朱玉贤
- 作品数：142 被引量：746H指数：16
- 供职机构：北京大学更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金国家转基因植物研究与产业化专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生天文地球更多>>
- 棉花KCS12基因的启动子及其应用
- 本发明公开了棉花KCS12基因的启动子及其应用。本发明所提供的棉花KCS12基因为如下1)-3)中任一所述的DNA分子：1)序列表中序列1所示的DNA分子；2)在严格条件下与1)的DNA分子杂交且具有相同功能的DNA分子...
- 朱玉贤秦咏梅柳皋隽
- PPF1基因C端片段在大肠杆菌中的融合表达和纯化以及抗体制备被引量：7
- 2002年
- PPF1是与G2豌豆短日不衰老现象紧密相关的基因之一 .以pSK PPF1为模板 ,用PCR方法得到了编码该蛋白C端的基因片段 ,称为PPFC .进一步将该基因片段克隆到中间载体pGEM T easy ,再酶切得到PPFC片段插入到pGEX 4T 1载体中 ,构建成表达质粒pGEX 4T PPFC .在BL2 1细胞中经IPTG诱导表达 ,得到GST PPFC融合蛋白 .用GST亲和柱纯化得到PPFC蛋白 ,将其作为抗原得到兔源的多克隆抗体 .Western杂交分析表明所得到的抗体具有较强的特异性 ,ELISA分析证实其效价为 10 6.该抗体的获得为用免疫沉淀等免疫分析技术研究PPF1与其它蛋白质的相互作用 。
- 徐云剑苏力坦.阿巴白克力吉栩朱玉贤
- 关键词：C端片段大肠杆菌纯化抗体制备多克隆抗体植物细胞
- 尿苷二磷酸木糖异构酶及其编码基因与应用
- 本发明公开了一种尿苷二磷酸木糖异构酶及其编码基因与应用。尿苷二磷酸木糖异构酶，是如下a)或b)的蛋白：a)由序列表中序列2所示的氨基酸序列组成的蛋白质；b)在序列表中序列2的氨基酸序列经过取代和/或缺失和/或添加一个或几...
- 朱玉贤庞朝友逄宇宋文强王慧靳翔秦咏梅
- 文献传递
- 利用PCR技术检测537份新疆结核病人痰标本中的结核分枝杆菌被引量：1
- 2001年
- 目的 提高聚合酶链反应在检测人结核分枝杆菌中的特异性和敏感性。方法 在聚合酶链反应中对 4种DNA片段即结核杆菌特异插入序列IS6 110 ,IS10 81,和 16SrRNA ,6 5kDa摸板进行了比较 ;为获取较多的细菌DNA ,临床痰标本处理采用了国际标准化方法主要包括用一定量的N -乙酰 -L半胱胺酸和氢氧化钠处理痰标本 ;改进了RCR混和液的成份即添加了甘油 ,dUTP -尿嘧啶糖基化酶。结果 选择IS6 110作为结核杆菌特异性摸板用于检测细菌DNA ,制备出了 6批人结核杆菌PCR检测试剂盒 ,在对来自新疆结核病研究所的 5 37份痰标本的检测中发现 ,该试剂盒检测的特异性为 6 5 .97% ,敏感性为 93 .5 3 %。结论改良TB -PCR试剂盒显示有较高的敏感性 ,特异性还有待于进一步完善 ,该试剂盒在临床诊断中有一定的价值。
- 蔡宏李君莲呼西旦李淑霞黄丽茜陈银华许苗朱玉贤
- 关键词：结核分枝杆菌痰标本聚合酶链式反应结核病
- 核DNA相减与分子克隆被引量：1
- 1992年
- 核DNA的减法(Genomic Subtraction)或核DNA相减后聚合酶链式反应(Subtracting PCR)系国际分子生物学领域90年代初露头角的最新技术,深受科学界重视。应用这一技术可以在没有任何探针材料的情况下,由研究缺失突变体的表现型入手,从亲本材料中克隆与突变体缺失片段相对应的遗传性状,包括许多对高等动植物生长发育影响重大的基因或基因群。
- 朱玉贤
- 关键词：核DNA分子克隆
- 现代战争与分子生物学
- 1992年
- 乍一看这题目,读者可能会认为这是两件风马牛不相及的事,毫无共同之处。其实不然。分子生物学和新兴的生物工程技术,虽然只有短短数十年的历史,却已经在包括军事科学在内的许多应用科学领域中崭露头角,日渐引人注目。在海湾战争中,以美国为首的多国部队为了对付伊拉克可能使用的生物武器,投入了大量的人力物力。据美国国防部透露,在高达数百亿美元的战争开支中,有相当一部分用于购买化学防护装备和进行防护训练。不难想象,如果在两个或多个科学较为发达的国家之间爆发战争。
