张殿朋
- 作品数：26 被引量：153H指数：8
- 供职机构：北京市农林科学院植物保护环境保护研究所更多>>
- 发文基金：北京市科技计划项目北京市自然科学基金北京市优秀人才培养资助更多>>
- 相关领域：农业科学生物学轻工技术与工程自动化与计算机技术更多>>
- 产紫青霉对南方根结线虫作用效果研究
- 蔬菜根结线虫病是为害我国蔬菜产量和品质的一种重要土传病害，每年由于根结线虫造成蔬菜减产达10％～25％，同时根结线虫的危害又导致了枯萎病、根腐病等土壤性真菌病害的加重，已成为当前蔬菜生产的一大障碍。我国拥有丰富的真菌物种...
- 董丹张涛涛吴慧玲张殿朋赵娟刘霆
- 关键词：南方根结线虫
- 青海固沙草根际微生态体系中微生物多样性分析被引量：4
- 2016年
- 青海固沙草(Orinus kokonorica)是生长于干旱、高海拔极端环境,特产于青海的一种优势种禾本科植物。从青海固沙草根际采集土壤,对样品中的微生物进行了分离鉴定及微生物多样性分析。共分离得到纯培养菌株232株,隶属于15个属、23个种。数量和种类较多的是细菌,共112株,分别隶属于9个属的12个种,占可培养微生物的70%,单胞菌属占绝大部分;其次为放线菌43株,6个种,占总微生物量的27%;另含有1株酵母菌和4株真菌。该根际微生态体系中,可培养微生物Simpson多样性指数D=0.703,Shannon-Wiener指数H=13.877,Shannon-Wiener均匀度指数E=1.766,多样性等级为Ⅰ级以上。该研究结果表明:青海固沙草极端生境微生态中的可培养微生物,不仅丰富多样,而且具有对极端环境的应变机制为寻找和开发极端生境微生态的功能微生物资源提供了参考。
- 李红晓张殿朋郝雅荞赵洪新
- 关键词：可培养微生物微生物多样性极端环境
- 植物病毒金免疫层析试纸条的研制和应用
- 本实验是将免疫层析和金标记技术结合起来，研究一种能够快速、简便、经济的方法来检测植物病毒。用提纯植物病毒免疫兔子和克隆病毒外壳蛋白基因然后原核表达，回收蛋白，再免疫兔子两种方法制备了烟草花叶病毒、李属坏死环斑病毒等病毒的...
- 张殿朋
- 关键词：植物病毒多克隆抗体胶体金免疫层析试纸条
- 文献传递
- Collimonas sp.ZL261蛋白酶基因的克隆、表达及其酶学特性被引量：5
- 2014年
- 分离自西藏色季拉山海拔4530 m高山草甸土壤的山冈单胞菌(Collimonas sp.)ZL261代谢产物具有很高的蛋白酶活性,为了明确其蛋白酶种类及其作用特点,本文采用限制性内切酶法构建了菌株ZL261的基因组文库,利用透明圈法筛选其胞外蛋白酶活性克隆,对其基因及蛋白结构进行了分析,进一步研究了该酶的表达和酶学特性。结果表明:该蛋白酶基因(命名为capro)包含一个长为1092 bp的完整开放阅读框(GenBank:KF992845),其编码蛋白由363个氨基酸组成;序列比对和同源性分析结果显示,该氨基酸序列与食真菌山冈单胞菌(Collimonas fungivorans)Ter331胞外蛋白酶序列(NC015856)相似性最高,为83%;一级、二级和三级结构分析均显示该蛋白含M35金属蛋白酶家族(EC 3.4.24.20)保守结构域。蛋白酶基因在大肠杆菌DH5α中异源表达获得了约38 kDa的目的蛋白。ZL261粗酶液对金属蛋白酶抑制剂EDTA敏感,最适作用pH值为7,最适温度30℃,在10℃时仍保持70%以上酶活力。综合分析可知,该蛋白酶为中性低温金属蛋白酶。具有较好的开发应用潜能。研究结果为微生物蛋白酶的开发提供了新型种质资源,也为探求不同生境微生物蛋白酶的系统进化关系提供了基础信息。
