明薄清如廖秀云沙才华王娟任涛曹伟胜
- 关键词：禽流感细胞涂片石蜡切片
- TaqMan探针荧光PCR检测副猪嗜血杆菌方法的建立和应用被引量：5
- 2011年
- 为了建立基于TaqMan探针荧光PCR技术检测副猪嗜血杆菌的方法,本试验参考GenBank已发表的副猪嗜血杆菌(Hemophilus parasuis,HPS)转录起始因子infB基因序列,利用生物学软件Primer Express 2.0设计特异性引物和探针;并对副猪嗜血杆菌标准菌株提取DNA后进行PCR扩增,将产物测序鉴定后克隆到pMD18-T载体,再转化到大肠杆菌感受态细胞,细菌培养后对菌液进行PCR扩增,把产物测序鉴定后获得的重组质粒作为标准阳性对照;最后将建立的TaqMan探针荧光PCR方法进行灵敏度、特异性、稳定性试验。结果显示,该检测方法可以达到1μl 1.0×101拷贝数量级的灵敏度;另外,该方法可以将HPS和大肠杆菌O157、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、猪链球菌分开,特异性良好;稳定性试验显示,2次批内变异系数分别为0.65%和0.92%,批间变异系数为1.31%,稳定性良好。对口岸送检的56份猪肉和12份血浆蛋白粉样品进行检测,结果表明TaqMan探针荧光PCR方法和细菌分离方法的检测效果一致。
- 罗宝正王振全薄清如徐海聂沙才华廖秀云陈伟生
- 关键词：副猪嗜血杆菌荧光PCR
- 化学合成siRNA抑制H5N1亚型禽流感病毒在鸡胚成纤维细胞中的增殖
- 2013年
- 为研究RNA干涉对H5N1亚型禽流感病毒的增殖抑制作用,针对H5N1亚型禽流感病毒的NP和PA基因,设计4对siRNA干涉序列,并将其转染到鸡胚成纤维细胞,6h后接种H5N1亚型禽流感病毒液,在病毒感染后的16～56h内测定细胞上清中的病毒血凝价及观察细胞病变,并在病毒感染36h后检测NP、PA、HA和β-actin基因的mRNA水平。结果显示4对siRNA均能不同程度地抑制H5N1亚型禽流感病毒在鸡胚成纤维细胞中的增殖,但以PA为靶基因设计的一对干涉序列效果最优;实验还证实随着时间的延长,干涉效应逐渐减弱。本实验为研究RNA干涉技术防控禽流感提供了依据。
- 李儒曙于丹罗宝正薄清如徐海聂沙才华廖秀云
- 关键词：SIRNAH5N1亚型禽流感病毒鸡胚成纤维细胞增殖
- Taqman探针荧光PCR法检测熊源性成分被引量：2
- 2017年
- 为了对熊源性成分进行有效鉴定,本研究根据熊科动物线粒体DNA(mtDNA)序列,使用分子生物学软件Primer Express 3.0设计了一套特异性引物、探针,用以建立Taqman探针荧光PCR检测熊源性成分的方法。结果显示,所建立方法特异性强,15份熊属动物组织样品均出现特异性扩增曲线,20份阴性对照动物样品均未出现扩增曲线;方法灵敏度高,最低可以检测到10个拷贝数量级的重组质粒DNA,对熊胆粉稀释106倍后,仍可扩增出熊DNA;方法稳定性好,对相同的样品在不同时间进行2次重复检测,批内变异系数分别为0.88%、1.13%,批间变异系数为1.38%。结果表明,本研究建立的方法可应用于熊属动物组织及其加工品中的熊源性成分的检测。
- 邵建宏罗宝正薄清如赵福振帖丽莎徐海聂廖秀云彭玉芬陈敬
- 关键词：荧光PCR
- 五重PCR检测大肠杆菌O157∶H7菌体抗原和毒素基因被引量：8
- 2005年
- 针对 O1 5 7∶H7大肠杆菌 O抗原抗血清同多种细菌有交叉反应 ,而单一毒素基因并不是 O1 5 7∶ H7所独有这一特点 ,建立了五重和四重 PCR方法 ,同时检测大肠杆菌 O1 5 7∶ H7的 O抗原、H抗原和 4种毒素基因 ,可在较短的时间内检测、鉴定大肠杆菌 O1 5 7∶ H7,并有较高的特异性 ,解决了传统细菌检测方法耗时长、灵敏度低 。
- 薄清如周志江吴小伦徐海聂黄云君冯家望王小玉黄建珍陈静静潘文波廖秀云
- 关键词：大肠杆菌毒素基因
- 基因芯片鉴别诊断禽流感和新城疫病毒方法的建立和应用
- 薄清如罗宝正徐海聂廖秀云沙才华王小玉杨素陈静静侯亚琴
- 本研究建立了一种分型检测禽流感病毒(Avian Influenza Virus，AIV)并能同时区分鸡新城疫病毒（Newcastle disease virus，NDV）和鸡减蛋综合征病毒(Egg Drop Syndro...
