曾繁启
- 作品数:9 被引量:16H指数:3
- 供职机构:长春生物制品研究所更多>>
- 相关领域:医药卫生轻工技术与工程化学工程更多>>
- 防龋卵黄抗体的研制被引量:7
- 1999年
- 应用本室构建的龋齿疫苗工程菌株及 GTF抗原免疫母鸡 ,取鸡卵黄以水 -硫酸铵 -离子交换层析法提取纯化蛋黄抗体 (Ig Y ) ,以放免法测定血清及蛋黄中的抗体。结果用上述 2种抗原免疫的鸡 ,在血清及蛋黄中均能检出抗 GTF抗体。提纯的蛋黄抗体 ,经 SDS- PAGE电泳检测 ,相对分子质量约为 2 2 0 0 0 0 ,纯度达到 97.9% ,经 2 -巯基乙醇处理后 ,分为重链和轻链 ,相对分子质量分别约为 76 0 0 0和 2 80 0 0。经免疫印迹分析 ,具有良好的免疫学特异性。
- 姜崴赵小琳宋昌玲刘德宣曾繁启
- 关键词:卵黄抗体龋齿葡糖基转移酶
- 基因工程龋齿疫苗菌株的构建被引量:3
- 1995年
- 采用PCR技术,扩增出两端分别增添了EcoR1和BamH1酶切位点的变链菌GTF基因,将其与高效表达的质粒PBV220载体连接后,克隆到大肠杆菌中,成功地构建出一株高效表达GTF基因的菌株。该菌株培养方法简便,GTF抗原表达量高,稳定性好,抗原主要存在于细胞内部,无包涵体形成,用所提的GTF抗原免疫家兔具有明显的免疫原性.是制备龋齿疫苗较为理想的工程菌株。
- 曾繁启赵小琳宋昌玲姜崴曹广强张嘉铭
- 关键词:龋齿疫苗基因工程菌株
- 冻干干扰素保护剂(稳定剂)的筛选被引量:3
- 2002年
- 取同一批重组人干扰素α2a原液 ,分别加入A、B、C、D、E五种冻干保护剂 ,按《中国生物制品规程》方法进行冻干 ,检测其效价、外观、水分含量、内毒素含量 ,以现行干扰素生产使用的人血白蛋白C保护剂作为对照 ,结果显示 ,使用A、D、E保护剂制品在 40℃放置 4个月 ,效价降低了 45 %~ 6 0 % ,使用B保护剂的制品稳定性最好 ,在 40℃放置 4个月 ,效价仅下降了 35 % 。
- 姜崴张春丽王雪丰朱丽娜孟东方张金岩曾艳曾繁启
- 关键词:干扰素稳定剂冻干保护剂
- 基因工程变链菌防龋疫苗的研制被引量:2
- 1998年
- 本文采用我们自己构建的基因工程龋齿疫苗菌株,大罐发酵培养3批、菌体收量平均湿重为2.67g/L,表达率为44.27%。菌体经超声裂解,硫酸铵和链霉素粗提,再经吸附层检,凝胶过滤和离子交换柱层析等步骤纯化精提GTF抗原3批。提纯的GTF抗原,平均比活,提纯倍数和收率,分别为58.34u/mg、6.08倍和19.25%。此抗原经SDS-PAGE电泳,分子量为55KD,纯度达到96.7%,并对湿度具有较好的稳定性能。
- 赵小琳宋昌玲姜崴刘德宝杨琳曾繁启
- 关键词:防龋疫苗变形链球菌基因工程
- 乙型脑炎灭活疫苗细菌内毒素检查方法的研究被引量:2
- 2001年
