李亚玲
- 作品数：3 被引量：8H指数：2
- 供职机构：南方医科大学南方医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 水溶性乌梢蛇总蛋白的提取方法及细胞毒性检测被引量：3
- 2010年
- 背景:寻找分析乌梢蛇的具体活性成分,需对乌梢蛇总蛋白进行提取和分析,但目前有关乌梢蛇蛋白的提取方法甚少。目的:建立提取水溶性乌梢蛇总蛋白的方法,检验水溶性乌梢蛇总蛋白体外细胞毒性。方法:应用酶裂解与盐析相结合的方法提取乌梢蛇总蛋白,采用Bradford蛋白浓度测定试剂盒检测盐析前后所得的蛋白浓度,使用SDS-PAGE分离蛋白,应用图像分析软件分析QuantityOne4.4比较分析其区带差异。分别用盐析后所得的不同浓度的蛋白(0.5,5,50,150,450和900mg/L)和蛋白提取液作用于成纤维样滑膜细胞,四甲基偶氮唑蓝法测定各组成纤维样滑膜细胞增殖率。结果与结论:水溶性总蛋白浓度与盐析总蛋白浓度比较差异无显著性意义(P>0.05);两种方法所提取的水溶性乌梢蛇总蛋白差异无显著性;提取液组和盐析后所得的蛋白质的150和450mg/L组均可以抑制成纤维样滑膜细胞的增殖;而空白对照组和酶裂解与盐析后所得蛋白的0.5,5和50mg/L对细胞的增殖作用无影响。提示酶裂解和盐析结合的方法可提取高质量低毒的水溶性乌梢蛇总蛋白,所提取蛋白包含了乌梢蛇的特征性蛋白,适合于体外细胞模型的研究。
- 吴贺勇李娟李亚玲
- 关键词：MTT法细胞毒性类风湿性关节炎
- 皮肤鳞状细胞癌整体可视化动物模型实验研究
- 2010年
- 目的:建立整体可视化皮肤癌的模型,以期实时动态观察药物与肿瘤体积、血清指数等指标的量效关系,为研究皮肤癌临床治疗提供一种更好的动物模型。方法:利用pEGFP-N1表达质粒转染皮肤鳞状细胞癌(以下简称鳞癌)SCL-1细胞,经筛选后建立稳定表达绿色荧光蛋白(EGFP)的皮肤鳞癌细胞株pEGFP-SCL-1。细胞悬液接种于裸鼠皮下,借助整体荧光成像系统实时监测细胞在接种部位生长情况。结果:皮肤鳞癌细胞pEGFP-SCL-1稳定、高效表达EGFP,裸鼠皮下注射部位种植成瘤,1周左右肿瘤向周围组织浸润;常规组织病理学检查验证了可视化模型的可靠性。结论:利用稳定转染的皮肤鳞癌pEGFP-SCL-1细胞,在注射部位种植建立整体可视化皮肤鳞癌,为研究皮肤癌治疗提供有效的阶段性监测的实验模型。
- 李亚玲李娟
- 关键词：鳞状细胞皮肤裸鼠
- 水溶性乌梢蛇总蛋白对成纤维样滑膜细胞分泌白介素-1β、α-肿瘤坏死因子和白介素-10的影响被引量：5
- 2009年
- 目的观察水溶性乌梢蛇总蛋白对类风湿关节炎(RA)成纤维样滑膜细胞分泌IL-1β、TNF-α和IL-10的影响,以探讨治疗RA的可能机制。方法用常规方法提取水溶性乌梢蛇总蛋白,取RA患者滑膜组织进行成纤维样滑膜细胞培养;选择对数生长期的细胞进行实验,实验分五组,分别加入昆明山海棠(200μg/ml,阳性对照组)、水溶性乌梢蛇总蛋白(50、150、450μg/ml)DMEM溶液,及加入等体积的DMEM溶液(空白对照组)进行细胞培养,72小后采用ELISA方法测定培养液上清中IL-1β、TNF-α和IL-10的水平,RT-PCR检测滑膜细胞IL-1β、TNF-α和IL-10的mRNA表达。结果水溶性乌梢蛇总蛋白150μg/ml、450μg/ml组和阳性对照组细胞培养液上清中TNF-α、IL-1β水平明显降低,mRNA表达减少,而IL-10水平升高,mRNA表达增加,与空白对照组差异具有统计学意义(P<0.05)。结论水溶性乌梢蛇总蛋白可能通过抑制成纤维样滑膜细胞TNF-α和IL-1β及促进IL-10分泌来减轻炎症反应,到达治疗RA的目的。
- 吴贺勇李娟李亚玲
- 关键词：成纤维样滑膜细胞白介素-1肿瘤坏死因子白介素-10