- 李洁琼张殿朋卢彩鸽吴慧玲于莉刘伟成
- 关键词：蛋白酶基因
- 解淀粉芽胞杆菌MH71摇瓶发酵培养基及发酵条件优化被引量：36
- 2015年
- 从黑龙江省漠河多年永冻土层采集的冻土样品中分离的拮抗菌解淀粉芽胞杆菌Bacillus amyloliquefaciens MH71,对多种植物病原真菌和细菌具有较强的拮抗作用。本研究主要以无菌滤液对番茄灰霉病菌的抑菌活性为检测指标,采用单因素试验筛选菌株MH71的最佳产抗菌物质培养基及最佳碳源、氮源和无机盐,运用Minitab软件,通过Box-Benhnken试验及响应面分析相结合的方法对该菌株产抗菌物质的发酵培养基配方和摇瓶发酵条件进行了优化。结果表明,菌株MH71产抗菌物质最佳培养基组成为玉米粉36.6 g/L、牛肉膏3.2 g/L、Na Cl 1.33 g/L、葡萄糖14 g/L、蛋白胨7 g/L、Mg SO40.4 g/L、K2HPO4 0.8 g/L、Ca CO3 8 g/L。最适发酵条件为培养温度30℃、摇床转速200 r/min、发酵起始p H 7.0、接种量3%、装液量100 m L/500 m L、发酵时间为72 h。在最佳培养基和培养条件下,菌株MH71的活菌数达到了2.1×109 CFU/m L,芽孢数为1.2×109 CFU/m L,同时对番茄灰霉病菌的抑菌能力较优化前提高了37.4%。
- 卢彩鸽董红平张殿朋王俊丽刘德文刘伟成
- 关键词：番茄灰霉病菌抗菌活性物质发酵条件优化
- 类芽孢杆菌Bg1抗真菌蛋白的分离及其特性分析被引量：5
- 2014年
- 为了明确类芽孢杆菌（Paenibacillus sp．）Bg1的主要抗真菌物质及其特性，本文利用抑菌圈法测定了Bg1抗菌蛋白在各种处理条件下抑菌活性的稳定性；通过60％硫酸铵沉淀、DEAE—Sephadex A50离子交换层析及Sephadex G100凝胶过滤层析进行了抗菌蛋白的分离纯化，以SDS-PAGE进行了其纯度检测。结果表明，28～100℃处理30min、4℃存放55d及在pH值3～7范围内菌株Bg1抗菌蛋白抑菌活性均无显著性变化，但pH值〉8显著影响其抑菌活性，蛋白酶处理则使其抑菌活性完全丧失；纯化后所得抗菌蛋白分子量约10KD。据此可知，类芽孢杆菌Bg1主要抗菌活性物质为低分子量蛋白，其对热和酸性条件及贮存时间稳定性好，具有进一步开发应用的潜能。
- 叶慧敏张殿朋刘霞于莉刘伟成
- 关键词：类芽孢杆菌抗真菌蛋白分离纯化稳定性分析
- 桃褐腐病菌拮抗酵母的筛选、鉴定及其抑菌活性初探被引量：4
- 2017年
- 以北京平谷桃果实表皮上分离得到的45株酵母菌为出发菌株,采用平板对峙法,筛选对桃褐腐病菌(Monilinia fructicola)具有较高拮抗作用的生防酵母菌。结果表明,共筛选出具有较好抑制效果的酵母菌6株,其中菌株MLL-9-1拮抗活性最强,对桃褐腐病菌的抑菌率达77.91%;活体筛选试验结果表明,该菌株对桃褐腐病的抑制率达50.30%。生防相关性状检测结果显示,该菌株能够产生蛋白酶,透明圈直径达30.5 mm,说明该菌主要通过分泌蛋白酶达到抑制病原菌的效果。经形态学、生理生化试验及26S r DNA序列分析,鉴定该菌为葡萄汁有孢汉逊酵母(Hanseniaspora uvarum)。
