徐顺高
- 作品数：44 被引量：272H指数：6
- 供职机构：江苏大学临床医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省高校自然科学研究项目教育部留学回国人员科研启动基金更多>>
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- 伤寒沙门菌调节因子OmpR的原核表达与功能研究
- OmpR蛋白是目前在肠杆菌科(大肠杆菌、沙门氏菌和志贺氏菌)中研究最多的渗透压调节子。ompR基因与其邻近的envZ基因编码蛋白EnvZ/OmpR构成一重要的双组份调控系统,其中EnvZ是一种内膜组胺酸激酶,能作为环境感...
- 邹昕茅凌翔生秀梅张海方徐顺高黄新祥
- 伤寒沙门菌核糖核酸酶G对胞内非编码RNA T3956水平的影响被引量：1
- 2012年
- 目的:研究伤寒沙门菌核糖核酸酶G(RNase G)对非编码RNA(ncRNA)T3956胞内水平的影响。方法:利用自杀质粒介导的同源重组方法制备伤寒沙门菌RNase G基因(rng)缺陷变异株;利用重组质粒pBAD将rng导入rng缺陷变异株,构建rng缺陷回补株;通过实时定量PCR分别比较伤寒沙门菌野生株、rng缺陷变异株、回补株等在不同生长时期的ncRNA T3956水平。结果:成功制备伤寒沙门菌rng缺陷变异株、rng缺陷回补株和空质粒对照株;实时定量PCR结果表明,rng缺陷株中T3956的胞内水平较野生株有所升高,并且在对数中期和稳态期升高得更加明显,而回补株胞内T3956的水平又得到恢复。结论:伤寒沙门菌RNase G能够参与对胞内ncRNA T3956水平的调控,并且在细菌对数生长中期和稳态期作用更为明显。
- 王菲孟彦辰詹莉芳张晓磊张海方生秀梅徐顺高黄新祥
- 关键词：伤寒沙门菌非编码RNA
- 抗H:z66抗体诱导z66^+伤寒沙门菌鞭毛相变换特点的探讨被引量：1
- 2010年
- 目的探讨抗H∶z66抗体诱导z66+伤寒沙门菌鞭毛相变换的特点。方法利用含抗H∶z66抗体的半固体培养基诱导z66+伤寒沙门菌鞭毛发生相变换,通过提取z66+伤寒沙门菌和其相变株的线性质粒,利用脉冲场凝胶电泳和核酸内切酶分析比较z66+伤寒沙门菌鞭毛相变换前后线性质粒的结构,最后通过测定相变株的线性质粒全序列和Southern blot进一步揭示抗H∶z66抗体诱导z66+伤寒沙门菌鞭毛相变换的特点。结果 z66+伤寒沙门菌在抗H∶z66抗体的诱导下成功发生了鞭毛的单向相变换;这种单向相变换是由于伤寒沙门菌在抗体诱导下线性质粒缺失了含fljBA的2.6 kb末端区域所致,同时首次发现在鞭毛相变换后线性质粒结构反而变大,提示线性质粒可能形成了非共价结合的二聚体。结论该研究揭示了z66+伤寒沙门菌鞭毛的相变换特点,为更深入地研究z66+伤寒沙门菌奠定了基础。
- 张海方黄新祥张晓磊倪斌生秀梅徐顺高许化溪
- 关键词：伤寒沙门菌鞭毛线性质粒
- 葡萄糖脱氢酶连续监测法的研究被引量：7
- 2004年
- 目的建立葡萄糖脱氢酶连续监测法,优化其检测条件。方法按酶连续监测法测定要求,对克隆的枯草芽孢杆菌葡萄糖脱氢酶表达酶液进行测定,确定反应体系的底物浓度、最适pH、反应温度、延滞时间、测定时间、检测范围等。结果以葡萄糖和NAD+为底物时,用连续监测法检测葡萄糖脱氢酶是可行的。当葡萄糖、NAD+的终浓度分别为100mmol/L和2mmol/L时,在反应pH74,37℃,延滞时间30s,测定时间60s等条件下,检测上限可达10000U/L。结论连续监测法能用于测定葡萄糖脱氢酶,快速简便,结果可靠。
- 姜旭淦周丽萍徐顺高宋超邹昕
- 关键词：葡萄糖脱氢酶枯草芽孢杆菌连续监测法
- 伤寒沙门菌毒力及致病分子机制
- 黄新祥黄瑞张海方生秀梅吴淑燕徐顺高杜鸿李君荣许化溪
- 伤寒沙门菌是沙门菌属中一种重要的人类肠道致病菌，可造成严重的系统性感染—伤寒。伤寒沙门菌有较强的传染性，上世纪八十年代在我国造成过十三个省范围的大爆发流行，近年来在世界范围内每年有二千多万的病例，加之不断出现的多重耐药菌...
