张蓉
- 作品数：9 被引量：22H指数：3
- 供职机构：广州军区广州总医院更多>>
- 发文基金：广东省医学科学技术研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 代谢型谷氨酸受体4的真核表达及其在乳腺癌细胞增殖中的作用被引量：2
- 2017年
- 目的:建立代谢型谷氨酸受体4(mGluR4)在乳腺癌细胞MCF-7中高表达的模型,探索mGluR4的亚细胞定位及其在乳腺癌增殖中的作用。方法:提取MCF-7细胞总RNA并逆转录为cDNA;PCR扩增mGluR4基因;利用无缝克隆技术快速构建以pENTER为载体的mGluR4重组表达质粒;通过Western印迹和免疫荧光实验检测mGluR4在MCF-7细胞中的表达及定位;利用CCK8实验观察mGluR4对MCF-7细胞增殖的影响。结果:构建了能够在MCF-7细胞中高表达的mGluR4真核表达质粒,免疫荧光结果显示mGluR4定位于细胞膜和细胞质,CCK8实验表明高表达mGluR4显著促进乳腺癌细胞的增殖能力。结论:为探索mGluR4的相关功能制备了必要工具,为研究mGluR4在乳腺癌增殖中的分子机制奠定了基础。
- 肖斌陈丽丹孙朝晖廖扬杭建峰陈建芸张蓉李林海
- 关键词：乳腺癌真核表达增殖
- 基于Crispr/Cas9技术构建真核细胞激酶敲除文库质粒被引量：2
- 2017年
- 目的拟靶向细胞内一群重要的信号转导因子—激酶,利用CRISPR/Cas9技术构建真核细胞敲除文库质粒,并探讨其构建方案。方法拟靶向编码人源激酶蛋白的507个基因开放阅读框,针对每个基因片段设计10个作用靶点,通过芯片法合成引物库(oligo pools)后,将引物从芯片上洗脱下来;合成的引物模板序列经PCR扩增、割胶回收后,与Cas9慢病毒载体连接,电转化至感受态细胞并提取质粒;质粒转化至Stbl3感受态细胞后,随机挑取单克隆进行摇菌,并送测序。结果 (1)对选取的507个激酶基因进行GO分析,发现细胞激酶广泛参与各种重要的细胞信号通路;(2)以oligo pool为模板,利用合成的通用引物进行PCR扩增,得到大小约为140 bp的条带,符合预期;(3)在鉴定的40个文库质粒克隆中,共有34个克隆样品测序成功,其中25个样品与设计的目标序列完全一致,9个样品存在一定引物合成突变。部分克隆存在摇菌失败、测序无信号或双峰等因素。结论构建好的CRISPR/Cas9激酶敲除文库可广泛用于筛选介导细胞增殖、转移、耐药、自噬等表型的重要激酶,为阐明激酶在疾病发生发展中的作用奠定基础。
- 肖斌全静雯陈丽丹杭建峰张卫云张蓉廖扬陈建芸孙朝晖李林海
- 关键词：基因敲除激酶高通量
- 一种双联隐血试剂的临床应用被引量：7
- 2005年
- 目的了解免疫法、化学法、双联试剂法测定粪便隐血(Ob)的差异。方法分别用上述三法对100例门诊患者和30例确诊为上消化道出血的柏油样便进行检测。结果以化学法阳性为参照,100例门诊患者中免疫法的首次检出率为81%,续检率100%,双联试剂法一次检出率为100%;30例上消化道出血患者粪便,免疫法首次检出率60%,续检率为97%,双联法的一次检出率为100%。结论双联试剂法避免了免疫法、化学法造成的假阴性、假阳性。
- 张云虎张蓉柯美津涂倩
- 关键词：粪便隐血试验免疫法化学法
- 两种血细胞分析系统测定结果的可比性研究被引量：3
- 2013年
- 目的探讨不同血细胞分析系统间测定结果的可比性。方法参考美国临床实验室标准化协会(CLSI)的EP9-A2文件,以已经过比对的、可溯源的XT-4000i血细胞分析系统为目标,用患者新鲜全血对XS-800i血细胞分析系统的白细胞(WBC)、红细胞(RBC)、血红蛋白(Hb)、血小板(PLT)4项参数测定结果进行比对,计算两个系统之间的相对偏差(SE%),以美国临床实验室修正法规(CLIA′88)规定的室间质量评价允许误差(TEa)范围的1/2为标准,判断测定结果的可比性。结果两个血细胞分析系统各项目的批内精密度和批间精密的变异系数均不大于5%,显示两个分析系统重复性好、在试验期间性能稳定。在仪器的偏倚评估和可比性评价方面,检测系统的WBC、PLT在低值时1/2CLIA′88TEa