- 王晨张殿朋南立军卢彩鸽刘娅
- 关键词：桃褐腐病菌
- 葡萄灰霉病生防菌株的筛选及其拮抗机理初探被引量：14
- 2017年
- 以新疆哈密瓜、蟠桃及红枣中分离出的59株内生细菌为出发菌株,采用离体实验和活体实验,从中筛选出11株对葡萄灰霉菌具有较好抑制作用的菌株;经低温作用、农药耐受性及致病菌广谱性等复筛实验,从红枣中获得1株性能优良的目标菌株T2,该菌在0℃条件下对葡萄灰霉菌的抑菌率可达58.43%,农药耐受性达68.2%~98.4%,对致病菌具有广谱抗性,其中桃褐腐病菌和草莓灰霉菌的病原菌菌落直径均小于30 mm,葡萄炭疽菌病原菌菌落直径小于50 mm。经过形态、生理生化和16S r DNA同源性分析,确定菌株T2为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens),该菌主要依靠菌体本身和重寄生作用对葡萄灰霉菌发挥拮抗作用。
- 罗琳王其慧赵海霞张殿朋刘娅
- 关键词：葡萄灰霉病生物防治内生菌拮抗机理
- 解淀粉芽胞杆菌MH71抗菌物质理化特性及对番茄灰霉病菌的抑菌活性被引量：16
- 2016年
- 解淀粉芽胞杆菌Bacillus amyloliquefaciens MH71是一株高效广谱拮抗活性菌株,明确该菌株发酵液中活性物质的理化特性和抑菌活性,为解淀粉芽胞杆菌生物农药开发应用奠定坚实的基础。本研究在对菌株MH71抑菌活性物质理化特性研究的基础上,以番茄灰霉病菌为供试致病菌,探究了抗菌活性物质对番茄灰霉病菌的抑菌作用;采用酸沉淀和硫酸铵沉淀分别获得脂肽类和蛋白类活性物质,SDS–PAGE电泳和HPLC分别对活性物质进行检测。该菌活性物质具有较强的耐热性和p H适应性,100℃处理60 min和121℃处理30 min后抑菌活性分别为原有活性的88.98%和79.60%,在pH 3~11时均有抑菌活性,且对紫外线、蛋白酶K、胃蛋白酶和胰蛋白酶不敏感。该抗菌活性物质对番茄灰霉病菌菌丝的毒力测定结果表明,不同浓度发酵液处理的番茄灰霉病菌菌丝呈现出较多局部膨大或溢缩等异常菌丝。其发酵液经酸沉淀法得到抗菌脂肽类活性物质,经硫酸铵沉淀法得到抗菌蛋白,脂肽类的抑菌活性高于抗菌蛋白类物质,SDS–PAGE电泳检测,得到约40 k D的蛋白条带,HPLC检测表明该抗菌物质中有surfactin存在。
- 李红晓张殿朋赵洪新刘伟成卢彩鸽
- 关键词：抗菌物质理化特性番茄灰霉病菌抑菌活性
- 生防解淀粉芽胞杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)最新研究进展被引量：8
- 2016年
- 解淀粉芽胞杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)是与枯草芽胞杆菌相似,可产芽胞、革兰阳性(G+)、具有生防活性的益生细菌。其代谢过程中产生的抗菌物质种类多、抗菌谱广,其抗菌制剂或抗菌提取物具有无毒、无害、无残留、抑菌时效长等优点,可广泛应用于果蔬保鲜、果蔬生长期及采后微生物病害的生物防治,是极具开发价值的生防菌。本文从抗菌机理、抗性基因组成、基因工程菌构建、抗性产品开发及对微生物病害防治等几个方面,对解淀粉芽胞杆菌的研究及应用现状进行了归纳和总结,为其在农业生物工程中的规模化安全应用提供参考。
- 李红晓张殿朋卢彩鸽赵洪新
- 关键词：抑菌物质生防效果抗性基因
