张海波
- 作品数：4 被引量：18H指数：2
- 供职机构：上海海洋大学水产与生命学院更多>>
- 发文基金：江苏省自然科学基金国家高技术研究发展计划江苏省“青蓝工程”基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 凡纳滨对虾溶菌酶基因在大肠杆菌和酵母中的重组表达和活性检测
- 凡纳滨对虾溶菌酶（Litopenaeus vannamei lysozyme，LvLys）是机体先天免疫系统中一个重要的效应因子，参与机体多种免疫反应，在溶菌过程中形成了一个水解体系，破坏和消除侵入体内的病原，从而实现机...
- 张海波
- 关键词：凡纳滨对虾溶菌酶基因原核表达酵母表达
- 文献传递
- 凡纳滨对虾溶菌酶基因在毕赤酵母中的分泌表达和活性检测被引量：2
- 2010年
- 原核重组表达的凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)溶菌酶蛋白主要以包涵体形式存在,经变性和复性处理后活性仍较差。研究将凡纳滨对虾溶菌酶基因(Lvlyz基因)克隆至毕赤酵母分泌型表达载体pPIC9K中,电击转化毕赤酵母GS115细胞,经组氨酸营养缺陷培养基筛选和PCR检测获得转化子。对其进行连续甲醇诱导表达,利用SDS-PAGE和C端携带的6×His标签,对发酵液上清进行Western blot检测,结果表明19.3 kD左右的条带即是重组表达的溶菌酶蛋白。用溶壁微球菌平板抑菌法鉴定表达产物具有较强的抑菌能力。研究首次利用毕赤酵母真核表达系统实现对虾溶菌酶基因的可溶性表达,并且表达产物的活性良好。
- 卞曙光陈华新姜鹏张海波刘兆普秦松
- 关键词：凡纳滨对虾溶菌酶毕赤酵母分泌表达
- 溶菌酶和抗菌肽在对虾养殖中的应用被引量：3
- 2008年
- 张海波吴嘉敏谭洪新王兴强阎斌伦
- 关键词：对虾养殖业抗菌肽溶菌酶水质污染先天免疫
- 凡纳滨对虾溶菌酶基因在大肠杆菌中的表达和活性检测被引量：13
- 2009年
- 将凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)血淋巴细胞中提取的总RNA,经RT-PCR扩增溶菌酶基因(LvLys基因)的开放阅读框,将其克隆至pMD18-T并测序。用限制性内切酶BamHⅠ和HindⅢ双酶切取目的基因并与表达载体pET-28a(+)连接,构建重组质粒pET-28(a+)/LvLys,转移到BL21(DE3)中诱导表达。经亲和纯化得到凡纳滨对虾重组溶菌酶。抑菌活性检测表明重组溶菌酶对大肠杆菌TOP10有一定抑制作用。
- 张海波谭洪新王兴强吴嘉敏秦松陈华新阎斌伦
- 关键词：溶菌酶基因原核表达
