朱冬青
- 作品数：10 被引量：37H指数：3
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- 米诺环素对糖基化终末产物所致大鼠视网膜微血管渗漏的作用及其机制研究被引量：1
- 2010年
- 目的研究基质金属蛋白酶-9(MMP-9)在糖基化终末产物(AGEs)所致血-视网膜屏障损害中的作用,评估米诺环素对AGEs所致血-视网膜屏障损害的治疗作用。方法 36只SD大鼠用随机数字表法分为牛血清白蛋白(BSA)组、AGEs-BSA组和AGEs-BSA+米诺环素组。BSA组和AGEs-BSA组分别自尾静脉注入BSA和AGEs-BSA,每日1次,每次40mg/kg,AGEs-BSA+米诺环素组在每日注射AGEs-BSA的同时隔日腹腔注射米诺环素45mg/kg。14d后,每组取6只大鼠用伊文思蓝(EB)法观察并比较各组视网膜血管的通透性,其余大鼠处死后,采用RT-PCR及Westernblot法观察视网膜MMP-9的表达。结果 AGEs-BSA组MMP-9mRNA和蛋白水平均较BSA组升高,差异有统计学意义(P<0.01),同时,视网膜微血管渗透性也显著升高(P<0.01)。而在AGEs-BSA+米诺环素组大鼠视网膜基因和蛋白水平的MMP-9均被抑制(P<0.01),同时视网膜微血管渗漏被部分逆转(P<0.01)。视网膜微血管的渗透性与MMP-9蛋白的表达呈正相关(r=0.891,P=0.000)。结论 AGEs所致的视网膜微血管渗漏与MMP-9的高表达有密切关系,AGEs的作用至少部分是通过MMP-9实现的。米诺环素能部分逆转AGEs-MMP-9途径所致的血管渗漏。
- 陈永东许迅吴强郑志朱冬青顾青
- 关键词：米诺环素基质金属蛋白酶-9糖基化终末产物糖尿病视网膜病变血-视网膜屏障
- 糖尿病视网膜病变的药物防治研究现状被引量：23
- 2006年
- 长期高血糖可产生多途径代谢异常。以往糖尿病视网膜病变的药物治疗的研究多集中于抑制和拮抗血管内皮生长因子表达增加、蛋白激酶C的活化、蛋白质非酶糖基化产物的堆积、多元醇代谢通路的异常、生长激素、血管紧张素转换酶系统的作用等方面。近年来,色素上皮衍生因子、抗氧化应激和抑制炎症反应的药物及药物作用的多环节影响被引起关注。尽管某些药物实验和临床研究已取得了令人鼓舞的结果,但要开发出真正有效的防治药物还任重道远。
- 朱冬青许迅
- 视网膜血管内皮细胞和周细胞在酸性环境中的增生和凋亡被引量：1
- 2008年
- 目的探索酸中毒在视网膜新生血管生长的细胞机制中的作用。方法原代培养获取牛视网膜血管内皮细胞(BRECs)和周细胞(BRPs);将传代后的细胞暴露在酸性环境中,通过细胞活力、细胞周期和细胞凋亡检测,观察细胞的增生和凋亡状况。结果细胞培养得到纯化的BRECs和BRPs;酸中毒明显抑制BRECs和BRPs的生长(P<0.01);使处于S期的BRECs和BRPs减少(P<0.01),DNA合成受抑制。重度酸中毒抑制BRECs凋亡(P<0.05),引起BRPs凋亡(P<0.01)。结论酸中毒引起BRPs凋亡而抑制BRECs凋亡,提示视网膜酸中毒参与了糖尿病视网膜病变(DR)的新生血管生长过程。
- 朱冬青许迅郑志顾青
- 关键词：酸中毒内皮细胞周细胞增生凋亡
- 乳酸对鼠视网膜血管内皮生长因子表达的影响
- 2010年
- 目的 观察不同浓度乳酸对培养的大鼠视网膜血管内皮生长因子（VEGF）表达的影响.方法 2周龄Sprague-Dawley大鼠36只,根据培养液中乳酸含量分为10、20、30 mmol/L乳酸组,每组均为12只大鼠.处死大鼠,摘出眼球剥离视网膜,将视网膜置入插入式培养皿中培养24 h.培养皿中培养液分别为含10、20、30 mmol/L乳酸的Dulbecco改良Eagle培养液＋2%胎牛血清.光学显微镜观察视网膜结构、实时荧光定量聚合酶链反应（RT-PCR）和蛋白质免疫印迹（Western blot）检测VEGF的表达.结果 光学显微镜组织病理学观察结果显示,视网膜层次清晰,结构完整,未见明显细胞溶解和坏死.RT-PCR检测结果显示,10、20、30 mmol/L乳酸组VEGF mRNA表达量分别为0.74±0.06、0.99±0.12、1.45±0.17;Western blot检测结果显示,10、20 mmol/L乳酸组和30 mmol/L乳酸组视网膜VEGF表达量分别为0.34±0.15、0.54±0.16、0.93±0.23.RT-PCT和Western blot检测结果均显示30 mmol/L乳酸组较10 mmol/L乳酸组VEGF表达明显升高.结论 乳酸诱导视网膜VEGF表达有浓度依赖性.
