徐慧
- 作品数：17 被引量：67H指数：6
- 供职机构：北京市农林科学院畜牧兽医研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金北京市科委科技计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 副猪嗜血杆菌EZ-Tn5转座子插入突变体库的构建及减毒株的筛选被引量：5
- 2011年
- [目的]获得副猪嗜血杆菌减毒株。[方法]应用转座子技术构建转座子插入突变体库,卡那抗性筛选阳性菌株,PCR扩增卡那特异片段去除假阳性,小鼠感染试验检测突变株毒力,并对获得的减毒株进行生物学特性检测。[结果]所获得减毒突变菌株具有与野毒株相似的增殖能力,传代后毒力稳定,遗传学特性稳定。[结论]该研究结果为进一步探讨HPS毒力因子、致病机制奠定了基础。
- 贺云霞徐慧叶飞孙慧玲王宏俊龚玉梅张莉黄秀芬张培君
- 关键词：副猪嗜血杆菌转座子突变体库减毒株
- 溶血性曼氏杆菌PCR试剂盒的研究
- 溶血性曼氏杆菌是导致牛、羊呼吸道传染病的一种病原菌,为快速、准确诊断由溶血性曼氏杆菌导致的疫病,在建立溶血性曼氏杆菌PCR诊断方法的基础上,进行了溶血性曼氏杆菌PCR诊断试剂盒的研究。研究内容包括特异性试验、敏感性试验、...
- 徐慧张培君韦莉龚玉梅王宏俊孙惠玲施蕾
- 文献传递
- 副猪嗜血杆菌外膜蛋白P5基因的克隆和表达被引量：7
- 2010年
- 副猪嗜血杆菌病(Haemophilus parasuis)是规模化猪场的重要细菌性疾病之一。对已发表的HPS外膜蛋白P5序列进行相关序列分析,设计合成引物,以HPS血清5型基因组为模板,通过PCR扩增HPS外膜蛋白P5编码基因,获得1 116 bp的预期基因片段。该基因编码372个氨基酸的蛋白质,预测分子量大约为41 kDa,利用基因工程的方法将该基因片段定向克隆至表达载体pGEX-6p-1中,诱导表达后的分子量约为67 kDa。该研究为制备亚单位疫苗和诊断试剂奠定了基础。
- 叶飞张培君田德雨徐慧孙慧玲王宏俊龚玉梅贺云霞
- 关键词：副猪嗜血杆菌克隆
- 副猪嗜血杆菌PCR诊断试剂盒的研制及初步应用被引量：4
- 2009年
- 在特异性和敏感性试验的基础上,组装副猪嗜血杆菌PCR诊断试剂盒,进行批间和批内试剂盒的检测、试剂盒在不同温度条件下的保存期试验等。结果表明,试剂盒特异性好、敏感性高,批内和批间的试剂盒无差异,试剂盒在-20℃可保存30个月,4℃可保存12个月。适用于不同地区、不同条件的实验室快速检测副猪嗜血杆菌。
- 龚玉梅佟瑞平韦莉徐慧孙惠玲王宏俊张培君
- 关键词：副猪嗜血杆菌聚合酶链反应试剂盒
- 副猪嗜血杆菌aroA基因自杀载体的构建
- 2011年
- 为了构建副猪嗜血杆菌aroA基因插入突变自杀载体，试验采用自杀质粒介导的同源重组方法首先构建了自杀质粒pSD，根据副猪嗜血杆菌aroA基因设计PCR特异性引物，上游引物5’末端~13BamHI位点，下游引物5’末端加SalI位点，
- 贺云霞徐慧叶飞
- 关键词：副猪嗜血杆菌自杀特异性引物质粒介导插入突变基因设计
- 副猪嗜血杆菌15个血清型标准分离株对小鼠毒力的研究被引量：8
- 2011年
