张竞文
- 作品数：15 被引量：17H指数：3
- 供职机构：宁夏医科大学基础医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金教育部“春晖计划”宁夏医科大学校级科研项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 高同型半胱氨酸血症小鼠额叶皮质神经元损伤及其Hes1/Notch1表达的初步研究
- 2021年
- 目的探讨高同型半胱氨酸血症神经细胞损伤及其可能机制。方法将ApoE^(-/-)小鼠分为高同型半胱氨酸血症实验组(HM)和ApoE^(-/-)小鼠对照组(ApoE^(-/-)),每组12只;ApoE野生型c57/6J小鼠为空白对照组(Con)。HM组小鼠采用高蛋氨酸饮食饲喂造成高同型半胱氨酸血症,Con组和ApoE^(-/-)组小鼠普通饮食饲喂。通过组织病理学、组织化学、TUNEL染色观察小鼠额叶皮质神经元变化,qPCR检测脑组织Hes1、Notch1表达。结果 HM组小鼠血浆总同型半胱氨酸为(18.87±6.79)μmoL/L,明显高于Con组和ApoE^(-/-)组(P<0.05);HE染色可见,HM组固缩神经元有所增加。经光密度测定可见,3组Nissl体平均光密度值差异无统计学意义(P>0.05)。TUNEL染色可见,Con组和ApoE^(-/-)组小鼠均偶见TUNEL阳性神经元,HM组中TUNEL阳性神经元比例明显增加(P<0.05);通过qPCR可见,HM组Hes1和Notch1基因mRNA表达明显高于Con组和ApoE^(-/-)组(P<0.05)。结论高同型半胱氨酸血症能够诱导额叶皮质神经元凋亡,可能涉及Hes1和Notch1表达的变化。
- 龙乾许贤瑞燕茹刘峰张特弟张竞文
- 关键词：高同型半胱氨酸血症神经元
- 胃癌BGC-823细胞增殖与NOTCH1和HES1表达的关系被引量：2
- 2015年
- 目的探讨HES1蛋白在胃癌细胞增殖中的作用。方法在5%CO2、37℃、饱和湿度条件下培养胃癌BGC-823细胞和肝干细胞系(LEPC),MTT法检测细胞增殖活性,免疫细胞化学检测HES1和NOTCH1表达。结果培养48h时,BGC-823和LEPC细胞生长良好,MTT比色法检测显示,BGC-823细胞组增殖能力明显强于LEPC组,BGC-823组培养24、48和72h的OD值(分别为0.67±0.17、1.02±0.14和1.22±0.24)均明显高于LEPC组(分别为0.36±0.16、0.35±0.07和0.38±0.14)(P均<0.05)。免疫细胞化学染色可见,少数BGC-823细胞核HES1阳性,比较多的BGC-823细胞核周胞质呈HES1阳性,少数细胞阳性着色见于细胞质和细胞核;HES1阳性以弥漫性表达为主,细胞质表达明显多于细胞核,巨细胞表达更加明显。LEPC组部分细胞HES1免疫组化染色阳性,阳性着色主要见于细胞核。在培养48和72h,BGC-823组HES1蛋白免疫细胞化学染色平均光密度值(OD)均明显高于LEPC组(P<0.05)。BGC-823大多数细胞NOTCH1阴性,少数阳性。LEPC组可见部分细胞NOTCH1免疫组化染色阳性。在培养24、48和72h,BGC-823组NOTCH1平均OD值与LEPC组的差异无统计学意义(P>0.05)。结论 HES1高表达与BGC-823细胞增殖能力较强有关。
- 张竞文徐方胡以平秦憬张建中
- 关键词：BGC-823细胞
- Notch1/Hes1信号通路在调控低分化胃腺癌细胞钙离子和侵袭能力中的作用
- 2021年
