李庆
- 作品数：15 被引量：24H指数：3
- 供职机构：首都医科大学附属北京佑安医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金首都卫生发展科研专项国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生环境科学与工程更多>>
- 慢性乙型肝炎患者外周血调节性B细胞与乙肝病毒DNA定量的相关性被引量：2
- 2014年
- 细胞免疫应答在乙型肝炎病毒（HBV）感染后的清除过程中发挥了重要的作用．但是研究发现,慢性乙型肝炎患者体内特异性T细胞对HBV呈现了免疫低反应性，其确切机制仍不清楚。传统观点认为B细胞主要发挥体液免疫应答和抗原提呈作用。实际上．B细胞也具有免疫负调节作用。最近的研究证实，调节性B细胞（Bregs）自身免疫性疾病、炎症性疾病和癌症中具有致病作用。
- 李庆武永乐李冰
- 关键词：慢性乙型肝炎患者调节性DNA定量外周血细胞免疫应答
- 20例HIV/AIDS患者耐药结果分析被引量：4
- 2009年
- 目的对高效抗逆转录病毒治疗(highly active antiretroviral therapy,HAART)失败的HIV/AIDS患者,进行回顾性基因型耐药检测,了解HAART过程中HIV-1耐药位点的产生,分析基因型耐药检测在HAART过程中的必要性及指导意义。方法采用Versant HIV-1RNA3.0检测病毒载量;采用TriTEST CD4FITC/CD8PE/CD3PerCP Reagent检测CD4+T淋巴细胞计数;采用Trugene HIV-1Genotyping Kit和OpenGene DNA系统进行基因型耐药检测;用Blast等分子生物学软件进行HIV-1亚型分析。结果20例患者中,17例保存有治疗前的血浆标本,其中1例在治疗前即存在非核苷类逆转录酶抑制剂(non-nucleoside reverse transcriptase inhibitors,NNRTIs)耐药相关突变。20例患者均进行了治疗后耐药检测,其中3例未检出耐药相关突变。其他17例检出耐药相关突变,其中13例出现NNRTIs耐药相关突变;突变位点主要为K103N、Y188L、Y181C、V106M和G190A;11例显示有核苷类逆转录酶抑制剂(nucleoside/nucleotidereverse transcriptase inhibitors,NRTIs)耐药相关突变,突变位点主要为M184V、T/215Y/F、D67N、K70R以及K219E/Q;3例出现蛋白酶抑制剂(protease inhibitors,PIs)耐药相关突变,其中主突变为M46I/L、V82F/A,而次级突变中以M36I、L63P出现的频率最高。20例患者中B亚型9例(45%,9/20),CRF01_AE重组亚型5例(25%,5/20),CRF07_BC重组亚型5例(25%,5/20),CRF06_CPX1重组亚型1例(5%,1/20)。结论对治疗失败的患者进行基因型耐药检测可以帮助医生判断HAART失败的原因,并指导治疗方案的优化;亚型分析显示HIV-1病毒亚型的流行与感染途径之间存在明显的联系。
- 魏飞力吴昊张彤李庆刘志英王蕊焦艳梅陈德喜
- 关键词：HIV-1基因型耐药
- pcDNA-GPC3真核表达载体的构建及鉴定
- 目的：构建人类GPC3重组真核表达载体。方法：以人类肝脏cDNA文库为模板扩增出GPC3基因序列，应用T克隆载体及pcDNA真核表达载体重构，将质粒转化进入HLE人肝癌细胞系，进行荧光免疫方法检测。结果：测序结果序列正确...
- 李莉李庆乔路新丁渭陈德喜
- 关键词：肝细胞癌
- pcDNA-GPC3真核表达载体的构建及鉴定
- 2012年
- 目的构建人类GPC3重组真核表达载体。方法以人类肝脏cDNA文库为模板扩增出GPC3基因序列,应用T克隆载体及pcDNA真核表达载体重构,将质粒转化进入HLE人肝癌细胞系,进行荧光免疫方法检测。结果 测序结果序列正确,荧光染色转染质粒的HLE细胞可见细胞浆和细胞膜上有GPC3的表达。结论成功构建真核表达载体pcDNA-GPC3,并在真核细胞中可以表达。
- 李莉李庆乔路新丁渭吕福东
- 关键词：GPC3基因表达融合蛋白
- 786例慢性乙型肝炎患者恩替卡韦基因型耐药突变及特征分析被引量：1
- 2021年
- 目的了解恩替卡韦耐药突变特点。方法选取2009年1月至2020年10月北京佑安医院检测的恩替卡韦基因型耐药的CHB患者786例,分析耐药情况。结果786例恩替卡韦基因型耐药患者中HBV基因型C亚型705例(89.7%),B亚型79例(10.1%),D亚型2例(0.3%)。共发现21种耐药突变类型,其中rtL180M+rtM204V(或者rtM204I)+rtV173耐药突变类型219例(27.9%),rtL180M+rtM204V(或者rtM204I)+rtT184耐药突变类型218例(27.7%),rtL180M+rtM204V+rtS202耐药突变类型175例(22.3%),rtL180M+rtM204V+rtS202+rtT184耐药突变类型52例(6.6%),rtL180M+rtM204V+rtM250耐药突变类型44例(5.6%),其他16种耐药突变类型共78例(9.9%)。结论恩替卡韦基因型耐药患者中,HBV基因型C亚型占绝对优势,rtL180M+rtM204V(或者rtM204I)+rtV173突变类型数量最多,rtT184位点突变数量最多。
- 岳秀娟李庆王珊珊陈德喜陈德喜
- 关键词：慢性乙型肝炎恩替卡韦基因分型耐药突变
- 慢性肝病患者拉米夫定耐药毒株突变模式特征分析被引量：8
- 2017年
- 目的 探讨拉米夫定（LAM）耐药毒株突变模式及HBV S基因相关变异在不同疾病进展慢性肝病患者中的特征.方法 收集LAM耐药慢性肝病患者的血液标本,获得相应的HBV RT基因核苷酸序列,分析耐药突变位点、药物耐受和耐药相关HBV S基因变异特点及组间差异.结果 本研究纳入慢性乙型肝炎（CHB）患者47例,乙肝肝硬化（LC）和乙肝相关肝细胞癌（HCC）患者16例.M204I单点突变与L180M＋M204I/V为LAM耐药的慢性肝病患者最常见突变形式（35/63,55.56％）.LC/HCC组对三种以上核苷（酸）类似物同时耐药人数高于CHB组（62.50％ vs 34.04％,P =0.046）.LC/HCC组在HBV-S区检测到与免疫逃逸相关的HBsAg突变位点数多于CHB组（62.50％ vs 31.91％,P=0.031）,I126T/V与G145A（LCC/HCC,60％）、I126S/T与S117T（CHB,46.67％）为HBsAg逃逸突变的最常见形式.两组患者均检测到RT区变异伴随HBsAg终止密码子的突变（rtA181T/sW172＊和rtM204I/sW196＊）.结论 不同疾病进展慢性肝病患者LAM耐药毒株突变及相关HBV S基因变异特征存在差异,LC/HCC患者多重耐药和免疫逃逸毒株比例高于CHB患者.
