成枚初
- 作品数：2 被引量：19H指数：2
- 供职机构：中南大学湘雅二医院肾病研究所更多>>
- 发文基金：湖南省自然科学基金高等学校国家重点实验室和教育部重点实验室访问学者专项基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 采用蛋白质组分析高浓度葡萄糖对人腹膜间皮细胞的影响被引量：2
- 2005年
- 目的 研究腹透液中葡萄糖对人腹膜间皮细胞(HPMCs)分泌蛋白质影响,并采 用蛋白质组学方法分析其对腹膜纤维化和腹膜功能的影响。方法 采用胰蛋白酶消化法从人腹 膜组织中分离HPMCs,第3代用于实验。实验分组:对照组(F12培养基)和高糖组(F12培养基+ 4％葡萄糖),分别观察24 h和48 h。经二维凝胶电泳(2-DE)分离人腹膜间皮细胞总蛋白,每组 重复3次,PDQuest图象分析软件比较对照组和高糖组平均凝胶,求差异蛋白质。采用基质辅助 激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)鉴定部分差异蛋白质。结果 获得12块经2-DE 分离的分离胶,每组3块。通过PDQuest图象分析软件发现24 h高糖组与对照组比较有27种蛋 白质表达有差异(P<0．05);48 h高糖组与对照组比较有50种蛋白质的表达有差异(P<0．05), 表达上调有22个蛋白质斑点,表达下调有55个蛋白质斑点;对其中23个差异蛋白质斑点进行 了肽质指纹图分析,鉴定出23种蛋白质,其中有2个点为同一蛋白质。这些蛋白质涉及到高糖 对HPMCs的细胞骨架、糖代谢、黏附、细胞因子、抗氧化剂、表面活性剂等物质的调节。结论 高 糖导致腹膜纤维化是多因素、多途径,要防止腹膜透析腹膜纤维化保护腹膜透析效能,最好避免 过多使用高糖透析液。
- 刘映红刘伏友张浩彭佑铭成枚初刘虹中南大学肾病研究所 中南大学湘雅二院肾内科李茂玉李翠
- 关键词：蛋白质组腹膜间皮细胞高糖二维电泳
- 黄芪对TGF-β1致人腹膜间皮细胞分泌细胞外基质的影响被引量：17
- 2003年
- 目的 :探讨黄芪对腹膜纤维化的作用及可能机制。方法 :人腹膜间皮细胞 (HPMC)作体外培养 ,在第三代 ,将细胞转板至细胞融合后 ,将其分为对照组 (F12 ) ,TGF β1组 (F12 +TGF β15ng/ml) ,TGF β1加黄芪 1组(F12加TGF β1加黄芪 ,黄芪终浓度为 10 0 μg/ml,TGF β1加黄芪 2组 (F12加TGF β1加黄芪 ,黄芪终浓度为 1mg/ml) ,分别在 2 4,48h采用ELISA法检测上清液中纤维连接蛋白 (FN)和纤溶酶原抑制剂 (PAI 1)的含量 ;FNmRNA ,PAI 1mRNA和碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)mRNA的表达采用半定量逆转录多聚酶链反应 (RT PCR)检测。结果 :①HPMC表达FN ,PAI 1和bFGF ;②HPMC在 5ng/mlTGF β1刺激下分泌FN及PAI 1明显的增加 ,与对照组比较差异有显著性意义 (P <0 .0 5 ) ;③HPMC在TGF β1和不同浓度的黄芪刺激后 ,在 2 4h内可使FN及PAI 1减少 ,尤其是PAI 1与TGF β1组比差异有显著性意义 (P <0 .0 5 )。④HPMC经TGF β1作用 12h后 ,FNmRNA ,PAI 1mRNA和bFGFmRNA半定量结果与对照组相比 ,其表达量分别上调 18.5 4%,8.6 %和 6 6 .9%,HPMC经 10 0μg/ml和 1mg/ml黄芪作用 12h后FN ,PAI 1和bFGFmRNA的表达与TGF β1组比较均下调 ,其结果分别为5 .3 %,1.3%,3 .8%和 5 .4%,74.3 %,2 3 .7%。结论 :TGF β1可促进HPMC合成?
- 刘映红刘伏友段绍斌肖平袁芳彭佑铭成枚初夏家辉
- 关键词：TGF-Β1腹膜间皮细胞分泌细胞外基质