- 朱冬青许迅郑志邬海翔顾青
- 关键词：视网膜血管内皮生长因子类
- 血小板反应蛋白-1在糖尿病大鼠视网膜微血管中的表达被引量：4
- 2008年
- 目的研究高糖状态下血小板反应蛋白-1(TSP-1)在视网膜微血管中的表达。方法链脲佐菌素腹腔注射诱导建立大鼠糖尿病动物模型,设立正常对照组。体外培养牛视网膜微血管内皮细胞,免疫组化法进行鉴定。分别于建模后2、4、8周,运用免疫组化及Western blotting检测大鼠视网膜中TSP-1的表达。收集不同时段高糖孵育的内皮细胞,Real-time PCR检测TSP-1mRNA表达的变化。结果TSP-1在糖尿病大鼠视网膜组织的表达随病程而增加;在正常对照组中,TSP-1的表达呈现生理性的年龄-相关性增长,其增加程度远低于相应周龄的糖尿病大鼠。高糖孵育内皮细胞48 h时,TSP-1 mRNA较正常对照增高,在高糖作用5 d时反而下降(P<0.05)。结论TSP-1对维持血管稳态起重要作用。在高糖状态下,TSP-1高表达可能对新生血管的形成起到重要的负反馈作用。
- 许琳刘堃朱冬青邬海翔顾青许迅
- 关键词：血小板反应蛋白-1高糖视网膜微血管
- 牛视网膜微血管内皮细胞的培养方法学原理和生长性状初探被引量：2
- 2008年
- 视网膜血管内皮细胞培养的主要问题是细胞不易获取和纯化。尽管国内文献已有较多报告，但对方法学原理和细胞生长性状描述不够详尽，欠指导性。我们将所做的工作作一总结，报告如下。
- 朱冬青许迅郑志顾青
- 关键词：细胞培养技术
- 硝化应激中反式花生四烯酸聚集对糖尿病大鼠视网膜微血管的影响
- 目的：研究在糖尿病状态下,反式花生四烯酸是否改变,及对视网膜微血管周细胞的作用及其机制。方法：链脲佐菌素 60mg/kg 腹腔注射建立糖尿病大鼠模型。气/质联用分析大鼠血浆中反式花生四烯酸和花生四烯酸的含量,选择离子
- 许琳许迅寻国良姚祝军刘玉敏邱云平刘堃朱冬青邬海翔顾青何志平
- 文献传递
- 硝化应激中反式花生四烯酸聚集对糖尿病大鼠视网膜微血管影响的研究
- 背景在导致缺血的微血管病变中,例如糖尿病视网膜病变(DR)和早产儿视网膜病变(ROP),硝化应激(nitrative stress)起了重要作用,但迄今为止硝化应激的介质很少被阐述。最新研究发现反式花生四烯酸(trans...
