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实时荧光定量PCR技术在转基因猪pGH基因与IGF-1基因差异表达中的应用: 胡义洁朱艳菲姚延珠马康戚顺民刘倩倩孙金海; 关键词：猪生长激素基因实时荧光定量PCR

红褐色乌苏里貉TYRP1基因的克隆及表达水平分析被引量：5: 2014年; 实验旨在探讨红褐色乌苏里貉和野生型乌苏里貉TYRP1基因的核酸序列以及表达水平差异。本实验克隆了红褐色和野生型乌苏里貉TYRP1基因CDS序列,并利用实时定量PCR技术对TYRP1基因在2种毛色貉中的mRNA表达水平进行了分析。结果表明:2种貉TYRP1基因CDS序列全长1 614 bp,包括完整的开放阅读框,共编码537个氨基酸;红褐色乌苏里貉TYRP1基因编码序列与狗、猪、绵羊、小鼠、人、牛、猫、马、虎鲸和黑猩猩核酸序列高度同源,同源性分别为99.07%、90.56%、89.64%、83.22%、88.90%、89.39%、90.87%、88.63%、90.25%和88.65%,与野生型乌苏里貉序列完全相同。利用SPSS软件进行独立样本t检验,结果表明TYRP1基因在2种貉皮肤组织中均可稳定表达,利用F=(1+E)-△△Ct计算可知TYRP1基因在红褐色乌苏里貉中的表达量是野生型乌苏里貉的0.93倍,但差异不显著(P>0.05)。该实验为TYRP1基因的功能分析及红褐色乌苏里貉毛色突变分子遗传机制的探讨提供了一定的理论基础。; 朱艳菲胡义洁吴明明李祯孙金海张廷荣; 关键词：克隆

中国西门塔尔牛SCD1基因多态性与肉质性状的相关分析被引量：11: 2013年; 利用Illumina HD SNP技术对484头中国西门塔尔牛SCD1基因的遗传变异及其与部分肉质性状的相关性进行了分析。结果表明,该群体中存在7个SCD1基因的SNP位点。SCD1基因第4内含子存在A8605G、A9229G与A10050C 3个SNP位点;第5内含子存在1个SNP位点A12304G;3’UTR区存在A13655G、C14790T与A15565G 3个位点。A8605G位点的B等位基因为优势等位基因,频率为0.748,其他位点等位基因频率在0.4～0.6之间。χ2检验结果显示,SCD1基因的所有SNPs均处于哈代-温伯格平衡状态(P>0.05)。SCD1基因的7个SNPs位点全部为中度多态,杂合度和有效等位基因数均较高。SCD1基因SNP多态性与肉质性状的关联分析表明,SCD1基因对肌内脂肪含量、剪切力、大理石花纹等级和脂肪颜色有一定的影响,可以作为改善牛肉质量进行标记辅助选择的重要候选基因。; 张静静宋玉芹李桢朱艳菲张廷荣; 关键词：SNP 肉质性状

3种毛色乌苏里貉染色体数目的比较被引量：2: 2013年; [目的]为建立3种毛色貉生物学特性数据库提供理论依据。[方法]以红褐色乌苏里貉、野生乌苏里貉和吉林白貉为研究对象,利用外周血淋巴细胞培养法制备染色体标本,对3种毛色乌苏里貉的染色体数目进行比较。[结果]红褐色乌苏里貉和野生乌苏里貉二倍体细胞染色体数为56的细胞频率分别为86%和83%,表明红褐色乌苏里貉和野生乌苏里貉种群体细胞的染色体众数为56。吉林白貉二倍体细胞的染色体数目为56的细胞频率为70%,低于其他2种貉。[结论]红褐色乌苏里貉和野生乌苏里貉的染色体众数相同,均为56;吉林白貉的染色体众数为56或57,其染色体数目存在多态现象。; 李延鹏梁玉颖马泽芳朱艳菲孙金海; 关键词：乌苏里貉染色体数目二倍体嵌合体

SYBR GreenⅠ荧光定量PCR法检测转双基因猪pGH基因与IGF-1基因的表达被引量：2: 2014年; 为确定猪生长激素基因(pGH)与胰岛素样生长因子-1(IGF-1)在F0代保育期转双基因猪和同窝非转基因猪体内mRNA水平的表达差异情况,利用SYBR GreenⅠReal-time PCR法检测精子介导纳米基因载体法获得的F0代2月龄转基因猪pGH基因与IGF-1基因的mRNA表达水平,根据荧光定量结果绘制熔解曲线和扩增曲线图谱,分析图谱并用F=(1+E)-ΔΔCt公式计算其相对表达量。结果表明:F0代转双基因猪pGH基因的mRNA表达量是同期非转基因猪的1.2倍,IGF-1基因的mRNA表达量是同期非转基因猪的1.53倍,说明这2种外源基因均成功导入,并能在猪体内表达。本实验建立了能够稳定测评家猪生长激素与胰岛素样生长因子-1基因表达水平的方法,为进一步分析pGH-IGF-1生长轴对家猪生产性能的具体影响及转基因的实际应用提供了分子生物学方面的资料。; 胡义洁吴明明朱艳菲孙金海; 关键词：猪生长激素基因

红褐色乌苏里貉和吉林白貉KIT基因第二外显子的克隆及多态性分析被引量：6: 2013年; 选取野生型乌苏里貉、红褐色乌苏里貉和吉林白貉各3只为研究对象,利用克隆测序技术,得到长为276 bp的KIT基因第二外显子序列,分析其多态性及与其他物种的同源性。结果显示:红褐色乌苏里貉KIT基因第二外显子与犬、狐、家猫、虎鲸、野猪、马的同源性分别为97%,97%,92%,89%,87%,87%;对野生型乌苏里貉、红褐色乌苏里貉和吉林白貉KIT基因第二外显子序列进行对比分析发现,3种貉序列完全匹配,说明在此处未发生突变。; 朱艳菲张廷荣孙金海; 关键词：KIT基因克隆多态性

盐分胁迫下杠柳叶片光合特性的光响应研究被引量：6: 2013年; 利用CID型便携式光合作用仪测定不同NaCl浓度下杠柳叶片净光合速率（Pn）、蒸腾速率（Tr）、气孔导度（Gs）、水分利用效率（WUE）及光能利用率（LUE）生理参数的光响应过程，阐明盐分胁迫下其对光照响应的规律，探讨有利于杠柳正常生长的盐分浓度和光照条件。结果表明：（1）各盐分浓度下杠柳叶片光补偿点（LCP）在21．89～65．05μmol．m^-2·S^-1之间变动，介于阴性植物与阳性植物之间；杠柳随土壤盐分的不同，其光合作用参数对光照强度表现出一定的适应性和可塑性；50mmol·L^-1盐分浓度下杠柳光合同化能力最强，最有利于其干物质的积累，表现出一定的耐盐性。（2）轻度的盐分胁迫（小于50mmol·L^-1）可以提高杠柳叶片的Pn、Gs、WUE和LUE，而盐分胁迫对杠柳的Tr有抑制作用，并随着盐分浓度的增加其抑制作用愈强烈。（3）维持杠柳正常生长的土壤盐分浓度小于50mmol·L^-1，最佳PAR为1000～2000μmol·m^-2·S^-1；而保持杠柳最大WUE和LUE的光照强度分别为800和100μmol·m^-2·S^-1。; 李树朋吴仁烨朱艳菲王艳英黄龙飞孟伟邓传远; 关键词：盐分胁迫杠柳光合特性光响应

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朱艳菲