- 将细菌内毒素检查法 (凝胶法 )扩大应用于乙脑灭活疫苗的质量控制及其内毒素的检测。按《中国药典》及《中国生物制品规程方法》方法 ,复核鲎试剂灵敏度、确定疫苗的L值、计算MVD、进行干扰试验及内毒素的检测。疫苗L值确定为 30 0EU/mL ,MVD为 12 0 0倍。用灵敏度 0 .2 5EU/mL的鲎试剂 ,疫苗的最大非干扰浓度为将其稀释 30倍 ,将此疫苗稀释 12 0倍进行干扰试验 ,对内毒素的检测无干扰作用。以此法对 15批疫苗进行内毒素检查均呈阴性反应。结果显示 。
- 郑晓丽曾艳兰燕杜晶刘丽敏刘延文齐凤艳司杨乐曾繁启
- 关键词:细菌内毒素鲎试剂乙脑灭活疫苗
- 重组人细胞因子制品细菌内毒素的检测被引量:1
- 2003年
- 为了考察细菌内毒素检查法 (BET法 )检测重组人细胞因子制品的细菌内毒素及其质量控制的可行性。按照 2 0 0 0年版《中国生物制品规程》的规定 ,确定L值 ,计算MVD ,进行干扰试验 ,检测制品的细菌内毒素 ,并与家兔热原法 (RPT法 )进行比较。结果表明 ,用标示灵敏度为 0 .12 5EU/ml的鲎试剂 ,重组人干扰素α2a(IFNα2a)、粒细胞巨噬细胞集落刺激因子 (GM CSF)、白介素 2 (IL 2 )制品 ,最高非干扰浓度分别为稀释至 3 1.7倍 ( 9.5万IU/ml) ,10 .9倍 ( 2 7.5万 μg/ml) ,40倍 ( 0 .2 5万IU/ml)。将IFNα2a和GM CSF按规程规定稀释 80倍 ,对细菌内毒素的检测均无干扰作用 ,而IL 2稀释 8倍对检测有抑制作用 ,但经 40倍稀释后可消除抑制。以BET法检测上述制品的细菌内毒素和以RPT法测定家兔热原质 ,符合率为 10 0 %。结果提示 。
- 李英华曾艳陈日兰孟东方姜崴兰燕杜晶周丽左毅曾繁启
- 关键词:细菌内毒素检查法鲎试剂
- 重组人细胞因子制品细菌内毒素的检测
- 为了考察细菌内毒素检查法(BET法)检测重组人细胞因子制品的细菌内毒素及其质量控制的可行性.按照2000年版《中国生物制品规程》的规定,确定L值,计算MVD,进行干扰试验,检测制品的细菌内毒素,并与家兔热原法(RPT法)...
- 李英华曾艳陈日兰孟东方姜崴兰燕杜晶周丽左毅曾繁启
- 关键词:细菌内毒素检查法鲎试剂
- 文献传递
- 变形链球菌DNA酶切片段在大肠杆菌中克隆的研究
- 1993年
- 将变链菌染色体DNA和pBR322 DNA,分别用HindⅢ酶切,再用T_4DNA连接酶连接,转化到大肠杆菌R_5受体菌中。根据插入灭活的原理,筛选Ap^r、Tc^s菌株,并经抗药性、琼脂糖凝胶电泳,酶切、核酸杂交及再转化等试验证明,已将变链菌DNA酶切片段克隆到大肠杆菌中,获得2627个克隆株,建立了基因库。为筛选变链菌保护性抗原基因,进一步研制基因工程龋齿菌苗奠定了基础。
- 曾繁启刘斌宋淑芳阎红燕宋昌玲张嘉铭
- 关键词:变链菌克隆龋齿菌苗
- 放免法用于检测基因工程防龋疫苗抗体的研究
- 2001年
- 用国产12 5I同位素 ,以氯胺T氧化法 ,标记变链菌GTF抗原 ,其放射碘利用率 >40 % ,放化纯度 >95 % ,所得标记物置 - 2 0℃ 12 0d或 4℃ 6 0d仍可使用。采用放免法检测基因工程防龋疫苗免疫的家兔、鸡血清抗GTF抗体和卵黄抗GTF抗体 ,结果提示 ,该法是一种特异性强 ,灵敏度高 。
- 姜崴赵小琳齐凤艳刘德宣曾繁启
- 关键词:放免法