- 朱玉贤
- 关键词：美国国防部防护装备多国部队化学防护细菌降解
- 结核分枝杆菌四联核酸疫苗免疫原性和保护效率被引量：16
- 2003年
- 对结核杆菌四联DNA疫苗的免疫应答和保护效果进行了评价。用结核分枝杆菌Ag85B,MPT-64,MPT-63和ESAT-6等4个分泌蛋白基因的表达载体首次免疫小鼠21d后,Ag85B抗体滴度达到1:200,二次免疫后为1:102400,三次免疫后为1:1288。MPT-64和MPT-63的抗体滴度在首次免疫21d后即高达1:25600,二、三次免疫后呈下降趋势。三次免疫21d后均未检测到ESAT-6的特异性抗体。用该DNA四联苗免疫小鼠后,4种蛋白都诱导脾脏细胞产生较高水平的细胞应答(产生了特异性γ-干扰素)。三次免疫后经静脉强毒攻击,四联苗免疫组小鼠肺脏的细菌数比对照空载体组减少了99.8％,保护水平显著高于BCG疫苗组、对肺组织的病理形态特征观察表明,空载体pJW4303的对照小鼠,肺部严重损伤,肺实质干酪样坏死,坏死结节占肺实质的50％～70％,而四联苗免疫的小鼠,肺组织结构正常,实质无肉芽肿,肺泡轮廓清晰。研究证实,Ag85B,MPT-64,MPT-63和ESAT-6四种分泌蛋白编码基因组成的四联DNA疫苗具有很高的免疫应答水平和保护效率。
- 蔡宏田霞呼西旦潘怡李国利庄玉辉朱玉贤
- 关键词：结核病结核分枝杆菌免疫原性免疫应答
- 尿苷二磷酸－4－酮－6－脱氧葡萄糖异构还原酶及其编码基因与应用
- 本发明公开了一种尿苷二磷酸－4－酮－6－脱氧葡萄糖异构还原酶及其编码基因与应用。尿苷二磷酸－4－酮－6－脱氧葡萄糖异构还原酶，是如下a)或b)的蛋白：a)由序列表中序列2所示的氨基酸序列组成的蛋白质；b)在序列表中序列2...
- 朱玉贤庞朝友逄宇王慧靳翔秦咏梅
- 文献传递
- 结核分支杆菌HSP65 DNA疫苗的制备和重组蛋白的原核表达被引量：1
- 2005年
- 结核分支杆菌分子量为 65ku的热应激蛋白 (HSP65)是一种非常重要的抗原 ,为了研制结核病核酸疫苗 ,构建编码HSP65DNA ,并将其分别克隆到原核和真核载体中进行了表达。以标准结核分支杆菌H3 7Rv基因组DNA为模板 ,用PCR法扩增出HSP65基因 ,经限制性内切酶消化后 ,插入真核表达载体pJW43 0 3中 ,获得重组质粒pJW HSP65。同时将HSP65基因插入原核表达载体pET 2 2b(+) ,获得重组质粒pET2 2b HSP65。将pET2 2b HSP65重组质粒转化大肠杆菌蛋白酶缺陷型菌株BL2 1 (DE3 ) /PolysS ,用IPTG诱导 ,进行蛋白表达。结果表明 ,经酶切鉴定和序列测定证实插入片断为目的基因HSP65,构建成功了真核重组质粒pJW HSP65即可作为结核病DNA疫苗。经SDS PAGE检验证明可以在大肠杆菌细胞中高效表达 ,将表达蛋白进行纯化 。
- 赵博蔡宏于大海朱玉贤
- 关键词：结核分支杆菌HSP65DNA疫苗
- 结核分枝杆菌DNA三价苗的细胞与体液应答研究被引量：3
- 2003年
- 本文构建了含分枝杆菌抗原Ag85B(30kDa) ,MPT - 83(2 6kDa)和ESAT - 6 (6kDa)分泌蛋白的真核表达载体pJW 4 30 3,酶切鉴定和序列分析 ,确定含有正确的读码框。重组表达质粒导入COS7细胞内并瞬时表达 ,证明上述三种重组质粒能在COS7细胞中表达出特异蛋白。三种重组表达质粒同时肌注免疫小鼠 ,首免 ,二免和三免小鼠后 2 1dAg85B抗体平均滴度分别为 1∶32 0 0 ,1∶5 12 0 0和 1∶10 2 4 0 0 ,MPT - 83抗体平均滴度二次免疫和三次免疫后 2 1d测得为 1∶2 5和 1∶5 0 ,三次免疫后均未检测到ESAT - 6特异性抗体。在三免后 2 1dAg85B和MPT - 83的特异性细胞因子γ -干扰素的浓度分别 2 75 pg/ml±16 5 ,2 2 0 pg/ml± 19 8;而ESAT - 6的γ -干扰素浓度为 2 2 0 pg/ml± 9 9。本研究表明 ,多价核酸疫苗能同时诱导机体产生细胞免疫应答和体液免疫应答 ,可能有利于增强疫苗对抗结核病的抗性。
- 蔡宏田霞李淑霞胡勤朱玉贤
- 关键词：结核分枝杆菌细胞免疫应答AG85BESAT-6