- 为了确定Balb/c小鼠是否适合作为副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,HPS)的试验动物模型,试验用1～15血清型HPS标准菌株感染Balb/c小鼠,每只小鼠接种量为1.0×109 cfu。结果表明:用血清型1,2,5,10,12,13,14接种的5只小鼠均死亡4只,用血清型4,15接种的5只小鼠分别死亡2,3只,用血清型3,6,7,8,9,11接种的5只小鼠均没有死亡;各血清型的毒力与猪体试验的结果基本相符。说明Balb/c小鼠适合作为副猪嗜血杆菌的试验动物模型。
- 贺云霞徐慧叶飞孙慧玲王宏俊龚玉梅张莉黄秀芬张培君
- 关键词：副猪嗜血杆菌标准菌株小鼠毒力
- 传染性支气管炎病毒抗原模拟表位在大肠杆菌鞭毛上的展示
- 2008年
- 目的:进一步验证通过噬菌体肽库筛选得到的2个传染性支气管炎病毒(IBV)抗原模拟表位在脱离噬菌体后仍具有与IBV抗体结合的生物学活性。方法:应用基因工程技术合成2个IBV抗原模拟表位(KSPKHSSSALHF和SⅡQMNLHR PTS)的编码碱基序列,将其分别插入质粒pFliTrx,构建重组展示载体p1和p2,并分别转化大肠杆菌GI826,形成展示IBV模拟抗原表位肽的重组菌F1和F2,进行体外抗原抗体反应。结果:体外抗原抗体反应试验表明,重组菌F1与F2可以与IBV阳性鸡血清特异性结合。结论:提示得到的2个抗原模拟表位在脱离噬菌体后,仍具有与IBV抗体结合的生物学活性,在研制IBV新型疫苗和诊断试剂方面具有潜在的应用价值。
- 安烨王宏俊徐慧龚玉梅张培君
- 关键词：传染性支气管炎病毒抗原表位大肠杆菌
- 溶血性曼氏杆菌PCR诊断试剂盒的研究
- 目的在溶血性曼氏杆菌PCR诊断方法研究的基础上,研制出溶血性曼氏杆菌PCR诊断试剂盒。方法用同一批次材料进行批内试剂盒比较试验,用不同批次材料进行批间试剂盒比较试验;将试剂盒保存于-20℃和4℃,每3个月检测一次。结果批...
- 徐慧韦莉佟瑞平龚玉梅王宏俊孙惠玲张培君
- 关键词：PCR试剂盒
- 文献传递
- 溶血性曼氏杆菌PCR检测试剂盒的研制及初步应用被引量：8
- 2009年
- 在溶血性曼氏杆菌PCR检测方法研究的基础上,进行溶血性曼氏杆菌PCR检测试剂盒的研究及初步应用。结果表明,试剂盒特异性好,批内和批间的试剂盒无差异;试剂盒在-20℃可保存30个月,4℃可保存12个月;应用试剂盒从1 000多份临床样品中筛选分离到6株溶血性曼氏杆菌。
- 徐慧韦莉佟瑞平龚玉梅王宏俊孙惠玲张培君
- 关键词：PCR试剂盒
- 副猪嗜血杆菌EZ-Tn5转座子插入突变体库的构建及减毒株的筛选(英文)被引量：1
- 2011年
- [目的]获得副猪嗜血杆菌减毒株.[方法]应用转座子技术构建转座子插入突变体库,卡那抗性筛选阳性菌株,PCR扩增卡那特异片段去除假阳性,小鼠感染试验检测突变株毒力,并对获得的减毒株进行生物学特性检测。[结果]所获得减毒突变菌株具有与野毒株相似的增殖能力,传代后毒力稳定,遗传学特性稳定。[结论]该研究结果为进一步探讨HPS毒力因子、致病机制奠定了基础。
- 贺云霞徐慧叶飞孙慧玲王宏俊龚玉梅张莉黄秀芬张培君
- 关键词：副猪嗜血杆菌转座子突变体库减毒株