- 目的探讨Notch1/Hes1信号通路对胃癌细胞钙离子水平的影响及其与侵袭的关系。方法采用免疫组化法检测32例原发性低分化胃腺癌组织及32例癌旁正常组织中Notch1、Hes1、Calpain-1和E-cadherin蛋白的表达。将MGC-803细胞分为对照组、Lipofectamine 2000组、Notch1 siRNA组和Hes1 siRNA组,采用Transwell法对比分析Notch1和Hes1基因沉默MGC-803细胞侵袭能力。应用Flou-4实验检测细胞钙离子水平。运用Western blot法检测Notch1、Hes1、Calpain-1和E-cadherin蛋白的表达。结果 32例低分化胃腺癌组织中Notch1、Hes1、Calpain-1表达(93.75%、96.88%、96.88%)明显高于癌旁正常组织(21.88%、18.75%、25.0%)(P<0.05),E-cadherin表达(25.0%)明显低于癌旁正常组织(93.75%,P<0.05)。MGC-803细胞Transwell和Flou-4实验可见,Notch1 siRNA组和Hes1 siRNA组癌细胞的迁移量明显低于对照组(P<0.05),癌细胞钙离子水平也明显低于对照组(P<0.05)。Western blot检测显示,Notch1 siRNA组和Hes1 siRNA组癌细胞Calpain-1和vimentin的相对含量低于对照组(P<0.05),而E-cadherin相对含量高于对照组(P<0.05)。结论低分化胃腺癌细胞侵袭能力与Notch1/Hes1蛋白及细胞钙离子有关,Notch1/Hes1信号通路参与Calpain-1相关的细胞钙离子调控。
- 张竞文黄菱燕秦憬吕怀盛景丽
- 关键词：NOTCH1HES1钙离子
- 高同型半胱氨酸血症对ApoE^(-/-)小鼠脑组织的损伤
- 2023年
- 目的:探讨高同型半胱氨酸血症(HHcy)对小鼠神经损伤的病理学基础。方法:ApoE^(-/-)小鼠分为对照组(control)、HHcy组(HHcy)和HHcy、叶酸及维生素B12干预组(MFB)。通过高蛋氨酸饮食诱发HHcy小鼠模型,采用组织学、组织化学、电子显微镜等观察小鼠脑组织结构和神经细胞超微结构变化,免疫组化染色观察nestin和一氧化氮合酶(NOS)表达。结果:高蛋氨酸饮食导致ApoE^(-/-)小鼠血浆同型半胱氨酸水平显著升高,脑组织基本结构未见明显异常,对照组、HHcy组和MFB组之间尼氏体平均光密度值无显著性差异。免疫组化染色可见,对照组、HHcy组和MFB组脑微血管分布均匀,未见明显差异。超微结构可见,HHcy组脑毛细血管内皮细胞出现多个微绒毛样突起;HHcy组神经元自噬体及空泡化线粒体显著多于对照组和HHcy组(P<0.05)。HHcy组和MFB组TUNEL阳性细胞比例明显多于对照组(P<0.05)。免疫组化可见,HHcy组室管膜下区nestin阳性细胞比例明显低于对照组(P<0.05),MFB组与对照组及HHcy组之间nestin阳性细胞比例无显著差异;与对照组相比,HHcy组和MFB组额叶皮质nNOS阳性细胞比例明显降低(P<0.05),iNOS阳性细胞比例显著升高(P<0.05)。结论:高同型半胱氨酸可诱导小鼠神经细胞氧化应激、自噬和凋亡增加、室管膜下区神经干细胞储备减少。
- 张竞文燕茹马艳梅杨兰米晓娟田英丛广志
- 关键词：自噬神经细胞高同型半胱氨酸血症超微结构小鼠
- ACEF评分对初发急性心肌梗死患者院内MACCE的预测价值
- 2023年
- 目的 探讨ACEF评分对初发急性心肌梗死(AMI)患者行经皮冠状动脉介入(PCI)治疗术后住院期间发生主要不良心脑血管事件(MACCE)风险的预测价值。方法 回顾性选取2019年10月至2022年6月于宁夏医科大学总医院就诊,首次诊断为AMI并行PCI治疗的患者1 606例,根据患者住院期间是否发生MACCE分为MACCE组(n=218)及非MACCE组(n=1 388)。比较两组患者的临床基线资料、实验室指标、ACEF评分、GRACE评分、冠脉造影及介入治疗等指标,运用多因素Logistic回归分析初发AMI患者行PCI治疗术后住院期间发生MACCE的危险因素,采用受试者工作特征曲线(ROC)评价ACEF评分的预测价值。