- 关键词：
- 关键词：伤寒沙门菌毒力
- 一种新颖简便的荧光实时RT-PCR相对定量方法的建立被引量：182
- 2005年
- 为建立一种新颖、简便的荧光实时RT-PCR相对定量方法,根据实时定量标准曲线,推导出相对定量基因表达的公式.公式显示相对表达指数只与CT值和标准曲线的斜率相关.构建标准曲线的标准品需要通过克隆和体外转录获得,实验过程繁琐.当人为成比例增减标准品各个稀释度的具体拷贝数时,标准曲线的斜率并不改变,说明标准曲线斜率与标准品的具体拷贝数无关.因此,新的相对定量方法可以用任何一个待测样品的总RNA(或cDNA),经系列稀释后作为标准品,来构建相对定量标准曲线,获得斜率.与绝对定量法比较,新方法获得了基本相同的斜率和非常一致的定量结果(差异小于4%),而传统的2-#$CT法却表现出较大的定量误差.这些结果表明,新的相对定量方法是一种简便、准确和高效的定量基因表达的方法.
- 张驰宇徐顺高黄新祥
- 临床生物化学及其检验课程的教学改革与实践被引量：5
- 2004年
- 姜旭淦郑铁生徐顺高马洁许文荣
- 关键词：临床生物化学检验课程教学改革医学教育医学检验专业
- z66抗体诱导伤寒沙门菌鞭毛抗原表达转变后染色体结构分析
- 2005年
- 目的 分析z66抗体诱导z66抗原阳性伤寒沙门菌鞭毛抗原表达改变后染色体结构。方法 利用脉冲凝胶电泳（PFGE）结合XbaI消化，对伤寒沙门菌标准菌株Ty2，z66抗原阳性株GIFU10007及z66抗体诱变j抗原阳性株GIFU10007-j的染色体DNA进行比较分析。结果 GIFU10007-j染色体DNA有两个XbaI片段与GIFU10007不同，总体染色体减少约250kb；与Ty2相比，GIFU10007染色体DNA有13个相同及7个不同的XbaI片段，总体染色体大小接近。结论 z66抗体诱导伤寒沙门菌鞭毛抗原表达转变后的染色体DNA发生了局部结构缺损；伤寒沙门菌z66鞭毛抗原阳性及诱变阴性株与单相标准菌株Ty2间在染色体DNA结构上有明显差异。
- 黄新祥徐顺高马洁张驰宇许化溪
- 关键词：伤寒沙门菌脉冲凝胶电泳染色体
- 临床生物化学检验课程实验教学改革的探索
- 在临床生物化学检验实验教学改革中,以生化检验技术为主线代替传统的以代谢物检测为主线的教学模式,增加综合性、设计性实验比例.在明确培养目标和实验教学目标的基础上,系统地安排实验内容和编写实验指导,完善教学体系.在改革实施过...
- 姜旭淦郑铁生徐顺高马洁王卉放丁建霞生秀梅
- 关键词：临床生物化学教学改革实验教学教学法
- 文献传递
- FORS-D分析软件“Random_fold_scan”和不同碱基随机打乱算法对FORS-D分析的影响
- 2007年
- 目的:开发FORS-D分析软件,并比较不同碱基随机打乱算法对FORS-D分析的影响。方法:根据单、双、三碱基及密码子随机打乱算法,用ActivePerl-5.8.8.820编写"Random_fold_scan"软件,它通过系统命令调用RNA-structure4.2来计算FORS-D值。用4种碱基随机打乱算法分别计算来自不同物种的12个mRNA序列,并且比较它们对FORS-D值的影响。结果:4种随机打乱策略不影响核酸序列的FORS-D分布趋势,但是单碱基打乱算法可以获得比其他3种算法更低的FORS-D值。比较4种打乱算法获得的FORS-D值的Z-score分布,发现单碱基打乱产生的FORS-D值显著小于0的比例最高,相反,FORS-D值显著大于0的比例最低。结论:单碱基随机打乱算法能够彻底破坏原始核酸的序列信息,在概念和理论上能够真正反映FORS-D的生物学涵义。这表明FORS-D分析中单碱基打乱足以给出准确、可靠的数据信息。此外,我们开发了软件"Random_fold_scan"用于FORS-D分析。
- 徐顺高魏继福张驰宇
- 关键词：Z-SCORE