- 廖扬张蓉石玉玲
- 关键词：血细胞计数
- 对小干扰RNA长期作用HBV转基因小鼠抑制乙肝病毒复制的评价被引量：1
- 2014年
- 目的:探讨小干扰RNA长期作用HBV转基因小鼠对抑制乙肝病毒复制的评价。方法:siRNA表达载体经尾静脉注射转染HBV转基因小鼠,设立特异性siRNA组(pSilencer5.1/C2、pSilencer4.1/C2、pSilencer3.1/C2)、PBS对照组和阴性质粒对照组(n=10)。在注射后第6天、21天、1个月、3个月、6个月和9个月的不同时间经其内眦静脉采血,采用化学发光法定量检测小鼠血清中HBsAg水平,实时荧光定量PCR法检测HBV-DNA水平。结果:siRNA长期作用机体可使转基因小鼠血清HBsAg和HBV-DNA水平显著降低,特异性siRNA组与PBS对照组相比,差异有显著统计学意义(P<0.05)。而阴性质粒对照组与PBS组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:基于载体的特异性siRNA长期作用HBV转基因小鼠可抑制HBV的复制和表达,该抑制作用是特异性的。
- 张卫云孙朝晖任广立石玉玲李薇张蓉唐荣芝
- 关键词：小干扰RNAHBV转基因小鼠乙肝病毒
- 小干扰RNA长期作用乙型肝炎病毒转基因小鼠对机体免疫系统的影响
- 2014年
- 目的:探讨小干扰RNA(siRNA)长期作用乙型肝炎病毒(HBV)转基因小鼠对机体免疫系统的影响。方法:siRNA表达载体经微静脉注射转染HBV转基因小鼠,设立特异性siRNA组(pSilencer4.1/C2)、PBS对照组和正常BALB/c小鼠组(n=10);分别于注射后1、3、6、9和12个月经其内眦静脉采血,采用散射比浊法测定IgG、IgA、IgM水平的变化,ELISA测定细胞因子IL-2、IL-4、IL-6和IFN-γ,流式细胞术检测小鼠外周血CD4+和CD8+T淋巴细胞亚群。结果:pSilencer4.1/C2长期作用转基因小鼠后可以改善机体的先天免疫反应,转基因小鼠机体内的体液免疫和细胞免疫水平较治疗前均有所上调,高于PBS组,几乎接近正常BALB/c小鼠组。结论:pSilencer4.1/C2长期作用转基因小鼠可以上调机体的先天免疫,可为以后免疫疫苗提供应用时机。
- 张卫云石玉玲孙朝晖任广立张蓉唐荣芝
- 关键词：小干扰RNA乙型肝炎病毒转基因小鼠免疫系统
- 人附睾蛋白4与血清CA125联合检测在卵巢癌诊断中的应用价值被引量：7
- 2013年
- 目的:探讨人附睾蛋白4(HE4)和CA125联合检测在上皮性卵巢癌临床诊断中的应用价值。方法:用化学发光法测定51例卵巢癌患者、64例卵巢良性疾病患者和50例健康对照者血清中的HE4和CA125水平,并对结果进行比较分析。结果:卵巢癌组血清中HE4和CA125水平均显著高于卵巢良性肿瘤组和健康对照组,差异有统计学意义(P<0.05),卵巢良性肿瘤组与健康对照组比较无显著性差异;HE4在早期卵巢癌中的阳性率高于CA125,两者联合检测可提高卵巢癌诊断的阳性率;卵巢癌组联合检测ROC曲线下面积大于单项检测曲线下面积。结论:联合检测HE4和CA125有助于卵巢癌的早期诊断。
- 张卫云孙朝晖李薇张蓉
- 关键词：上皮性卵巢癌CA125
- Roche Cobas501全自动生化分析仪对AST分析测量范围的测定
- 2011年
- 当实验室新使用一种试剂时,除必须对其进行对比分析和偏倚评估外,以明确偏倚是否在允许范围内[1-2],还必须确定其分析测量范围,因分析测量范围宽窄对于定量检测的临床化学分析方法极为重要[3]。
- 张蓉廖扬石玉玲
- 关键词：生化分析仪谷草转氨酶
- 一种双联隐血试剂的临床应用
- 目的了解免疫法、化学法、双联试剂法测定OB的差异。方法分别用免疫法、化学法、双联试剂法对门诊100例就诊者和30例确诊为上消化道出血的柏油样便进行检测。结果以化学法阳性为参照,100例门诊就诊者患者免疫法的首次检出率为7...
- 张云虎张蓉柯美津涂倩
- 文献传递