结果 与非MACCE组患者相比,MACCE组患者年龄大,两组术前心率、舒张压、收缩压、Killip分级、白细胞计数、中性粒细胞相对值、血肌酐、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、三酰甘油(TG)、N末端脑钠肽前体(NT-proBNP)、肌钙蛋白I(cTnI)、射血分数、左心室舒张末期内径、节段性室壁运动异常比例、ACEF评分以及GRACE评分等指标的差异均有统计学意义(P均<0.05)。多因素分析结果显示,心率(OR=1.022)、LDL-C(OR=1.285)、TG(OR=1.269)、cTnI(OR=1.028)、NT-proBNP(OR=1.016)、ACEF评分(OR=1.420)和GRACE评分(OR=1.014)是初发AMI患者PCI术后住院期间MACCE发生的独立影响因素(P均<0.05)。ROC分析显示:ACEF评分预测AMI患者PCI术后住院期间MACCE的最佳截断值为1.13,曲线下面积(AUC)为0.773,灵敏度和特异度分别为80.30%和63.40%。GRACE评分的最佳截断值为119.50,AUC为0.693,灵敏度为71.10%,特异度为55.90%。ACEF评分预测精度优于GRACE评分(95%CI:0.036~0.121,P<0.001)。结论 ACEF评分和GRACE评分是AMI患者PCI术后住院期间MACCE发生的独立预测因素,并且ACEF评分的预测价值优于GRACE评分。
- 何静何静张竞文张国山丛广志马志兰贾绍斌
- 关键词：急性心肌梗死
- REV3基因联合抗癌药物对SW-480细胞的影响被引量：1
- 2012年
- 目的探讨REV3基因低表达联合抗癌药物对人结肠癌细胞(SW-480)增殖和凋亡的影响。方法利用RNAi技术降低REV3基因在SW-480细胞中的表达,以实时荧光定量PCR和免疫细胞化学检测REV3表达量的降低情况,选择低表达效率具有统计学意义的细胞作为实验组细胞,再用抗癌药物作用48h后运用MTT实验和流式细胞仪,对实验组和对照组细胞进行细胞增殖和凋亡变化情况的检测。结果与空白对照组相比,REV3基因低表达或抗癌药物(顺铂或槐定碱)单独作用均能促进SW-480细胞凋亡并抑制其增殖(P<0.01);实验组内,与药物空白组相比,REV3基因低表达的同时再联合一种抗癌药物(顺铂或槐定碱),对SW-480细胞凋亡和增殖的作用较单一因素更加显著;若将三者联合则比以上任一两种联合作用效果更为显著,以上结果均具有统计学意义(P<0.05)。结论 REV3基因低表达、顺铂、槐定碱或这三因素两两联合均可促进结肠癌SW-480细胞的凋亡并抑制其增殖,若三者同时联合作用效果更加显著,提示"基因+药物"联合抑癌具有协同增效的作用。
- 黄金娟隋御李元杰金彩霞张竞文贾伟李利坚周翔徐方
- 关键词：RNAI技术SW-480流式细胞仪
- 临床医学专业留学生医学细胞生物学BOPPPS式教学法实践被引量：3
- 2021年
- 在开展线上线下结合的新医科教学形势下,强化留学生教学质量具有重要意义。宁夏医科大学医学细胞生物学课程以BOPPPS式教学法模型为指导,在临床医学专业留学生医学细胞生物学线上线下相结合课程教学中进行了实践。文章简要分析了BOPPPS在课程教学中的经验和存在的问题,为提高留学生教育质量提供参考。
- 张竞文党洁焦海燕徐方
- 关键词：医学细胞生物学
- 毛状分裂增强子1诱导肝干细胞向胆管细胞的分化
- 2023年
