曾军燕
- 作品数:1 被引量:1H指数:1
- 供职机构:西安交通大学医学院第一附属医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生更多>>
- JC病毒VLP-Z具有定向基因传递载体特性被引量:1
- 2013年
- 为了确定JC病毒(JCV)主要外壳蛋白VP1体外重组的病毒样颗粒(VLP-Z)是否具有定向基因传递载体的特性,我们利用二硫苏糖醇(DTT)和EGTA裂解、继之含钙离子溶液透析的方法,使VLP-Z包裹外源性DNA(PUC19)。通过PCR检测到VLP-Z包裹的外源性DNA不能被DNaseⅠ酶消化,证明外源性DNA包裹在VLP-Z内部。包裹外源性DNA(PUC19)的VLP-Z感染培养的HeLa细胞,分别提取细胞总DNA及核DNA,进行PCR检测,结果在细胞浆及细胞核中均可检测到外源性DNA,证明VLP-Z可以转运外源性DNA进入细胞核。包裹pEG-FP-N1质粒的VLP-Z转染HeLa细胞后,可在细胞内表达绿色荧光蛋白GFP。VLP-Z结合IgG后进行凝胶电泳及库马氏亮蓝染色,结果显示VP1-Z和IgG两个条带,体外结合实验中,VLP-Z可与IgG抗体结合。以上结果证明,VLP-Z具有基因传递载体的特性和IgG结合功能,可以作为定向基因传递载体。
- 曾军燕屈秋民
- 关键词:JC病毒病毒样颗粒