徐珍
- 作品数：7 被引量：9H指数：2
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- P2X_2和P2X_4受体的调制
- 2010年
- 徐珍张玉芹
- 关键词：P2X4受体ATP受体调制能源物质P2受体
- 维生素C对非洲爪蟾卵母细胞ATP-激活电流的增强作用
- 2010年
- 目的研究维生素C对非洲爪蟾卵母细胞内源性ATP受体激活电流(IATP)的调制作用。方法采用双电极电压钳技术,记录细胞外液中加入不同浓度维生素C时,对外加ATP所引起的卵母细胞膜IATP的影响。结果 10-4～3×10-2mol/L浓度的维生素C对10-4mol/LIATP呈增强效应,其中以3×10-3mol/L维生素C对IATP(尤其是D1部分)的增幅最大,可使IATP(D1)幅值增加(72.1±6.5)%,显著高于对照值(P<0.01);并使IATP量-效曲线左上移,但并不改变反应的最大幅值。结论本实验表明维生素C对ATP-激活电流的调制作用呈明显的增强效应,这种效应可能是通过对P2X受体-通道复合体活性调节的结果。而维生素C对不同的ATP受体亚型分别产生何种影响,还有待于进一步的研究。
- 聂永莉张玉芹徐珍
- 关键词：维生素C爪蟾卵母细胞
- 镉对P2X4受体介导的ATP-激活电流的影响及其特征
- 2012年
- 目的:研究镉对P2X4嘌呤受体介导的ATP-激活电流的影响及其特征。方法:将编码大鼠P2X4受体的cDNA在体外转录成cRNA,通过显微注射技术将该cRNA注入非洲爪蟾卵母细胞中进行表达。应用全细胞双极电压钳技术研究镉对P2X4受体介导的ATP-激活电流(IATP)的影响。结果:①在一定浓度范围内,镉可逆性地增强爪蟾卵母细胞表达的P2X4受体介导的ATP-激活电流。当镉的浓度为30μmol/L时,对ATP-激活电流的增强作用最大,超过30μmol/L时,随着镉浓度的增加,ATP-激活电流反而呈现抑制效应。②10μmol/L镉可使ATP量-效曲线左移,EC50从(17.1±1.5)μmol/L降低到(9.8±1.8)μmol/L(n=6,P<0.01),Hill系数从1.14±0.13提高到1.57±0.36;③镉对ATP-激活电流的增强作用没有电压依赖性;④当镉的孵育时间为120 s时,对ATP-激活电流增强作用最大。结论:镉增强P2X4受体介导的ATP-激活电流是可逆的,具有浓度依赖性、时间依赖性、无电压依赖性。这种作用可能是通过对P2X4受体的变构调节引起的。
- 张玉芹田卫华彭芳徐珍聂永莉
- 关键词：镉P2X4受体爪蟾卵母细胞
- 钴对表达在爪蟾卵母细胞上P2X_4受体介导的ATP-激活电流的调制被引量：1
- 2013年
- 目的研究钴对P2X4受体介导的ATP-激活电流(IATP)的调制作用。方法应用双微电极电压钳技术,记录细胞外液加CoCl2对表达在爪蟾卵母细胞上的大鼠颈上神经节P2X4受体介导的IATP的调制作用。结果 0.1～30μmol/L浓度范围的钴离子对P2X4受体介导的IATP呈明显的增强效应,钴浓度越高,IATP幅值越大,0.1μmol/L、0.3μmol/L、1μmol/L、3μmol/L、10μmol/L、30μmol/L的钴离子使IATP增加的百分比分别为:12.1±4.6,30.4±5.1,49.3±6.8,70.9±7.2,104.2±16.7,145.8±20.1(P<0.01);IATP的量-效曲线在钴离子的作用下向左上移位;应用1μmol/L钴离子加ATP的混合液同时灌流细胞,可导致ATP的EC50从(15.6±1.9)μmol/L降低到(8.1±0.6)μmol/L(P<0.01);即使是高浓度的钴,仍然对IATP表现出明显的增强作用;当ATP浓度不变,钳制电位变化(-140～60mV)时,钴离子对P2X4受体介导的IATP的增强作用无明显变化。结论钴对P2X4受体介导的IATP的增强效应呈浓度依赖性而非电压依赖性。钴与通道蛋白胞外环的作用位点可能与锌和镉不同。
- 聂永莉张玉芹徐珍彭芳
- 关键词：钴P2X4受体爪蟾卵母细胞
- 不同酶切体系对胶回收纯化DNA浓度的影响被引量：4
- 2010年
- 目的通过建立不同的酶切体系,找寻酶切效果好、胶回收试剂盒纯化DNA得率高的实验设计。方法使用XhoⅠ单酶切重组质粒pcDNA3-P2X4,酶切体系的体积分别为:150μl、160μl、170μl、180μl;酶切体系组成为:dddH2O(补足体积)、BufferR(应用浓度是酶切体积的10%)、质粒DNA(无论所得质粒浓度如何,琼脂糖凝胶电泳胶回收的DNA上样量统一为23μg),XhoⅠ10μl(6μl、4μl两次加入);反应温度为:37℃;酶切的时间为2～3h。结果酶切体系越大,所需要的酶切时间越短、酶切效果越好、酶切条带越接近Marker标准条带(通过电泳拍照观察所得),但是胶回收纯化后DNA的浓度却越低:150μl体系DNA的浓度=308.96±8.71μg/ml,160μl体系DNA的浓度=286.62±8.37μg/ml,170μl体系DNA的浓度=245.80±15.64μg/ml,180μl体系DNA的浓度=198.00±16.54μg/ml(方差分析,P<0.05,n=5)。结论将酶切的体系放大,杂质将相对稀释,不需增加酶的用量就能取得较好的酶切效果;提取质粒的浓度和纯度也决定着酶切效果。
- 徐珍张玉芹聂永莉
- 关键词：琼脂糖凝胶电泳DNA纯化
- 汞神经毒性机制研究进展被引量：3
- 2010年
- 徐珍张玉芹彭芳
- 关键词：汞甲基汞神经毒性
- 汞抑制P2X4受体介导的ATP-激活电流被引量：1
- 2012年
- 目的研究汞对P2X4嘌呤受体介导的ATP-激活电流(ATP-activated currents,IATP)的影响及其特征。方法将编码大鼠P2X4受体的cDNA在体外转录成cRNA,通过显微注射技术将该cRNA注入非洲爪蟾卵母细胞中进行表达。应用全细胞双电极电压钳技术研究汞对P2X4受体介导的IATP的影响。结果大鼠P2X4受体能有效地表达于非洲爪蟾卵母细胞;汞对P2X4受体介导的IATP具有抑制作用;汞使ATP的量-效曲线右下移,最大效应电流比单独加入ATP时减小,汞的IC50是(8.9±5.3)μmol/L;随着汞孵育时间增加,对IATP的抑制效应也相应增加,并在5 min之后出现最大抑制效应;钳制电位为-120,-100,-60,-40,-20,20(mV)的情况下,汞对IATP的抑制作用差异无统计学意义。结论汞抑制P2X4受体介导的IATP具有可逆性、浓度依赖性和时间依赖性,无电压依赖性。
- 高越徐珍胡晓凤徐元媛鲍华芳张玉芹
- 关键词：汞P2X4受体爪蟾卵母细胞