- 关键词：
- 关键词：新城疫病毒基因芯片禽流感
- 口蹄疫VP1和NS诊断试剂盒的试应用及推广
- 潘文波徐海聂薛景山廖秀云杨素薄清如冯家望周思波陈静静
- 利用中牧股分公司和UBI公司研制生产的FMDV合成肽VP1和NS诊断试剂盒对珠海等地出口场猪血清、牛血清和人工发病猪血清、健康猪血清、免疫猪血清、免疫后攻毒猪血清进行检测，试验表明FMDV合成肽VP1和NS诊断试剂盒能较...
- 关键词：
- 关键词：口蹄疫合成肽琼脂免疫扩散试验
- 东南亚食用燕窝研究现状被引量：10
- 2018年
- 东南亚各国的食用燕窝为金丝燕筑巢时吐出并凝固的唾液,具有丰富的营养和药用价值,在国内自古被视为珍稀食材。随着燕窝产业的发展和经济水平的提高,食用燕窝逐渐平民化。与此同时,许多不法分子为谋取暴利采用化学漂白等方式进行掺假。2011年以来,正规渠道入境的燕窝先后爆发过"毒血燕"、"换码"、"虚标含量"等质量事件,其食用安全问题备受关注,各国对其成分、功效、生物活性、检测方法、法规标准等的研究也逐渐深入。本文从金丝燕的物种、燕窝的种类、产业链和相关法律法规的现状、燕窝的成分和功效、燕窝的真伪鉴定6个方面对食用燕窝进行全方位、多角度、深层次的综述,以期为下一步研究提供参考依据。
- 邵建宏丁琦王珊赵福振罗宝正廖秀云
- 关键词：掺假
- 食品中牛源性成分荧光PCR检测方法的建立被引量：4
- 2016年
- 目的:建立荧光PCR方法检测食品中牛源性成分。方法:本研究以牛线粒体保守基因序列设计特异性引物和探针,建立牛源性成分荧光PCR检测方法;并对方法特异性、灵敏度和稳定性进行评估。结果:该方法能够有效对牛源性成分进行快速检测,具有较的特异性强,灵敏度较高(检出限为0.0001%)。结论:该方法特异性强,灵敏度高,可以快速、准确检测畜肉食品中含有的牛源性成分。
- 沙才华黄海超谢筱筱廖秀云杨素
- 关键词：线粒体荧光PCR
- 施马伦贝格病毒套式RT-PCR检测方法的建立被引量：1
- 2016年
- 根据GenBank公布的施马伦贝格病毒S基因序列,设计特异性引物,构建施马伦贝格病毒S基因重组克隆质粒作为阳性对照,经各反应条件的优化以及特异性、敏感性和重复性试验,建立了施马伦贝格病毒套式RT-PCR检测方法。结果表明,本研究建立的套式RT-PCR方法可特异性的检测施马伦贝格病毒,且与BTV、EHDV、AKV、BVDV、IBRV等其他病毒的核酸不发生交叉反应。每个反应可检测到相当于6.65×102 copies/μL施马伦贝格病毒重组克隆质粒。与传统的病毒分离及血清学方法相比较,不但耗时短(仅需5h),而且费用低廉。本研究建立的套式RT-PCR方法具有特异、敏感、重复性好、快速、费用低廉等优点,是施马伦贝格病毒快速初筛的良好方法。
- 杨素黄海超陈轩许彩芸沙才华薄清如罗宝正廖秀云
- 关键词：施马伦贝格病毒S基因套式RT-PCR