- 目的探讨毛状分裂增强子1(hairy enhancer of split 1,Hes1)调控肝干细胞(liver epithelial progenitor cells,LEPCs)向胆管细胞分化的作用。方法将pTRE2hyg-Hes1和pTRE2hyg-EGFP-Hes1转染LEPCs,不同浓度强力霉素(doxycycline,DOX)诱导Hes1的表达。通过Western blotting、PCR、RT-PCR、Real-time PCR、免疫细胞化学和免疫荧光技术检测相关分子表达。以谷胱甘肽合成酶(glutathione synthetase,Gss)作为肝细胞分化的标记,以角蛋白19(keratin 19,Krt19)和肝核因子1β(hepatic nuclear factor 1β,HNF1β)为胆管细胞分化标记。结果RT-PCR和Real-time PCR检测结果显示,随着DOX浓度的增加,Hes1在LEPCs细胞中的表达逐渐增高,当DOX浓度为10μg/mL时,Hes1表达是未加DOX时的11.21倍,第5天Hes1的表达处于高峰,持续到第7天;Western blotting检测结果显示HES1蛋白表达也随着DOX浓度的增高而有所增加,HES1表达明显高于未经处理的LEPCs(P<0.05);免疫细胞化学染色显示,转染了pTRE2hyg-Hes1的细胞98%以上呈阳性染色,见于细胞核和细胞质。当Hes1在LEPCs细胞中表达上调后,Gss表达有所下降,Krt19和HNF1β表达增加。结论在pTet-on和pTRE2hyg-Hes1双转染的LEPCs中,Hes1上调可诱导LEPCs分化为胆管细胞。
- 张竞文于兵徐方李亚宁胡以平
- 关键词：肝干细胞胆管细胞角蛋白19谷胱甘肽合成酶
- 高同型半胱氨酸通过Notch1/Hes1信号通路促进HT22细胞自噬和凋亡
- 2023年
- 目的探讨高同型半胱氨酸(HHcy)引起神经细胞损伤的相关机制。方法采用HT22细胞,分为空白对照组(简称0组),高同型半胱氨酸组(Hcy 100μmol/L,简称100组),高同型半胱氨酸维生素B干预组(Hcy 100μmol/L+叶酸+维生素B12,简称100+fv组),空白对照+叶酸+维生素B12组(简称0+fv组)。通过透射电镜和流式细胞术观察自噬及凋亡;Western blotting、Real-time PCR检测Hes1、Hes5、Notch1、Jagged1、Bcl-2、Bax、P62、LC3II/LC3I表达。结果培养48 h后,高同型半胱氨酸组(100组)中死亡细胞明显增加(P<0.05)。流式细胞检测结果显示,高同型半胱氨酸组凋亡细胞比例均高于0组、100+fv组和0+fv组(P<0.05)。透射电镜观察显示,在高同型半胱氨酸组,线粒体肿胀、空泡化,自噬体增加。Western blot显示,在高同型半胱氨酸组,Bax/Bcl-2比值明显高于对照组和100+fv组(P<0.05);P62相对值明显低于对照组(P<0.05);LC3II/LC3I比值明显高于对照组和100+fv组(P<0.05);HES1、HES5、Notch1和Jagged1蛋白表达明显低于对照组(P<0.05)。Real-time PCR检测结果显示,在高同型半胱氨酸组,LC3 mRNA、Beclin1 mRNA明显高于对照组和100+fv组,P62mRNA明显低于100+fv组(P<0.05);Hes1 mRNA和Hes5 mRNA明显低于对照组、100+fv组和0+fv组(P<0.05)。Hes1 siRNA干扰后,Hes1和Jagged1表达量明显低于对照组,Notch1表达量无显著性差异(P>0.05)。结论高同型半胱氨酸能诱导HT22细胞自噬和凋亡增加,伴有Hes1和Jagged1基因表达下调。
- 张竞文何静米晓娟许贤瑞田英燕茹
- 关键词：同型半胱氨酸细胞自噬凋亡NOTCH1HES1JAGGED1
- 通过Tet-on系统研究Hes1基因在调控肝干细胞胆向分化中的作用
- 目的：Hes1基因在肝干细胞胆向分化中发挥重要作用，但其具体的作用机制尚不清楚。本研究利用Tet-on真核表达系统，构建了连接目的基因Hes1的载体，在肝干细胞系LEPCs（LiverEpitheliaProgenito...
- 张竞文
- 关键词：肝干细胞
- 文献传递