- 欧阳雅博李庆魏飞力张玉林黄雁翔宋晨朝郭向华谢放王珊珊陈德喜
- 关键词：乙型慢性肝病拉米夫定耐药突变
- Evolutionary characteristics of hepatitis B virus quasi species with rtA181T/V mutation during antiviral therapy
- 欧阳雅博魏飞力郭向华乔录新王珊珊庞丽君李庆
- 脑脊液来源人类免疫缺陷病毒tat真核表达载体的构建及鉴定
- 2014年
- 目的探讨脑脊液来源人类免疫缺陷病毒(HIV)tat真核表达载体的构建,并研究TAT蛋白在真核细胞的表达。方法从脑脊液中扩增出HIV tat基因,构建pcDNA-tat真核表达载体,所构建载体经酶切和测序鉴定。将构建的表达载体转染293T细胞系,通过免疫荧光检测TAT蛋白的表达。结果成功扩增tat基因,酶切和测序结果证实正确构建了表达载体pcDNA-tat,免疫荧光证实所构建载体能在293T细胞中有效表达HIV TAT目的蛋白。结论成功构建真核表达载体pcDNA-tat,为了解HIV在中枢神经系统的潜伏机制奠定实验基础。
- 刘利锋乔录新李庆李莉李威吴昊陈德喜
- 关键词：脑脊液人类免疫缺陷病毒TAT基因
- 新型HIV-1核酸定量内标构建及验证被引量：1
- 2017年
- 目的构建一种稳定的以病毒颗粒为基础的HIV核酸定量检测内标。方法在实验室原有新型表型耐药载体pcDNA6.2-LTR gagpol的基础上,利用PCR扩增法在不改变p24保守区基础上突变核苷酸,经Gateway重组得到含突变碱基的pNL43-△ENV-LUC-ATTR表达载体,该载体与水泡性口膜炎病毒(VSV)质粒共转染293细胞48 h后收集上清中HIV-1内标假病毒颗粒,检测p24抗原含量,定量假病毒滴度,以倍比稀释内标质粒、内标质粒与阳性标本混合品、内标假病毒颗粒与阳性标本混合品为模板进行实时定量PCR法,观察内标质粒、内标假病毒颗粒内的核酸与内标引物探针的匹配情况,以及是否受样本探针引物的干扰。结果定点突变表型耐药载体pcDNA6.2-LTR gagpol内的p24保守区片段;获得仅具有1次感染性的HIV-1假病毒颗粒(3.61×10~9IU/ml);p24抗原检测含量为283.2 pg/ml;实时定量PCR法确定内标质粒、内标假病毒颗粒内的核酸与内标引物探针匹配良好,内标引物探针对阳性标本探针无干扰。结论成功建立了一种以假病毒颗粒为基础的HIV-1核酸定量检测内标。
- 李庆刘芳岳秀娟李冰陈德喜
- 关键词：核酸定量病毒颗粒内标
- 肝癌组织中c-myc基因突变的研究被引量：2
- 2013年
- 目的检测肝细胞癌中c-myc的DNA苏氨酸58(T58)和丝氨酸62(S62)的突变情况,以揭示肝癌发生发展的机制。方法应用聚合酶链反应(PCR)方法,检测89例肝癌组织及癌旁组织中c-myc基因的T58和S62的突变情况。结果在89例肝癌组织及癌旁组织中未见c-myc的T58或S62及周围氨基酸突变,但发现c-myc的DNA水平与原发性肝细胞癌(HCC)的病理分级存在一定关系,低分化组(87.5%,21/24)、中分化组(74.4%,29/39)及高分化组(53.8%,14/26)与c-myc阳性率差异有统计学意义(P<0.05)。结论 c-myc基因的表达与HCC的病理分级存在一定关系,其在肝癌组织的高表达不是由于T58或S62的突变导致c-myc稳定性增高所致,亦有其他的因素参与其中。
- 李莉刘利锋武彦宁李庆陈德喜
- 关键词：基因,C-MYC苏氨酸丝氨酸基因突变