- 许琳许迅寻国良刘玉敏姚祝军邱云平刘堃朱冬青
- 文献传递
- 胰岛素对正常糖和高糖浓度下牛视网膜微血管内皮细胞血管内皮生长因子表达的影响被引量：3
- 2008年
- 目的探讨胰岛素、糖浓度及其两者的联合作用对牛视网膜微血管内皮（BRE）细胞血管内皮生长因子（VEGF）表达的影响。方法对照实验研究。采用选择性培养方法，培养BRE细胞，传代后分别在正常糖（5mmol／L）或高糖（30mmol／L）浓度下培养3d，甘露醇平衡渗透压，血清饥饿12h，给予或不给予100nmol／L胰岛素作用24h。实时荧光定量检测VEGFmRNA表达水平；人脐静脉血管内皮细胞增殖法、免疫荧光检测法、免疫印迹法检测VEGF蛋白表达水平。采用SPSS12．0统计学软件对数据进行分析，胰岛素、糖浓度及其交互作用对BRE细胞的VEGFmRNA和VEGF蛋白表达水平的影响，采用2×2析因设计定量资料方差分析，以P〈0．05作为差异有统计学意义。结果胰岛素或高糖浓度可以显著提高BRE细胞的VEGFmRNA（F=5．67，9．04；均P〈0．05）和VEGF蛋白（F=5．50，5．57；均P〈0．05）表达水平，但胰岛素联合高糖浓度的作用较其单独作用减弱。结论高糖浓度下可以降低胰岛素诱导的VEGF表达水平，因此，VEGF可能不是胰岛素治疗导致的糖尿病视网膜病变短期恶化的主要因素。
- 邬海翔夏欣刘堃郑志朱冬青许迅顾青
- 关键词：胰岛素视网膜血管内皮细胞血管内皮生长因子A糖尿病视网膜病变
- 视网膜酸化诱导VEGF与PEDF表达及其与氧化应激的关系被引量：3
- 2012年
- 背景缺氧与高糖是引起视网膜新生血管生长的主要原因，可引起视网膜糖酵解作用增强，导致组织酸中毒。目的探讨视网膜酸中毒对视网膜血管内皮生长因子（VEGF）与色素上皮衍生因子（PEDF）表达的影响及氧化应激的作用。方法从2周龄雄性SD大鼠中分离出视网膜。分别在NaHCO，调制的pH7．2、6．8、6．5酸性环境的DMEM培养液中培养24h；另外，在上述酸性培养液中培养后用PBS洗涤视网膜2遍后置于pH值为7．2的新鲜培养液中继续培养24h；同时，在上述酸性培养液中加入抗氧化剂对视网膜进行培养。制作视网膜标本，然后行苏木精-伊红染色，采用荧光定量聚合酶链反应（PCR）及免疫蛋白印迹技术检测各组大鼠视网膜中VEGF和PEDF蛋白及其mRNA的表达，以pH7．2作为对照。结果视网膜培养24h后，pH7．2组、pH6．8组视网膜层次清晰，但pH6．5组视网膜出现空泡。正常视网膜VEGFmRNA的表达为（112±11）％，pH7．2组为（100±7）％，差异无统计学意义（P=0．55）；pH6．8组、pH6．5组中的视网膜VEGFmRNA分别为（196±43）％、（251±29）％，均较pH7．2组明显升高，差异均有统计学意义（P〈0．05）。正常视网膜PEDFmRNA水平为（86±19）％，pH7．2组为（100±33）％，差异无统计学意义（P=0．64）；pH6．5组视网膜PEDFmRNA水平为（230±66）％，较pH7．2组明显升高（P〈0．05）。VEGF与PEDF蛋白与其mRNA表达趋势一致。视网膜酸化纠正后，pH7．2、6．8、6．5组视网膜VEGFmRNA分别为（100±13）％、（111±9）％、（113±9）％，3个组之间比较差异无统计学意义（F=2．51，P=0．16）。PEDFmRNA的表达分别为（100±13）％、（110±9）％、（108±11）％，3个组之间比较差异无统计学意义（F=0．98，P=0．43）。加入抗氧化剂后，pH7．2组视网膜VEGFmRNA水平为（100±9）％，pH6．8组为（106±7）％，pH6．5组为（148±22
- 朱冬青郑志顾青许迅
- 关键词：视网膜酸中毒血管内皮生长因子色素上皮衍生因子
